TGFA通过PI3K/AKT信号通路对骨关节炎小鼠软骨细胞增殖和凋亡的影响

目的 探讨转化生长因子α(TGFA)通过磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(AKT)信号通路对骨关节炎(OA)小鼠软骨细胞增殖和凋亡的影响。方法 小鼠分为假手术组及模型组,免疫组化法检测软骨组织Ki67、半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶(Caspase)-3阳性细胞率;分离OA小鼠软骨细胞,分为对照组、TGFA低浓度组(5 ng/ml TGFA)、TGFA高浓度组(10 ng/ml TGFA)及通路抑制组(10 ng/ml TGFA+10μmol/L LY294002),均加10 ng/ml白细胞介素(IL)-1β,MTT法检测细胞增殖,流式细胞仪检测细胞凋亡,Western印迹法检测软骨组织、软骨细胞中p-PI3K/PI3K、p-AKT/AKT、Ki67、CaspaRadioimmunoassay (RIA)se-3蛋白表达。结果 与假手术组相比,模型组小鼠软骨组织Ki67阳性细胞率及p-PI3K/PI3K、p-AKT/AKT、Ki67蛋白表达水平显著降低,Caspase-3阳性细胞率及Caspase-3蛋白表达水平显著升高(P<0.05);与对照组相比,TGFA低、高浓度组OA小鼠软骨细胞OD值及p-PI3K/PI3K、pZ-VAD-FMK细胞培养-AKT/AKT、Ki67蛋白表达水平显著升高,细胞凋亡率及Caspase-3蛋白表达水平显著降低,且TGFA高浓度组明显优于TGFA低浓度组(P<0.05);与TGFA高浓度组相比,通路抑制组OA小鼠VP-16采购软骨细胞OD值及p-PI3K/PI3K、p-AKT/AKT、Ki67蛋白表达水平显著降低,细胞凋亡率及Caspase-3蛋白表达水平显著升高(P<0.05)。结论 TGFA可促进OA小鼠软骨细胞增殖,抑制细胞凋亡,其机制可能与激活PI3K/AKT通路,调控Ki67、Caspase-3表达有关。