Yes相关蛋白和转录共激活因子PDZ结合基序表达在甲状腺乳头状癌发生发展过程中的作用

目的探究Yes相关蛋白(YAP)和转录共激活因子PDZ结合基序(TAZ)在甲状腺乳头癌发生发展过程中的作用。方法用特异性小干扰RNA(siRNA)转染人甲状腺乳头状癌细胞系(TPC-1)使其YAP或TAZ表达水平下调, 转染NC为阴性对照组, YAP-si、TAZ-si和TAZ-si+YAP-si为实验组。用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)、蛋白质印迹法(Western blot)检测转染后TPC-1中YAP和TAZ的表达水平, 分别采用细胞计数试剂盒(CCK-8)、流式细胞仪、β-半乳糖苷酶染色法、Transwell实验检测YAP或(和)TAZ低表达对TPC-1增殖、凋亡、衰老、迁移、侵袭的影响。将小鼠随机分成5组, 每组6只, 将转染后的上述TPC-1接种至裸鼠背部皮下组织(接种体积为0.1 ml/只, 接种数量为1×106/裸鼠)。观察并分析在体内YAP或(和)TAZ低表达对肿瘤生长的影响。两样本比较采用t检验。结果 YAP-si组TPC-1增殖、迁移、侵袭低于NC组(0.327±0.015比0.361±0.011、0.397±0.021比0.450±0.017、0.560±0.030比0.760±0.036, t=3.188、3.411、7.385, P0.05;195.000±2.000比361.667±6.429, t=42.875, P0.01;108.000±8.660比205.333±7.234, t=14.940, P0.01), 衰老阳性、总凋亡率高于NC组[0.185±0.002比0.094±0.001, t=-53.276, P0.01;(26.367±3.250)%比(7.473±0.729)%, t=-获悉更多9.824, P0.01];TAZ-si组TPC-1增殖、迁移、侵袭低于NCselleckchem FUT-175组(0.317±0.015比0.361±0.011、0.400±0.010比0.450±0.017、0.537±0.021比0.760±0.036, t=4.056、4.330、9.291, P0.05;199.677±8.326比361.667±6.429, t=26.673, P0.01;132.000±13.454比205.333±7.234, t=8.315, P0.01), 衰老阳性、总凋亡率高于NC组[0.183±0.002比0.094±0.001, t=-59.719, P0.01;(23.367±3.156)%比(7.473±0.729)%, t=-8.479, P0.01]。YAP-si组肿瘤的体积、重量小于NC组(0.566±0.056比1.021±0.125、2.778±0.257比5.324±0.362、19.877±1.660比31.171±1.962、48.583±3.668比86.441±4.158、80.619±1.243比194.014±9.460、137.865±3.430比331.738±10.514, t=8.127、14.052、10.758、16.726、29.112、42.952,CHONDROCYTE AND CARTILAGE BIOLOGY P0.01;0.730±0.009比1.232±0.015, t=69.917, P0.01), TAZ-si组肿瘤的体积、重量小于NC组(0.688±0.056比1.079±0.145、2.778±0.392比5.871±0.644、20.135±1.378比31.095±1.088、46.115±4.565比86.680±4.479、80.177±2.468比193.102±8.575、142.736±3.975比344.824±23.604, t=6.178、10.048、15.295、15.536、30.402、20.681, P0.01;0.743±0.014比1.220±0.008, t=73.873, P0.01)。YAP-si+TAZ-si组TPC-1增殖、迁移、侵袭低于YAP-si组(0.293±0.015比0.337±0.021、0.333±0.025比0.450±0.017、0.427±0.015比0.547±0.038, t=2.907、6.614、5.091, P0.05;86.333±18.148比195.000±2.000, t=10.309, P0.01;81.667±7.506比108.000±8.66, t=3.980, P0.05), 衰老阳性、总凋亡率高于YAP-si组[0.336±0.004比0.185±0.001, t=-61.707, P0.01;(41.500±0.609)%比(26.500±0.755)%, t=-14.615, P0.01];YAP-si+TAZ-si组TPC-1增殖、迁移、侵袭低于TAZ-si组(0.293±0.015比0.340±0.01、0.333±0.025比0.416±0.017、0.427±0.015比0.537±0.021, t=4.427、4.702、7.379, P0.05;86.333±18.148比199.667±8.327, t=9.831, P0.01;81.667±7.506比132.000±13.453, t=5.659, P0.01)。YAP-si+TAZ-si组肿瘤体积、重量低于YAP-si组(0.661±0.078比5.324±0.362、2.347±0.325比19.877±1.662、11.671±0.713比48.583±3.668、20.891±1.599比80.619±1.243、41.903±2.519比137.865±3.421, t=30.873、25.325、24.199、72.241、55.407, P0.01;0.314±0.006比0.730±0.009, t=90.585, P0.01), YAP-si+TAZ-si组肿瘤体积、重量低于低于TAZ-si组(0.661±0.078比5.871±0.644、2.347±0.325比20.135±1.378、11.671±0.713比46.115±4.565、20.891±1.599比80.177±2.468、141.903±2.519比42.736±3.975, t=19.666、30.733、18.260、49.358、52.546, P0.01;0.314±0.006比0.743±0.014, t=69.818, P0.01)。以上差异均有统计学意义。结论 YAP和TAZ表达促进甲状腺乳头癌发生发展, 且两者具有协同效应。