研究背景胃癌是世界上常见的癌症类型之一,患者预后差,死亡率高。虽然随着医疗技术的不断发展,手术、化疗、靶向药等新的治疗方法不断涌现,但胃癌患者的预后仍不理想,给社会、家庭及个人带来了极大的负担。为了提高胃癌患者的预后,首先要提高胃癌的早期诊断率。早期胃癌是指癌组织局限于黏膜层及黏膜下层,不论有无淋巴结转移。早期胃癌患者的治疗方法首选内镜下切除,大多数病例不需要进行外科手术即可痊愈,5年生存率达90%以上。因此,提高胃癌的早期诊断率,能够有效改善患者的预后。胃癌的确诊需要依靠组织活检病理诊断,但活检标本局限,仅依靠组织学进行诊断具有较强的主观性,存在漏诊的风险。因此需要结合客观的免疫组织化学指标来辅助诊断。在之前的研究中,我们课题组发现黏蛋白MUC2、MUC5AC及MUC6在早期胃癌中出现了表达模式的失调,利用免疫组化检测三种黏蛋白的表达情况有助于早期胃癌的诊断。MUC2主要在肠杯状细胞中表达,在正常胃黏膜中不表达,但当胃黏膜发生肠上皮化生时,MUC2的表达上调。MUC5AC表达于胃小凹上皮及腺颈部黏液细胞,即局限于胃黏膜的上半部分;MUC6则主要表达于胃底腺,即局限于胃黏膜的下半部分。二者作为分泌型黏蛋白,均是胃黏液屏障的重要组成成分。当发生胃癌时,MUC2的表达上调,MUC5AC的表达减低,而MUC6的表达区域则向胃黏膜的上半部分延伸。这种表达失调的现象有助于胃癌的诊断及鉴别诊断。然而在胃癌活检标本中不易观察黏蛋白表达区域的变化,因此仍需结合其他免疫组化指标。三叶因子(trefoil factor,TFF)是一类主要表达于胃肠道黏膜的小分子多肽,主要由黏液细胞合成和分泌,对胃肠道黏膜具有保护作用。TFF2又称解痉多肽,主要表达于胃小凹上皮、腺颈部黏液细胞及幽门腺细胞,参与胃黏液屏障的构成。TFF2 是解痉多肽表达性化生(spasmolytic polypeptide-expressing metaplasia,SPEMselleck合成)的标志物。SPEM是目前普遍接受的胃癌的癌前病变之一。我们课题组的主要研究方向是消化道早癌,因此在日常工作及科研中重点关注了 TFF2分子。我们发现TFF2在正常胃黏膜中高表达,当胃黏膜发生肠上皮化生时表达降低,其表达几乎仅存在于化生的杯状细胞中,而在胃黏膜异型增生或腺癌时,TFF2几乎不表达。同时,我们发现大多数情况下,TFF2与胃型黏液MUC5AC及MUC6表达在相同的胃癌细胞群内。因此,我们推测TFF2可以作为辅助胃癌诊断的免疫组化指标。研究目的1.探究TFF2与早期胃癌患者临床病理学参数之间的相关性;2.探究TFF2的表达下调在早期胃癌诊断中的应用意义。研究方法1.收集2019年1月1日至2021年12月31日期间,于山东大学第二医院行内镜下黏膜剥离术(endoscopic submucosal dissection,ESD),并且经病理诊断为T1期胃腺癌的标本163例,整理相关临床病理资料,包括患者年龄、性别、肿瘤大小、肿瘤细胞浸润模式、Vienna分类、T分期及组织学类型;2.利用免疫组化染色检测TFF2、MUC2、MUC5AC、MUC6、错配修复蛋白(MLH1、MSH2、MSH6、PMS2)、P53以及Ki67在早期胃癌中的表达情况;3.分析TFF2与早期胃癌患者临床病理学参数以及临床常用免疫组化指标间的相关性;4.对比分析早期胃癌与癌旁组织TFF2表达的差异性。研究结果1.早期胃癌中,TFF2的表达与患者年龄、性别、肿瘤大小、T分期、肿瘤细胞浸润模式以及Vienna分类无显著相关性;2.TFF2的表达与早期胃癌组织学类型相关,其中相比于管状腺癌,乳头状腺癌或含有乳头状结构的早期胃癌中TFF2阳性表达更多见;3.早期胃癌中,TFF2与MUC5AC、MUC6、错配修复蛋白以及P53的表达情况相关,但与MUC2无显著相关性;4.早期胃癌中,Ki67指数在TFF2阳性组和阴性组之间无显著差异;5.相比于癌旁胃黏膜,TFF2的表达在早期胃癌中显著下调。研究结论1.TFF2的表达缺失有助于早期胃癌的诊断;2.TFF2的表达失调可能是胃癌发生的始动环节;3.TFF2的表达在肠型胃癌和胃型胃癌间具有差异性,提示TFF2在不同组织学类型的胃癌启动过程中,可能通过不同的通路发挥了不同的作用。研究背景胃癌是世界上第四大癌症致死原因。虽然早期胃癌患者预后较好,通常仅需要内镜下切除即可。但进展期胃癌患者不仅需要进行外科手术治疗,还需要辅以化疗、靶向治疗等措施,预后较差。因此为了提高胃癌患者的预后,除了要提高胃癌的早期诊断率,还需要寻找有效的进展期胃癌治疗靶点。进展期胃癌是指癌组织浸润超出黏膜下层,不论有无淋巴结转移。进展期胃癌可进一步分为可切除胃癌和不可切除胃癌。进展期可切除胃癌虽然可以通过外科手术进行治疗,但预后仍不理想,容易复发和转移。进展期不可切除胃癌主要选择化疗、人类表皮生长因子受体2(human epidermal growth factor receptor 2,HER2)靶向药治疗及免疫治疗等手段。但化疗有效率低,副作用大。HER2在胃癌中阳性率仅约15%,并且胃癌患者应用HER2靶向药的疗效也远不如乳腺癌患者。此外,免疫抑制剂在中国缺乏充足的临床应用数据,且药物种类选择少、价格昂贵。因此,为了提高进展期胃癌患者的预后,亟需探究新的治疗靶点及靶向药物。Claudin18.2是目前胃癌治疗的新兴靶点,是Claudins蛋白家族的成员之一。Claudins蛋白家族是细胞间紧密连接的主要组成成分,主要功能是维持细胞间的机械连接,并参与细胞旁选择性通道的构成。Claudin18.2特异性地表达于胃上皮,在胃癌的发生发展过程中发挥着重要的作用。该分子作为胃癌治疗的新兴靶点受到了广泛的关注。目前,针对Claudin18.2的靶向药Zolbetuximab(IMAB362)、嵌合抗原受体(chimeric antigen receptor,CAR)T细胞疗法等正处于临床试验阶段,现有结果显示其疗效显著并且副作用小。但目前缺乏国内胃癌患者Claudin18.2表达情况的统计分析,且Claudin18.2的表达与胃癌患者预后的相关性尚存在争议。此外,有文献提示TFF蛋白对Claudins蛋白具有调节作用,而且Claudin18.2的表达缺失与SPEM的发生有关。因此selleckchem CP-456773,在本阶段研究中,我们不仅分析了Claudin18.2及TFF2与进展期胃癌患者临床病理参数及预后的相关性,也同时分析了进展期胃癌中TFF2与Claudin18.2表达间的相关性,为后续进行具体的机制研究提供了思路。研究目的1.探究Claudin18.2及TFF2与进展期胃癌患者临床病理学参数之间的相关性;2.探究进展期胃癌中Claudin18.2与TFF2表达的相关性;3.分析Claudin18.2及TFF2的表达与进展期胃癌患者预后的相关性。研究方法1.收集2013年1月1日至2017年12月31日期间,于山东大学第二医院行胃癌根治术,经病理诊断为原发性胃腺癌的标本269例,所有患者均未接受术前新辅助放化疗。所有病例均随访至2021年4月。收集整理相关临床病理资料,包括患者年龄、性别、肿瘤大小、TNM分期以及胃癌Lauren分型;2.利用免疫组化染色检测 TFF2、Claudin18.2、MUC2、MUC5AC、MUC6、错配修复蛋白(MLH1、MSH2、MSH6、PMS2)、P53、E-cadherin 以及 HER2 的表达情况;3.利用原位杂交的方法检测胃癌患者EB病毒(Epstein-Barr virus,EBV)感染情况;4.分析TFF2及Claudin18.2与胃癌患者临床病理学参数、临床常用免疫组化指标以及EBV感染情况间的相关性;5.利用TCGA数据库在RNA水平对胃癌中Claudin18.2及TFF2的表达与MUC2、MUC5AC及MUC6的表达进行相关性分析;6.分析进展期胃癌中,TFF2与Claudin18.2表达的相关性;并利用TCGA数据库在RNA水平对胃癌中TFF2与Claudin18.2的表达进行相关性分析;7.绘制生存曲线,分析TFF2及Claudin18.2的表达情况与胃癌患者预后的相关性。研究结果1.TFF2及Claudin18.2的表达与进展期胃癌患者T分期相关,但与患者年龄、性别、肿瘤大小、N分期、M分期、TNM分期以及胃癌Lauren分型无显著相关性;2.TFF2与胃癌患者MUC5AC、P53及Claudin18.2的表达情况相关,Genetic exceptionalism但与MUC2、MUC6、错配修复蛋白、HER2、E-cadherin以及EBV感染情况无显著相关性;3.免疫组化及原位杂交实验显示,Claudin18.2与胃癌患者MUC2、MUC5AC、MUC6以及P53的表达情况相关,但与HER2、E-cadherin、错配修复蛋白的表达以及EB病毒感染情况无显著相关性;4.数据库分析提示,RNA水平上胃癌中TFF2与MUC5AC及Claudin18.2的表达呈显著的正相关关系,Claudin18.2与MUC5AC及MUC6的表达呈显著的正相关关系;5.Claudin18.2的表达与胃癌患者的预后相关,且阳性表达的患者预后较好;但TFF2的表达与胃癌患者预后无显著相关性。研究结论1.Claudin18.2及TFF2的表达缺失可能促进了胃癌细胞的增殖而非转移能力;2.胃癌中,P53发挥抑癌作用可能与TFF2或Claudin18.2相关;3.Claudin18.2在胃型胃癌中表达率更高,胃型胃癌患者更易从针对Claudin18.2的靶向治疗中获益;4.TFF2与Claudin18.2在胃癌的发生发展过程中可能存在相互影响或相互调控的作用;5.依据Claudin18.2的表达情况将胃癌患者进行分组,有利于临床医生对患者预后的判断,并制定更加个性化的治疗及随访措施,实现胃癌的精准治疗。