PI3K抑制剂

目的 探讨和厚朴酚(honokiol, HKL)对糖尿病(diabetes mellitus, DM)大鼠血糖及胰岛素抵抗的影响，以及对过氧化物酶增殖物激活受体γ(peroxisome proliferators-activated receptors γ,PPARγ)/腺苷酸活化蛋白激酶(adenosine monophosphate-activated protein kinase, AMPK)信号通路的调节作用。方法 70只大鼠随机分为正常组(15只)和DM组(55只),正常组大鼠用普通饲料喂养，DM组大鼠用高脂高糖饲料喂养，6周后，禁食12 h,测定空腹血糖(fasting blood glucose, FBG),FBG≥11.1 mmol·L~(-1)视为造模成功，正常组和DM组大鼠各取5只测定腹膜脂肪组织中PPARγ mRNA的相对表达量，剩余48只DM大鼠随机分为模型组、和厚朴酚组、抑制剂组及和厚朴酚+抑制剂组，每组12只。和厚朴酚组大鼠用HKL 50 mgDorsomorphin·kg~(-1)·d~(-1)灌胃，抑制剂组大鼠用GW9662 1 mg·kg~(-1)·d~(-Baricitinib1)灌胃，和厚朴酚+抑制剂组大鼠先用HKL 50 mg·kg~(-1)灌胃，2 h后，再用GW9662 1 mg·kg~(-1)·d~(-1)灌胃，连续处理3周。用qRT-PCR检测脂肪组织中PPARγ mRNA的相对表达量，测定FBG和体质量，用ELISA检测血清胰岛素(fasting serum insulin, FINS),计算胰岛素抵抗指数(homeostasis model assessment-insulin resistance index, HOMA-IR)和胰岛素敏感指数(insulin sensitivity index, ISI),用蛋白印迹法检测p-AMPK、PPARγ蛋白的相对表达量。结果 与正常组比较，DM组大鼠脂肪组织中PPARγ mRNA的相对表达量降低(P<0.05)。与正常组比较，模型组大鼠PPARγ mRNA的相对表达量、ISI、p-AMPK和PPARγ蛋白的相对表达量降低，体质量减轻，FBG、FINS和HOMA-IR升高(P<0.05);与模型组比较，和厚朴酚组大鼠PPARγ mRNA的相对表达量、ISI、pImmunocompromised condition-AMPK和PPARγ蛋白的相对表达量升高，体质量增加，FBG、FINS和HOMA-IR降低，抑制剂组大鼠PPARγ mRNA的相对表达量、ISI、p-AMPK和PPARγ蛋白的相对表达量降低，体质量减轻，FBG、FINS和HOMA-IR升高(P<0.05);与和厚朴酚组比较，和厚朴酚+抑制剂组大鼠PPARγ mRNA的相对表达量、ISI、p-AMPK和PPARγ蛋白的相对表达量降低，体质量减轻，FBG、FINS和HOMA-IR升高(P<0.05);与抑制剂组比较，和厚朴酚+抑制剂组大鼠PPARγ mRNA的相对表达量、ISI、p-AMPK和PPARγ蛋白的相对表达量升高，体质量增加，FBG、FINS和HOMA-IR降低(P<0.05)。结论 HKL降低DM大鼠血糖水平、改善胰岛素抵抗，其可能是通过激活PPARγ介导AMPK信号通路发挥调节作用。

鳗鲡疱疹病毒(Anguillid herpesvirus, AngHV)是鳗鲡(Anguilla)的一种重要病毒性病原，可引起养殖鳗鲡暴发“脱黏败血综合征”，给养殖者造成巨大的经济损失。开展AngHV的免疫原性蛋白研究对于开发AngHV的免疫学诊断技术及亚单位疫苗具有重要意义。为了获得鳗鲡疱疹病毒的免疫原性蛋白，本研究通过质谱分析AngHV病毒粒子结构蛋白，筛选到ORF36，对其氨基酸序列进行生物信息学分析，克隆至原核表达载体进行诱导表达；用纯化的重组表达蛋白制备兔抗多克隆抗体，评价该抗体检测AngHV的特异性、灵敏性Enfermedad cardiovascular以及病毒中和效果，并对ORF36进行病毒粒子结构定位。结果显示，通过质谱鉴定出病毒的主要免疫原性蛋白ORF36；序列分析显示，ORF36无跨膜结构域，不含有信号肽，具有13个B细胞抗原表位，免疫原性良好；克隆ORF36至原核表达载体pET-30a，实现了其在大肠杆菌(Escherichia coli) BL21(DE3)中的高效表达，重组表达蛋白大小约为40 kD;ELISA检测显示，制备的兔抗ORF36多克隆抗体效价为1∶8 000;Western blot结果显示，该抗体能特异性识别感染AngHV的鳗鲡卵巢细胞系(eel ovary cell line, EO)及鳗鲡组织，最低可检测的内脏组织的病毒量为1 000 PFU；抗体中和试验表明，制备的兔抗ORF36多克隆抗体具有中和作用，能显著降低AngHV的病毒滴度；selleck抑制剂ORF36的病毒粒子定位分析表明，ORF36是病毒粒子的结构蛋白且定位于核衣壳上。本研究鉴定出病毒的主要免疫原性蛋白ORF36，制备了具有病毒中和作用的ORF36多克隆抗体，明确了ORF36为AngHselleck Compound CV核衣壳结构蛋白，为阐明ORF36在AngHV侵染过程中的作用及开发病毒亚单位疫苗提供了参考。

目的：研究波形蛋白（Vimentin）与肝细胞癌（HCC）的关系及健脾益气方通过Vimentin调控肝癌的分子机制。方法：利用基于TCGA和CPTAC数据的在线分析平台、STRING数据库及Cytoscape软件分析Vimentin与肝细胞癌的关系。随机将SD大鼠分为正常组，模型组，健脾益气方低、中、高剂量组（5.25、10.5、21 g·kg~(-1)），信号转导蛋白及转录激活子3（STAT3）抑制组（C188-9，4.5 mg·kg~(-1)）和糖蛋白130（gp130）抑制组（SC144，4.5 mg·kg~(-1)），每组10只。除正常组外，其余各组大鼠按照70 mg·kg~(-1)体质量腹腔注射二乙基亚硝胺（DEN）复制肝癌模型。造模成功后，正常组和模型组大鼠生理盐水灌胃，健脾益气方低、中、高剂量组分别给予对应剂量中药灌胃，两个抑制组分别腹腔注射对应抑制剂，每日1次，连续4周。末次处置后，采用实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）方法检测大鼠肝组织中VIM mRNA水平；比色法检测肝组织胱天蛋白酶-3（Caspase-3）酶活性；蛋白免疫印迹法（Western blot）检测肝组织中Rho相关含卷曲螺旋蛋白激酶1（ROCK1）、Rho相关含卷曲螺旋蛋白激酶2（media reportingROCK2）、aurora 激酶B（AURKB）、锌指蛋白148（ZNF148或者ZBP-89）、STAT3、磷酸化STAT3（p-STATTamoxifen3）、总Vimentin、磷酸化Vimentin（p-Vimentin）以及肝组织细胞核中Vimentin蛋白含量；酶联免疫吸附测定（ELISA）检测大鼠血清中Vimentin的含量。结果：VIM mRNA在肝癌患者不同病理分期（I-Ⅳ期）、不同病理分级（G1-G3级）、无区域淋巴结转移患者（N0）和肝癌不同亚型患者组织中表达水平均显著升高（P<0.01）；Vimentin蛋白水平在肝癌组织中显著降低（P<0.01）；VIM mRNA高表达/低表达对HCC患者总体生存期（OS）、无病生存期（DFS）的影响差异无统计学意义（P>0.05）；VIM基因有4处突变可以导致Vimentin蛋白一级结构的改变，这些遗传突变可降低患者DFS（P<0.001）；VIM mRNA的表达水平与HCC纯度呈负相关（P<0.001），而与微环境中肿瘤相关成纤维细胞、M2型巨噬细胞和髓系树突状细胞等的浸润水平呈正相关（P<0.001）。关联分析结果显示Vimentin与STAT3在HCC患者肝癌组织中的表达存在一定相关性（P<0.0001）。动物实验结果显示，与正常组比较，模型组大鼠肝组织中VIM mRNA、总Vimentin、p-Vimentin和核Vimentin蛋白水平、血清中分泌型Vimentin水平、肝组织中ROCK2、AURKB、STAT3和p-STAT3蛋白水平均显著上调（P<0.01）；负调控分子ZBP-89蛋白水平显著降低（P<0.01）；Caspase-3酶活性升高、ROCK1蛋白表达水平增加，但是差异无统计学意义（P>0.05）。STAT3抑制剂和gp130抑制剂以及中、高剂量健脾益气方均可显著降低大鼠血清中分泌型Vimentin水平，肝组织中总Vimentin、p-Vimentin和核Vimentin蛋白水平，及STAT3/Vimentin信号通路主要相关分子STAT3、p-STAT3、ROCK2、AURKB的蛋白水平，上调负调控分子ZBP-89蛋白水平和Caspase-3酶活性（P<0.05或P<0.01），且中剂量或高剂量健脾益气方对VIM mRNA水平、STAT3蛋白、ZBP-89蛋白、ROCK2蛋白和AURKB蛋白水平，及Caspa获悉更多se-3酶活性的干预结果，与STAT3抑制剂相比差异均不具有统计学意义（P>0.05）。结论：Vimentin是肝癌组织中一种重要的炎症分子，其表达、细胞定位和功能可能受肿瘤相关成纤维细胞、M2型巨噬细胞和髓系树突状细胞浸润水平，及IL-6/STAT3信号、特别是STAT3分子的影响；而健脾益气方可能通过干预STAT3/Vimentin信号通路调控Vimentin而防治肝癌。

目的：探究溶质载体家族22成员11(SLC22A11)在乳腺浸润癌（BRCA）进展中的作用和可能的调节机制。方法：通过Oncomine、UALCAN、TCGA、TIMER和Kaplan-Meier Plotter数据库探究SLC22A11在BRCA组织中的表达，及其在BRCA患者预后中的作用和进展中的潜在机制。在TIMER数据库中探究SLC22A11表达水平与BRCA免疫细胞浸润间的关系。结果：在BRCA组织中SLC22A11 mRNA表达水平显著降低，而SLC22A11甲基化水平显著Immune contexture升高，两者表达水平呈负相关。SLC22A11表达水平降低与BRCA患者种族、性别、年龄、TNBC亚型、组织学亚型、Menopause状态、淋巴结转移和TP53突变相关。SLC22A11甲基化水平升高与BRCA患者种族、年龄、淋巴结转移和TP53突变相关。SLC22A11表达水平降低VX-445纯度与BRCA患者总生存期和无复发生存期相关，且与BRCA患者无复发生存期相关的ER阳性、ER阴性、HER2阴性、淋巴结阴性、Basal-like型、Her-2过表达型、luminal A型和luminal B型相关。基因富集分析显示MAPK信号通路、细胞因子与细胞因子相互作用、ABC转运蛋白、JAK STAT信号通路、VEGF信号通路、MTOR信号通路、Calcium信号通路等富集于SLC22A11高表达组。SLC22A11表达水平与BRCA纯度、B细胞、CD8+T细胞和CD4+T细胞水平相关，且与免疫细胞标志物CD79A、CD19、STAT4表达水平等显著相关。结论：SLC22A11在BRCA组织中表达降低，提高SLC22A11表达水平有望改善BRCA患者预后。此外，SLC22A11表达水平与BRCA免疫细胞浸润及其标志物分子水平相关，提示SLC22A11有望成为BRCA患者治疗的新点击此处靶点。

背景：全膝关节置换后存在感染、心律失常、肺栓塞、心力衰竭、深静脉血栓形成等并发症，而静脉血栓栓塞症是引起手术失败的重要危险因素，因此有效的术后血栓监测尤为重要。目的：探讨血栓分子标志物在全膝关节置换患者术后并发静脉血栓栓赛的预警价值。方法：回顾性分析2021medicinal value年4-7月在河北省中西医结合医院行全膝关节置换患者的病历资料，共纳入80例患者，以术后3 d血栓是否形成分为血栓组(n=39)与无栓组(n=41)，选择同期健康体检者40名作为对照组。3组均检测血清血栓分子标志物水平(凝血酶-抗凝血酶复合物、纤溶酶-α2纤溶酶抑制物复合物、血栓调节蛋白、组织型纤溶酶原激活剂-纤溶酶原激活剂抑制剂1复合物)，全膝关节置换患者于术前当天与术后8 h检测，对照组检测1次。结果与结论：(1)术前当天：无栓组患者的凝血酶-抗凝血酶复合物、纤溶酶-α2纤溶酶抑制物复合物水平均高于对照组(P <0.05)，血栓组患者的凝血酶-抗凝血酶复合物和血栓调节蛋白水平均高于无栓组(P <0.05)，血栓组患者4种血栓分子标志物水平均高于对照组(P <0.05);(2)术后8 h：血栓组患者的血栓分子标志物水平均高于无栓组(P <0.05);(3)Logistics回归分析显示，术前单指标血栓调节蛋白的预测效能最好(ACU=0.814，灵敏度76.70%，特异度83.80%,P=0.00CP-690550体外0)，凝血酶-抗凝血酶复合物和血栓调节蛋白联合检测提高了预测效能(ACU=0.822，灵敏度83.30%，特异度76.80%,P=0.000)；术后单指标凝血酶-抗凝血酶复合物的预测效能最好(ACU=0.898，灵敏度83.30%，特异度84.80%,P=0.000)，凝血酶-抗凝血酶复合物和纤溶酶-α2纤溶酶抑制物复合物联合检测提高了预测效能(ACU=0.897，敏感度88.30%,P=0.000);(4)Spearman直线相关分析显示，术后组织型纤溶酶原激活剂-纤溶酶原激活剂抑制剂-1复合物与纤溶酶-α2纤溶酶抑制物复合物呈现出良好的正相关(r2=0.209,P<0.05);(5)血栓调节蛋白可作为全膝关节置换术前的早期预警指标，凝血酶-抗凝血酶复合物作为临近静脉血栓栓塞发生的特异指标SB203580临床试验，4种指标联合检测能提升深静脉血栓栓塞的预警效能。

目的：研究基于低共熔溶剂(Deep Eutectic Solvent，DES)法提取孜然精油工艺优化、成分分析及其抗氧化活性。方法：通过响应面法优化DSCH772984 IC50ES法提取孜然精油的工艺条件，采用气相色谱-质谱联用(GC-MS)法分析孜然精油的成分，并测试孜然精油清除·OH自由基、DPPH·自由基的能力。结果：氯化胆碱、Entinostat采购1,3-丁二醇组成的DES体系对提升孜然精油得率的效果最佳，优化工艺条件为：料液比1:5、摩尔比(氯化胆碱:1,3-丁二醇)1:3.5、DES含水量45 mol，孜然精油的得率4.36%；GC-MS分析结果显示，孜然精油的主要成分为枯茗醛(24.83%)，与水蒸气蒸馏法提取的孜然精油成分相似；抗氧化实验结果表明，孜然精油对·OH自由基和DPPH·自由基的最大清除率分别为66.51%、92.13%，这与水蒸气蒸馏法没有显著差异。此外，采用DES法较传统水蒸气蒸馏法对孜然精油提取时间缩短了50%。结论：DES法能显著提高孜然精油得率、提升提取效率，并且对孜然精油成分以及抗氧化活性影响较小，可以P falciparum infection作为孜然精油的一种绿色提取方式。

目的 调查评估广东省不同医疗机构性病实验室梅毒血清学检测能力，为提高全省性病实验室梅毒检测水平提供依据。方法 统一制备发放梅AZD1152-HQPA体外毒血清样本，包括梅毒非特异性血清和梅毒特异性血清，各级别性病实验室按要求分别进行梅毒非特异性血清学定性/定量和梅毒特异性血清学定性试验，通过省性病实验室管理信息系统上报结果，试验结果与靶值一致为正确。结果 2021年，全省1 036家实验室参加本次能力验证，1 031家回报结果，其中33家回报部分结果，平均94.55分，合格率97.39%(972/998)。3种梅毒血清学检测中，梅毒非特异性定性和定量试验平均分分别为93.98分和90.97分，梅毒特异性定性平均分为98.33分寻找更多。总得分位于全省平均分以上实验室占73.35%(732/998)，不合格占2.61%(26/998)。规范化性病实验室成绩平均分（96.52分）和合格率（99.0auto immune disorder7%）均显著高于普通实验室的92.25分和95.43%。结论 我省梅毒血清学检测能力处于较高水平，但不同医疗机构和实验室检测能力具有一定差异，普通实验室梅毒血清学检测能力有待加强，加强性病实验室规范化建设可促进梅毒实验室检测水平的提高。

目的 探究冠状动脉CT血管成像（CCTA）在高危斑块合并胸痛患者诊断中的应用价值。方法 选择2018年3月至2021年2月我院收治的60例冠心病患者作为研究对象，根据患者是否同时存在高危斑块和胸痛将其分为观察组（33例，同时存在高危斑块和胸痛）和对照组（27例，不同时存在高危斑块和胸痛）。比较两组患者的冠状动脉狭窄程度分级和冠endodontic infections状动脉斑块特征。绘制冠状动脉狭窄程度分级、冠状动脉斑块特征诊断高危斑块合并胸痛的受试者工作特征（ROC）曲线，并计算曲线下面积（AUC）及灵敏度、特异度。结果 经CCTA检查发现，60例患者中有52例的冠状动脉中存在高危斑块，高危斑块发生率为8EPZ-6438 molecular weight6.67%。52例高危斑块具体包括19例（36.54%）低密度斑块，22例（42.31%）点状钙化斑块，16例（30.77%）重构指数>1.1,8例（15.38%）“餐巾环”征。观察组冠状动脉狭窄程度1、2级的患者占比明显低于对照组，3、4级的患者占比明显高于对照组，差异具有统计学意义（P<0.05购买LY294002）。观察组的脂质斑块体积占比、脂质斑块面积均明显大于对照组（P<0.05）。冠状动脉狭窄程度分级、脂质斑块体积占比和脂质斑块面积诊断高危斑块合并胸痛的AUC分别为0.765、0.716、0.737，灵敏度分别为84.85%、54.55%、75.76%，特异度分别为63.96%、85.19%、59.26%。结论 CCTA能够对冠状动脉狭窄程度分级和斑块特征进行定量分析，可作为评估高危斑块合并胸痛的有效辅助手段，为临床预测、治疗心肌缺血等不良心血管事件提供可靠依据。

目的：探究基质金属蛋白酶（Matrix metalloproteinases,MMPs）抑制剂对结肠癌细胞凋亡、免疫功能及炎性因子的影响。方法：取SW480结肠癌细胞，随机分为低表达组（将MMPs抑制剂慢病毒质粒与SW480细胞混合培养），空白对照组（SW480细胞与慢病毒包装质粒混合培养）。采Egg yolk immunoglobulin Y (IgY)用流式细胞法、免疫细胞化学法、酶联免疫吸附（Enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA）法、实时荧光定量PCR (real-time fluorescence quantitative PCR, qRT-PCR)法、Hoechst 33258荧光染色法检测SW480细胞凋亡，TNF-α、IL-6蛋白阳性表达、免疫球蛋白表达水平、MMP-9 m RNA表达量。结果：空白对照组与低表达组相比较，低表达组SW480细胞内MMP-9 m RNA表达量显著下降(P<0.05)，说明转染成功。3-MA使用方法与空白对照组相比较，低表达组SW480细胞凋亡数量显著上升(P<0.05)。低表达组细胞的细胞核出现核固缩的概率显著高于空白对照组（P<0.05）。与空白对照组相比较，低表达组SW480细胞IL-2表达水平显著升高（P<0.05）,IL-4、TGF-β1、TIM-1表达水平显著降低（P<0.05）。SW480细胞内的C59浓度MMP-9 m RNA与IL-2呈现负相关性（r=-0.723,P=0.007）,MMP-9 m RNA与IL-4、TGF-β1及TIM-1均呈现负相关性（均P<0.05）。空白对照组SW480细胞中TNF-α、IL-6蛋白阳性数最高，低表达组SW480细胞中TNF-α、IL-6蛋白阳性数最低，与空白对照组相比较，低表达组SW480细胞中TNF-α、IL-6阳性数显著下降(均P<0.05)。结论：MMPs抑制剂可促进SW480细胞凋亡，改善免疫功能，降低炎性介质的表达水平。

目的 探讨爱康方含药血清对人肺腺癌A549细胞内B淋巴细胞瘤-2基因相关启动子(Bad)、Caspase-9蛋白(Caspase-9蛋白)及mRNA的表达作用。方法 40只大鼠,采用随机分组法分为空白对照组(NS)、环磷酰胺组(CTX)、爱康方组(AKF)和爱康方联合环磷酰胺组(AC),每组10只。以人肺腺癌A549细胞为研究对象,依据前期研究结果选定20%的含药血清为最佳干预浓度,用各组含药血清分别干预细胞48、72 h后收集细胞用于检测。通过蛋白质印迹法(Western blot)测定干预后目的细胞中Bad、Caspase-9蛋白表达,实时荧光定量PCR技术(RT-qPCR)法测定Bad、Caspase-9 mRNA的表达。比较各组不同方法检测的Bad mRNA、Caspase-9 mRNA表达水平及Bad、Caspase-9蛋白表达水平。结果 48、72 h时,环磷酰胺组、爱康方组和爱康方联合环磷酰胺组Bad mRNA表达水平高于空白对照组,爱康方联合环磷酰胺组Bad mRNA表达水平高于环磷酰胺组和爱康方组,差异具有统计学意义(P<0.05);48 h时,环磷酰胺组Bad mRNA表达水平高于爱康方组,差异具有统计学意义(P<0.05)。72 h时,爱康方组和爱康方联合环磷酰胺组Bad mRNA表达水平高于本组48 h,差异具有统计学意义(P<0.05)。48、72 h时,环磷酰胺组、爱康方组和爱康方联合环磷酰胺组Caspase-9 mRNA表达水平高于空白对照组,爱康方联合环磷酰胺组Caspase-9 mRNA表达水平高于环磷酰胺组和爱康方组,差异具有统计学意义(P<0.0Peptide Synthesis5);48 h时,环磷酰胺组Caspase-9 mRNA表达水平高于爱康方组,差异具有统计学意义(P<0.05)。72 h时,爱康方组和爱康方联合环磷酰胺组Caspase-9 mRNA表达水平高于本组48 h,差异具有统计学意义(P<0.05)。48、72 h时,环磷酰胺组、爱康方组和爱康方联合环磷酰胺组Bad蛋BMS-907351配制白表达水平明显高于空白对selleck抑制剂照组,环磷酰胺组、爱康方联合环磷酰胺组高于爱康方组,爱康方联合环磷酰胺组高于环磷酰胺组,差异具有统计学意义(P<0.05)。72 h时,爱康方组和爱康方联合环磷酰胺组Bad蛋白表达水平高于本组48 h,差异有统计学意义(P<0.05)。48、72 h时,环磷酰胺组、爱康方组和爱康方联合环磷酰胺组Caspase-9蛋白表达水平明显高于空白对照组,环磷酰胺组、爱康方联合环磷酰胺组高于爱康方组,爱康方联合环磷酰胺组高于环磷酰胺组,差异具有统计学意义(P<0.05)。72 h时,爱康方组和爱康方联合环磷酰胺组Caspase-9蛋白表达水平高于本组48 h,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 爱康方能抑制肺癌肿瘤生长,与环磷酰胺合用抑癌效果更佳,可能是通过上调A549细胞中促凋亡蛋白Bad、Caspase-9,诱导肿瘤细胞凋亡而实现的。