PI3K抑制剂

目的 探讨应用超声定量新生儿及婴儿的膈肌运动功能以及支气管肺发育不良（BPD）患儿的膈肌运动的变化，评价膈肌超声对BPD机械通气撤机患儿结果的预测价值。方法 纳入2022年8月～2023年8月广州市妇女儿童医疗中心新生儿重症监护室、儿童重症监护室、新生儿外科监护室BPD机械Immune biomarkers通气患儿23例，再以临床撤机后患儿能否Alpelisib生产商自主呼吸分为撤机成功组（n=18）和失败组（n=5），记录患儿基本临床特征。同时选取同期本院新生儿及婴儿23例作为正常对照组。应用超声分别测量各组患儿双侧膈肌移动度（DM）、膈肌吸气末厚度（DTinsp）、膈肌呼气末厚度（DTexp）及膈肌增厚率（DTF）。分别比较不同组别左右侧膈肌运动差异。结果 BPD组撤机前、后DM均低于正常对照组，差异有统计学意义（P<0.05）,DTinsp、DTexp及DTF与对照组比较，差异无统计学意义（P>0.05）。撤机失败组患儿DM、DTinsp及DTF均低于撤机成功组，差异有统计学意义（P<0.05），两组DTexp的差异无统计学意义（P>0.selleck05）。回顾性撤机前比较，BPD撤机失败组患儿DM、DTF均低于撤机成功组，差异有统计学意义(P<0.05)，两组DTexp、DTinsp差异无统计学意义(P>0.05)。结论 通过床旁超声评估BPD机械通气患儿的膈运动功能的变化规律，可对其撤机结果有较好的预测价值。

目的 探讨异欧前胡素抗炎镇痛作用的潜在药理作用机制。方法 通过醋酸致小鼠扭体模型观察异欧前胡素的镇痛作用，采用二甲苯致小鼠耳肿胀模型观察抗炎作用；通过脂多糖（LPS,100 ng·mL~(-1)）+干扰素-γ(IFN-γ,20 ng·mL~(-1)）诱导小鼠巨噬细胞系RAW264.7构建Puromycin MWM1极化模型，分别采用CCK8法、Real-time PCR法、ELISA法测定异欧前胡素对RAW264.7细胞增殖、M1极化标志蛋白（CD86和iNOS）的mRNA水平及白细胞介素-6(IL-6）和肿瘤坏死因子-α(TNF-α）表达水平的调控作用；通过Western blot法检测NF-κB和JAK1/STAT1信号途径相关蛋白表达水平。结果 异欧前胡素（30和60 mg·kg~(-1)）能有效减少醋酸致扭体次数，抑制Aurora Kinase抑制剂小鼠耳郭肿胀。异欧前胡素（20和40μmol·L~(-1)）能抵抗LPS/IFN-γ诱导的RAW264.7细胞M1极化，抑制细胞增殖，降低IL-6和TNF-α的表达，并Plant-microorganism combined remediation能有效地降低NF-κB和JAK1/STAT1信号途径相关蛋白磷酸化和转录。结论 异欧前胡素可通过调节NF-κB和JAK1/STAT1信号通路抑制巨噬细胞M1极化，发挥抗炎镇痛作用。

旨在探讨大戟脂总三萜对类风湿性关节炎(rheumatoid arthritis, RA)的防治作用及其作用机制。采用完全弗氏佐剂(complete Freund′s adjuvant, FCA)诱导大鼠关节炎模型，将雄性大鼠随机分为6组，每组10只，分别为对照组，模型组，雷公藤多苷(7.5 mg·kg~(-1))组，大戟脂总三萜低、中、高剂量组(32、64、128 mg·kg~(-1));除对照组大鼠外，在大鼠右后足趾注射0.2 mL FCA。给药组灌胃给予药物，对照组和模型组给予相应体积0.5%羧甲基纤维素钠(CMC-Na)溶液，每日1次，期间测量大鼠后足肿胀度并进行关节炎评分至第30天。给药结束后，采用HE染色观察大鼠关节组织病理学改变。采用生化比色法检测关节组织中丙二醛(malondialdehyde, MDA)、还原型谷胱甘肽(glutathione, GSH)因子和Fe~(2+)的含量以及超氧化物歧化酶(superoxide dismutase, SOD)活性。采用RT-PCR法检测关节组织中核因子E2相关因子2(nuclear factor erythroid 2-related factor 2,Nrf2)、谷胱甘肽过氧化物酶4(gluta-thione peroxidase 4,GPX4)、酰基辅酶A合成酶长链家族成员4(selleck抑制剂acyl-CoA synthetase long chain family member 4,ACSL4)mRNA的含量，Western blot法检测大鼠关节组织中Nrf2、Kelch样ECH相关蛋白1(Kelch-like ECH-associated protein 1,Keap1)、血红素加氧酶-1(heme oxygenase-1,HO-1)、醌氧化还原酶1[NAD(P)H quinone oxidoreductase 1,NQO1]、超氧化物歧化酶(SOD2)、GPX4、ACSL4蛋白的表达。结果显示，与模型组比较，经雷公藤多苷(7.5 mg·kg~(-1))和大戟脂总三萜(32、64、128 mg·kg~(-1))治疗后，大鼠双侧后肢肿胀程度明显减轻，关节炎评分Empagliflozin显著下降，关节组织病变程度减轻；关节组织中MDA和Fe~(2+)含量降低，GSH含量和SOD活性增加；氧化因子Nrf2、GPX4的蛋白表达和mRNA水平显著增加，ACSL4的蛋白表达和mRNA相对含量显著降低；Nrf2/HO-1/GPX4通路的Keap1、NQO1、HO-1、SOD2蛋白表达水平也显著升高。综上所述，大戟脂总三萜可通过抑制脂质过氧化从而抑制细胞异常铁microbiome establishment死亡发挥抗RA作用，作用机制可能与其对Nrf2/HO-1/GPX4信号通路的调控相关。

目的 探究双歧杆菌四联活菌辅助治疗对慢性阻塞性肺疾病（COPD）稳定期患者BODE指数及免疫炎症因子表达的影响。方法 选取2019年6月—2021年6月在解放军总医院第六医学中心诊治的稳定期COPD患者112例，随机数字表法将研究对象分为对照组和试验组，每组56例。对照组采用常规治疗，试验组在对照组基础上加用双歧杆菌Protein Tyrosine Kinase抑制剂四联活菌辅助治疗。比较两组疗效、治疗前后BODE指数、肺功能[第1秒用力呼气量（FEV1）、最大呼气流速峰值（PEF）、最大肺活量（FVC）]、免疫功能（CD3~+、CD4~+、CD8~+、CD4~+/CD8~+）、炎症因子水平[C反应蛋白（CRP）、白细胞介素-6(IL-6)、可溶性血管细胞黏附分子1(sVCAM-1)]、不良反应发生率。结果 试验组总有效率96.43%，较对照组82.14%显著升高（P<0.05）；治疗后试验组BODE指数较对照组显著降低（P<0.05）；治疗后试验组FEV1、PEF、FVC较对照组显著升高（P<0.05）；治疗后，试验组患者免疫功能明显优于对照组，差异显著（P<0.Bioprinting technique05）；治疗后试验组血清CRP、IL-6、sVCAM-1水平较对照组LEE011显著降低（P<0.05）；两组药物不良反应发生率比较，差异无统计学意义（P>0.05）。结论 双歧杆菌四联活菌辅助治疗稳定期COPD患者，临床效果好，可以很好缓解患者的症状，改善免疫功能和肺功能，减轻机体炎症，安全性高。

目的 分析烯酰辅酶A水合酶含结构域蛋白2 (ECHDC2)在肝癌中的表达及在细胞增殖与凋亡中的调控作用。方法 生物信息学JNJ-42756493分析ECHDC2在正常肝组织与肝癌组织中的表达，并探讨其表达水平与患者预后的关系；用实时荧光定量PCR (qRT-PCR)实验，检测30对肝癌与癌周正常肝组织中ECHDC2表达，以验证生物信息分析结果；过表达ECHDC2后分别用MTS细胞增殖与平板克隆形成实验分析ECHDC2在肝癌细胞增殖与克隆形成中发挥的调控作用；过表达ECHDC2后，用基于流式的细胞凋亡实验分析ECHDC2在肝癌细胞凋亡中发挥的调控作用。结果 基于肝癌癌症基因图谱计划(TCGA)数据库的生物信息学分析发现，肝癌中ECHDC2表达明显低于正常肝组织，且ECHDC2低表达肝癌患者预后更差，差BMS-354825价格异均有统计学意义(P<0.05)；实时定量PCR实验同样证实，肝癌组织中ECHDC2表达明显低于癌周正常肝组织，差异有统计学意义(P<0.05)；过表达ECHDC2后肝癌细胞的增殖与克隆形成能力均明显降低，而干涉ECHDC2后，肝癌细胞的增殖与克隆形成能力则明显升高，差异均有统计学意义(P<0.05)；过表达ECHDC2后肝癌细胞的凋亡明显增加，而干涉ECHDC2后肝癌细胞的凋亡明显减弱，差异均有统计学意义(P<0.05)。tethered spinal cord结论 肝癌中ECHDC2的表达明显降低；ECHDC2发挥抑制肝癌细胞增殖与克隆形成，促进细胞凋亡的作用。

非洲猪瘟是一种由非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV)引起的烈性、高度接触性传染病。自2018年8月传入中国以来给养猪业带来了巨大的经济损失,然而到目前为止尚无有效的疫苗或药物用于ASFV的临床防治。先前的研究表明巨噬细胞是ASFV的主要入侵和复制场所,其基因组中有两个开放阅读框编码E165R和EP152R,是保证ASFV在猪巨噬细胞正常复制的必需基因,可作为重要的抗病毒靶点。本研究聚焦于pE165R和pEP152R的结构和功能研究,主要内容如下:1.阐明了ASFV pE165R识别底物的结构基础和催化机制,通过与宿主同源蛋白的比较,指导并开发了针对ASFV dUTPase的特异性抑制剂。E165R编码脱氧尿苷焦磷酸酶dUTPase,保证了ASFV在猪巨噬细胞等静止细胞中正常复制。因此,ASFV dUTPase可以作为一个很好的药物设计靶标。本文解析了ASFV dUTPase野生型结构及与产物或底物的复合物结构。通过分析蛋白与底物的互作模式,详细揭示了ASFV dUTPase非经典的双亚基活性中心组装方式和催化机制,并通过生化实验确定了催化中心的关键氨基酸,这为抑制剂设计提供了理论指导。同OXPHOS抑制剂时为了防止抑制剂对宿主猪可能的细胞毒性,我们还解析了猪脱氧尿苷焦磷酸酶swine dUTPase结构,通过两种dUTPases之间的结构比较,发现:(i)二者组装活性中心的方式差异明显;(ii)参与底物Prosthetic knee infection催化的关键氨基酸存在差异;(iii)利用相似的?发夹结构来识别和固定底物;(iv)ASFV dUTPase活性中心的体积更大;(v)二者活性中心的疏水性分布相同;(vi)活性中心的静电分布有明显差异。这些异同为特异性抑制剂提供了理论指导。最后,我们设计了特异性抑制剂并测试其对swine dUTPase和ASFV dUTPase的抑制效果,结果显示抑制剂1可以选择性抑制ASFV dUTPase的活性。总之,我们提供了有价值的结构信息指导ASFV dUTPase特异性抑制剂开发。2.揭示了ASFV pEP152R对宿主细胞翻译、周期、免疫和内质网应激等内环境的调控作用,为理解pEP152R如何促进ASFV复制提供了思路。共聚焦实验结果证明pEP152R是一种定位于内质网的膜蛋白。pEP152R可诱导内质网肿胀,破坏内质网稳态,触发内质网应激和未折叠蛋白反应,通过激活PERK/e IF2α通路广泛抑制宿主蛋白的合成。除了对细胞翻译的影响,pEP152R还可以抑制先天免疫因子的表达BAY 73-4506,如ISG15,ISG54,ISG56和IFN-β。此外,pEP152R能使细胞周期停滞在G0/G1期,这将减少细胞增殖对细胞内能量的消耗。病毒水平实验表明,干扰EP152R的表达显著影响了ASFV的复制。同时,PERK是一个有效的抗病毒药物作用靶点,GSK2656157具有成为抗ASFV药物的潜力。总之,我们揭示了ASFV pEP152R的新功能,为理解pEP152R如何促进ASFV复制提供了思路。综上,本研究以ASFV两种影响病毒复制的关键蛋白pE165R和pEP152R为研究对象,首先解析了pE165R三维结构,阐明了新颖的双亚基活性中心组装方式和催化机制,并基于病毒与宿主dUTPases差异设计了特异性抑制剂。其次,我们发现了pEP152R对内质网稳态的影响,揭示了激活内质网应激抑制宿主翻译的分子机制。同时明确了pEP152R在感染过程中对宿主先天免疫、细胞周期的调控作用,提高了对ASFV致病机制的理解。总体而言,本课题从影响ASFV复制的必需蛋白入手,利用结构生物学和病毒学等手段深入阐明了pE165R和pEP152R对宿主内环境的调节作用,为基于抗病毒靶点开发药物提供策略。

目的 探讨扶正祛瘀解毒方联合表柔比星灌注化疗对老年非肌层浸润性膀胱癌(NMIBC)术后患者的疗效。方法 选取2019年1月至2022年12月就诊于海南省中医院的老年NMIBC患者106例按随机数字表法分为对照组与中药组，每组53例。对照组予以表柔比星膀胱灌注化疗，中药组在对照组基础上加服扶正祛瘀解毒方，连续服用12 w。比较两组治疗前和治疗后中医证候积分、生活质量评分、血清肿瘤标志物[角蛋白(CK)-19、细胞gut-originated microbiota角蛋白片段19Dibutyryl-cAMP抗原(CYFRA)21-1]、T淋巴细胞亚群和炎症因子[白细胞介素(IL)-6、肿瘤坏死因子(TNF)-α]水平的差异，并统计两组不良反应和术后12个月内复发率。结果 治疗后，中药组中医证候积分明显低于对照组，生活质量评分明显高于对照组(均P<0.05);中药组CK-19、CYFRA21-1水平均明显低于对照组(均P<0.05);中药组CD3~+、CD4~+和CD4~+/CD8~+水平均明显高于对照组(均P<0.05);中药组IL-6、NSC 127716 MWTNF-α水平明显低于对照组(均P<0.05)。随访12个月，中药组复发率明显低于对照组(P<0.05)。中药组观察期内尿频/尿急、恶心呕吐发生率明显低于对照组(P<0.05)。结论 对于NMIBC术后患者，扶正祛瘀解毒方联合表柔比星灌注化疗可降低肿瘤活力，改善免疫功能，抑制炎症反应，有效降低肿瘤复发率，改善患者生活质量。

目的:通过观察防己黄芪汤加减治疗Ⅵ型胫骨平台骨折术后患肢肿痛的临床疗效,为减轻Ⅵ型胫骨平台骨折术后患肢肿痛提供新的借鉴方法,并寻找一种对改善Emricasan体外术后患肢肿痛疗效可靠、副作用少的治疗方案。方法:本课题选取2022年2月至2022年12月期间因胫骨平台骨折在宁德市中医院骨伤三科住院治疗,符合纳入标准、签署知情同意书、自愿参加本课题的患者60例,按随机数字表法将病人分成两组,分别为对照组和试验组,每组30例,两组患者行手术治疗后,对照组予以常规术后治疗加口服“依托考昔片,30mg qd,地奥司明片,450mg bid”疗程7天;试验组在对照组基础上加用“防己黄芪汤加减方”,早晚各1次,疗程7天。分别于术后第1、3、5、7天观察患侧膝关节肿胀周径、疼痛情况及膝关节主动活动度;观察指标为患侧膝关节肿胀周径比、患侧膝关节VAS疼痛评分、患侧膝关节主动活动度。该研究课题所有数据均使用SPSS23.0进行统计分析处理,比较两组差异。结果:本试验共纳入患者60例,最终实际完成58例,其中对照组29例,男性15例,女性14例;试验组29例,男性13例,女性16例。1、对照组和试验组患者年龄、性别、伤侧、手术时长、术前1天患侧膝关节Probiotic culture周径比、术前1天患侧膝关节VAS疼痛评分等一般资料对比,差异无统计学意义(P>0.05)。2、两组患者术后1天患侧膝关节肿胀周径比,组间对比,差异无统计学意义,(P>0.05);术后3天、术后5天、术后7天患侧膝关节肿胀周径比,组间对比,试验组肿胀周径小于对照组,差异有统计学意义,(P<0.05)。3、两组患者术后1天患侧膝关节VAS疼痛评分,组间对比,差异无统计学意义(P>0.05);术后3天、术后5天、术后7天患侧膝关节VAS疼痛评点击此处分,组间对比,试验组疼痛评分小于对照组,差异有统计学意义,(P<0.05)。4、两组患者术后1天患侧膝关节主动活动度,组间对比,差异无统计学意义(P>0.05);术后3天、术后5天、术后7天患侧膝关节主动活动度,组间对比,试验组主动活动度大于对照组,差异有统计学意义,(P<0.05)。5、整个治疗研究过程中,两组患者均未出现过敏、胃肠道反应等不良反应事件。结论:防己黄芪汤加减对Ⅵ型胫骨平台骨折术后患肢肿痛的患者,能有效缓解患者的疼痛,减轻术后患肢肿胀,进而促进患者术后膝关节早期功能恢复,且具有良好的安全性,值得在临床上进一步深入推广。

人C-反应蛋白(C-reactive protein，CRP)是炎症以及各种相关疾病如病毒感染、心Conus medullaris血管疾病等诊断、治疗和预后的临床检测指标。为了建立一种快速、准确的CRP定量免疫测定方法，将表达纯Talazoparib作用化的重组CRP作为抗原免疫小鼠，获得了5株稳定分泌抗体的单克隆抗体细胞株，采用双抗体夹心酶联免疫吸附测定法(double sandwich enzyme-linked immunosorbent assay，DAS-ELISA)初步鉴定筛选的抗人CRP单克隆抗体，并分别选择mAb 9D6和mAb 9G4作为捕获抗体与检测抗体，建立用于人CRP检测的化学发光酶免疫测定法(chemiluminescence enzyme immunoasssay，CLEIA)，最后通过测定分析临床血清CRP样本，评价CLEIA的性能。结果显示，基于9D6/9G4-AP单克隆抗体对的CLEIA测确认细节定范围为0.176 7～500 μg/L (可扩展至100 mg/L)；所建立的CLEIA与医院采用的免疫散射比浊法(R~(2)：0.949 6，P<0.000 1)表现出良好的相关性，且Bland-Altman分析中96.36% (106/110)的点在95%一致性界限范围内显示两种检测方法具有较好的一致性。结果初步表明，建立的分析方法在临床诊断中具有较好的应用前景。

目的 观察氧化苦参碱（oxymatrine,OMT）通过免疫负调控机制对小鼠胶原诱导性关节炎（collagen-induced arthritis,CIA）的缓解作用。方法 将DBA/1J小鼠随机分为正常组、模型组、OMT组和地塞米松组，每组9只。采用胶原和佐剂等体积混合背部皮下多点注射诱导DBA/1J小鼠，构建CIA小鼠模型。OMT组和地塞米松组分别用氧化苦参碱和地塞米松进行腹腔注射，正常组注射同等剂量的生理盐水。采用实时荧光定量PCRselleck Imidazole ketone erastin(RT-qPCR)法检测脾淋巴细胞叉头样转录因子P3(forkhead box protein3,Foxp3)、细胞毒性T淋巴细胞相关foetal immune response蛋白-4(cytotoxic T-lymphocyte-associated protein-4,CTLA-4)和程序性死亡受体-1(programmed cell death protein-1,PD-1)的mRNA表达水平。采用苏木精-伊红染色法（hematoxylin-eosin staining,HE）观察关节滑膜组织的异位生发中心。采用免疫组织化学法和Western blot检测Foxp3及CTLA-4和PD-1的表达。结果 OMT可缓解CIA小鼠关节肿胀度并降低其关节评分，增加脾淋巴细胞和关节组织FoxpZD1839采购3及CTLA-4的表达，降低PD-1的表达（P均<0.05），并减少炎性细胞大面积浸润。结论 OMT可能经增加调节性（Foxp3~+）T细胞CTLA-4的表达但降低PD-1的表达而缓解RA。