PI3K抑制剂

研究目的通过筛选ox-LDL最适浓度制造钙化模型,验证IL-37干预对钙化模型的影响,研究IL-37对于人主动脉血管平滑肌细胞(HA-SMCs)的作用及其机制,为血管钙化(VC)及动脉粥样硬化(AS)寻找新的治疗靶点提供理论依据。研究方法1.筛选诱导FUT-175HA-SMCs钙化的最佳浓度:体外培养HA-SMCs,分为空白组、(10、25、50、100)μg/m L处理ox-LDL组,cck8法检测细胞增殖活性,qpcr和ELISA、WB分别检测平滑肌肌动蛋白(SMA)、平滑肌22α(SM22α)、骨形态发生蛋白(BMP2)、runx相关转录因子(RUNX2)、OC、碱性磷酸酶(ALP)、IL-37的表达,筛选出(50μg/m L)ox-LDL造模浓度,茜素红钙化染色验证模型成立。2.将HA-SMCs分为对照组、ox-LDL处理组、IL-37(2h)+ox-LDL处理组,饥饿24小时后,对照组换完全培养基,处理组换钙化培养基(10mmol/Lβ-甘油磷酸+50μg/m L L-抗坏血酸+100nmol/L地塞米松),诱导细胞3天、14天后,qpcr和WB检测TLR4、NF-κB、成骨相关因子MSX2、ALP、RUNX2的表达,cck8检测细胞增殖率,流式术检测细胞凋亡率,茜素红染色验证细胞钙化程度。3.将HA-SMCs分为对照组、ox-LDL处理组、IL-37(2h)+ox-LDL处理组、NF-κB抑制剂PDTC(2h)+ox-LDL处理组,传代后饥饿细胞24h,对照组更换完全培养基、处理组换钙化培养基,(10mmol/Lβ-甘油磷酸+50μg/m L L-抗坏血酸+100nmol/L地塞米松),qpcr、western blot检测TLR、NF-κB、磷酸化核转录因子(p-NF-κB)、RUNX2、MSX2、ALP、SMA、SM22α的表达水平。研究结果1.采用梯度浓度的ox-LDL(10、25、50、100μg/m L)处理HA-SMCs 3天,WB结果显示,50μg/m L ox-LDL处理组中IL-37的表达量最高,qpcr结果显示:梯度浓度ox-LDL处理细胞1天、7天、14天后,与对照组相比,SMA、SM22α的表达明显下降,其中50μg/m L ox-LDL处理组表达量最低,差异具有统计学意义。因此选择50μg/m L的ox-LDL作为造模干预浓度。Qupper extremity infectionspcr结果显示,与对照组相比,50μg/m L浓度ox-LDL处理细胞3天后,BMP2、RUNX2的表达量较对照组相比明显升高。ELISA结果显示,50μg/m L浓度ox-LDL处理细胞后3天,上清液中的IL-37表达有所升高。ALP试剂盒检测上清液中的ALP活性,提示ox-LDL处理组上清液中ALP活性下降,差异具有统计学意义。2.将HA-SMCs分为对照组及钙化造模组,传代后的细胞饥饿24小时后,对照组换完全培养基,造模组换钙化培养基(10mmol/Lβ-甘油磷酸+50μg/m L L-抗坏血酸+100nmol/L地塞米松)并加入50μg/m L浓度的ox-LDL诱导细胞14天,茜素红s染色结果显示,钙化造模组较对照组出现明显的橘红色钙化结节,钙化模型建立成功。qpcr、ELISA及WBEnasidenib供应商结果提示,钙化造模组IL-37在细胞内外的表达量较对照组均有明显升高,造模组成骨相关因子表达也同样升高。3.将HA-SMCs分为对照组、ox-LDL处理组、IL-37(2h)+ox-LDL处理组,饥饿24小时后,对照组换完全培养基,处理组换钙化培养基(10mmol/Lβ-甘油磷酸+50μg/m L L-抗坏血酸+100nmol/L地塞米松),诱导细胞3天后,qpcr结果显示,与对照组相比,ox-LDL处理组TLR4、NF-κB、RUNX2、MSX2、ALP的表达明显升高;与ox-LDL处理组相比,IL-37(2h)+ox-LDL处理组NF-κB、RUNX2、MSX2、ALP明显降低,同时较对照组更低。WB结果显示与对照组相比,ox-LDL处理组NF-κB表达明显升高,TLR2、RUNX2同时也升高,加入IL-37处理后,相应因子表达下降。4.茜素红染色示ox-LDL处理组钙化结节较对照组相比明显增多,而加入IL-37处理后,与ox-LDL处理组相比,IL-37(2h)+ox-LDL处理组结节数量明显减少。明确了IL-37对HA-SMCs的保护作用,增加IL-37的预处理,能够明显减少钙化结节的形成。与空白组相比、(10、25、50、100)μg/m L ox-LDL处理后,50μg/m L浓度ox-LDL组SMA表达量最低,BMP2呈高表达,差异具有统计学意义。与对照组相比,造模组IL-37高表达。(10、25、50、100)μg/m L ox-LDL处理后,细胞增殖活性明显升高,且呈浓度及时间依赖,50μg/m L ox-LDL组中加入100ng/m LIL-37预处理,细胞增殖活性被抑制。5.将HA-SMCs分为对照组、ox-LDL处理组、NF-κB抑制剂PDTC(2h)+ox-LDL处理组,传代后饥饿细胞24h,对照组更换完全培养基、处理组换钙化培养基,(10mmol/Lβ-甘油磷酸+50μg/m L L-抗坏血酸+100nmol/L地塞米松)。处理3天后,qpcr结果显示,与对照组相比,ox-LDL处理组成骨转录相关因子RUNX2、ALP、MSX2、OC明显升高。与ox-LDL处理组相比,NF-κB抑制剂PDTC(2h)+ox-LDL处理组中NF-κB明显被抑制,RUNX2的表达有所下降。WB结果显示相应蛋白表达与PCR结果的RNA表达趋势一致。证实炎症因子水平降低时,成骨相关因子的表达会被抑制,二者具有相关性。6.将HA-SMCs分为对照组、梯度浓度ox-LDL处理组(10、25、50、100μg/m L)、IL-37(2h)+ox-LDL处理组,Western blot检测磷酸化NF-κB的表达,结果显示,梯度浓度ox-LDL处理后,NF-κB的磷酸化水平呈浓度依赖性升高,50μg/m L时,磷酸化程度最强,增加IL-37预处理之后,磷酸化水平被抑制,差异具有统计学意义。与对照组相比,ox-LDL处理组TLR4、NF-κB、RUNX2的表达明显升高,加入IL-37处理后,与ox-LDL处理组相比、IL-37(2h)+ox-LDL处理组相应因子的表达明显下降、NF-κB抑制剂PDTC(2h)+ox-LDL处理组与IL-37(2h)+ox-LDL处理组具有相同趋势,但IL-37的抑制效果优于PDTC。qpcr结果提示与对照组相比,ox-LDL处理组SMA、SM22α的表达明显下降,增加IL-37、PDTC处理后,与ox-LDL处理组相比,IL-37(2h)+ox-LDL处理组SMA、SM22α表达明显升高,而NF-κB抑制剂PDTC(2h)+ox-LDL处理组与ox-LDL处理组相比,SMA的表达上升而SM22α的表达是下降的。因此,我们认为IL-37抑制炎症通路,同时抑制成骨因子表达,影响细胞表型转化,发挥钙化保护作用。研究结论综上所述,我们认为IL-37可以通过抑制TLR表达,抑制NF-κB磷酸化、抑制下游成骨转录相关因子的表达,抑制HA-SMCs成骨转化,从而抑制HA-SMCs钙化,对于血管钙化保护作用,IL-37或可作为一个新型靶点,为血管钙化及AS治疗及预后提供新的理论基础。

目的:观察体外冲击波联合针刺对早中期膝骨关节炎气滞血瘀证患者步态稳定性、膝关节功能、炎症因子水平的影响。方法:选择80例早中期气滞血瘀型膝骨关节炎患者，随机分为对照组和观察组，每组40例。对照组接受体外冲击波治疗，观察组接受体外冲击波联合针刺Pulmonary infection治疗。比较两组患者治疗前后炎症因子[白细胞介素(IL)-1、IL-1β、C反应蛋白(CRP)、前列腺素E_2(PGE_2)、6-酮前列腺素E1α(6-keto-PGE1α)、P物质(SP)]水平、步态稳定性(包括患侧着地内翻角VP-16分子式、离地仰角、着地仰角、支撑相、侧摆动相)、Lysholm膝关节评分量表(LKSS)评分及中医证候评分，评估临床疗效。结果:治疗后，两组患者IL-1、CRP、IL-1β、6-keto-PGE1α、PGE_22、SP水平均低于治疗前(P<0.05),且观察组均低于对照组(P<0.05);两组患者患侧着地内翻角、侧摆动相均较治疗前降低(P<0.05),且观察组均低于对照组(P<0.05);两组患侧离地仰角、着地仰角、支撑相均较治疗前升高(P<0.05),且观察组均高于对照组(P<0.05);两组患者中医证候评分均较治疗前降低(P<0.05),且观察组低于对照组(P<0.05);两组患者LKSS评分较治疗前GW4869升高(P<0.05),且观察组高于对照组(P<0.05)。观察组总有效率为95.00%(38/40),高于对照组的80.00%(32/40),差异有统计学意义(P<0.05)。结论:采用体外冲击波联合针刺治疗早中期膝骨关节炎气滞血瘀证，可降低患者关节液炎症因子和致痛因子水平，改善其膝关节功能，提升步态稳定性及临床疗效。

目的 应用超声造影早期定量评估结直肠癌肝转移患者抗血管生成靶向治疗的效果。方法 选取于我院就诊的54例结直肠癌肝转移患者，其中25例行贝伐单抗联合FOLFOX/FOLFIRI方案化疗治疗（研究组），29例仅行FOLFOXCCRG 81045体外/FOLFIRI方案化疗（对照组），两组均行超声造影检查并获得达峰时间（TTP）、峰值强度（PI）、上升斜率（Pw）和曲线下面积（AUC），比较其治疗前后的差异。两组患者进一步根据治疗是否有效分别分为治疗有效者和无效者，比较治疗前后超声造影定量参数的差异。结果 研究组治疗前后PI、Pw和AUC比较差异均有统计学意义（均P<0.05），对照组治疗前后仅AUC比较差异有统计学意义（P<0.05）。研究组中18例有效，7例无效；有效者治疗前后PI和Pw均高于无效者，差异均有统计学意义（均P<0.05）；有效者治疗前后PI差值和Pw差值与无效者比较差异均有统计学意义（t=5.135、4.557，均P<0.05）。对照组中6例有效，23例无效；治疗有效者更多与无效者TTP、PI、Pw、AUC治疗前后及其差值比较差异均无统计学意义。结论 超声造影可早期定量评估结肠癌肝转移患者抗genetic conditions血管生成靶向治疗的效果。

近年来,随着社会的经济持续向好、人们健康体检意识的提高以及医学技术的飞速发展,甲状腺结节检出率较前明显提高,现已成为内分泌科及甲状腺外科常见疾病之一。少数甲状腺结节患者在发现时或者随后被诊断为甲状腺癌,甲状腺癌进展速度相对较慢,且绝大多数患者预后良好,但仍有部分患者因肿瘤的局部侵犯甚至发生远处转移而导致不良结局,因此,早期发现并明确甲状腺结节良恶性显得尤为重要。超声引导下细针穿刺目前已成为术前诊断甲状腺癌的重要方法之一,但由于医师水平等存在差异,有时细胞学病理不能做出明确诊断,为进一步明确患者结节的性质,经常需结合分子学检测。血清胰岛素样生长因子1(Insulin-like growth factor,IGF-1)主要因促进生长的作用而闻名,也参与控制中间代谢、组织修复及某些疾病的发生,既往研究表明其与甲状腺结节的发生发展存在一定联系。本研究以甲状腺结节细针穿刺病理分类为分组依据,将不同分组的患者血清IGF-1水平进行组间比较并分别与健康对照组人员血清IGF-1水平进行比较,了解IGF-1水平与不同甲状腺结节细针穿刺病理分类间的关系,为临床工作提供可靠的实验数据和理论依据。目的:分析血清IGF-1水平与不同甲状腺结节细针穿刺病理分类的相关性,为进一步明确甲状腺结节性质提供理论依据。方法:选取2021年10月至2022年12月沧州市人民医院内分泌代谢科门诊诊断为有行甲状腺结节穿刺指征的甲状腺结节患者(>18岁)44例,其中病理分类为Ⅱ～Ⅲ类的患者为结节A组(本研究所纳入患者中尚无病理分类为Ⅰ类且尚未进行重复穿刺的患者),共24例,病理分类为Ⅳ～Ⅵ类的患者为结节B组,共20例。选取同期就诊于沧州市人民医院体检中心的健康体检者44例为健康对照组,对照组年龄、性别、身高、体重、体重指数(Body mass index,BMI)与甲状腺结节组差异无统计学意义,具有可比性,并依据收集的健康对照组人员LXH254采购的上述资料与甲状腺结节组患者匹配结果,将健康对照组分为对照A组、对照B组。收集甲状腺结节组患者年龄、性别、身高、体重、BMI、空腹血糖(Fasting blood glucose,FPG)、谷丙转氨酶(Alanine transaminase,ALT)、谷草转氨酶(Aspartate transaminase,AST)、肌酐(Creatinine,CR)、甲状腺球蛋白(Thyroglobulin,TG)、促甲状腺激素(Thyroid stimulating hormone,TSH)、游离三碘甲状腺原氨酸(Free triiodothyronine,FT3)、游离甲状腺素(Free thyroxine,FT4)、抗甲状腺球蛋白抗体(Anti-thyroglobulin antibody,Anti-Tg)、抗甲状腺过氧化物酶抗体(Anti-thyroid peroxidase antibody,Anti-TPO)。收集健康对照组年龄、性别、身高、体重、BMI、FPG、ALT、AST、CR。采用同一试剂盒及方法测量血清IGF-1水平,即收集健康对照组及甲状腺结节组患者晨起空腹8小时静脉血2ml,保存于-80℃冰箱,待研究结束后统一送检。比较两组间一般资料及生化指标的差异,采用t检验或方差分析比较不同分组间血清IGF-1差异,指标间相关性应用Pearson相关分析,绘制受试者工作特征(ROC)曲线,确定曲线下面积(AUC),以分析血清IGF-1对判断甲状腺结节良恶性的敏感度和特异性。结果:1.44例有行甲状腺穿刺指征的甲状腺结节患者为病例组,其中男性13例,女性31例,年龄19～72岁,平均(50.98±12.05)岁。健康对照组共44例Ethnomedicinal uses,男女性人数分别与甲状腺结节组一致,年龄范围为20～72岁,平均(50.89±11.95)岁。对比两组数据可发现,两组性别、年龄、身高、体重、BMI等一般资料及血清IGF-1、FPG、ALT、AST、Cr等化验指标无明显差异,其结果均无统计学意义(P>0.05)。2.结节A组共24例患者,其中男性5例,女性19例,平均年龄(53.92±12.24)岁,对照A组为24例健康体检者,男女人数与结节组相同,平均年龄(53.71±12.22)岁,对比两组一般资料及生化资料可见,结节A组FPG高于对照A组,血清IGF-1、ALT、AST、Cr均低于对照组,但差异均无统计学意义(P>0.05)。3.结节B组共20例患者,其中男性8例,女性12例,平均年龄(47.45±11.10)岁,对照B组人数、性别、年龄、身高、体重、BMI与结节组相匹配,其中平均年龄(47.50±10.96)岁,体重(63.35±8.52)kg,身高为非正态分布,用中位数(四分位数间距)表示,为163.00(162.00,168.75)cm。经分析,对照B组血清IGF-1水平为(137.34±29.14)ng/ml,结节B组血清IGF-1水平为(160.12±38.24)ng/ml,显著高于对照B组,结果有统计学意义(P<0.05),而两组FPG、ALT、AST、Cr的差异无统计学意义(P>0.05)。4.对比分析结节A组与结节B组的一般资料及生化指标,计数资料的比较应采用卡方检验,结果为c~2=1.925,P=0.165,故两者性别差异无统计学意义(P>0.05)。对比两组患者一般资料可见,结节A组与结节B组年龄、身高、体重、BMI差异均无统计学意义(P>0.05)。对比两组患者化验结果可见,结节A组与结节B组FT3、FT4、Etoposide纯度TSH、Anti-TPO、Anti-Tg、Tg、FPG、ALT、AST、Cr的差异均无统计学意义(P>0.05),而两组血清IGF-1水平的差异有统计学意义(P<0.05)。5.应用Pearson相关分析比较血清IGF-1水平与各指标相关性,通过直线相关分析显示血清IGF-1与性别、身高、体重、FPG、FT3、FT4、Anti-TPO、Tg不存在线性关系(P>0.05),与年龄、BMI呈负相关(P<0.05),与TSH、Anti-Tg(P<0.05)呈正相关。6.甲状腺结节患者血清IGF-1的ROC曲线的AUC为0.681(95%置信区间为0.521～0.842),计算约登指数,血清IGF-1的最佳临界值为137.435ng/ml,敏感度为80.0%,特异性为54.2%。结论:1.病理分类为Ⅳ～Ⅵ类的患者血清IGF-1水平较病理分类为Ⅱ～Ⅲ类的患者及健康人群血清IGF-1水平显著升高。2.血清IGF-1水平与年龄、BMI呈负相关,与TSH、Anti-Tg呈正相关。

目的:分析微炎症状态及血清全长甲状旁腺激素[PTH(1-84)]、骨特异性碱性磷酸酶(BALP)水平检测在维持性血液透析(MHD)肾性骨病中的临床意义。方法:选取2019年1月至2022年7月我院肾内科收治的104例MHD患者为研究对象，根据是否并发肾性骨病分为肾性骨病组(n=36例)及非肾性骨病组(n=68例);同时选择50例健康志愿者为对照组。比较三组入组时的微炎症状态[C反应蛋白(CRP)、白细胞介素-6(IL-6)、β_2微球蛋白(β_2-MG)]及骨转化指标[PTH(1-84)、BALP、护骨素(OPG)]水平；Pearson相关分析肾性骨病组患者微炎症状态与骨转化指标的关系；以受试者工作曲线(ROC)分析上述微炎症及骨转化指标对MHD并发肾性骨病的预测价值。结果:三组入组时的血清CRP、IL-6、β_2-MG水平比较：肾性骨病组>非肾性骨病组>对照组，差异有统计学意义(P<0.05);三组入组时的血清PTH(1-8selleck合成4)、BALP、OPG水平比较：肾性骨病组>非肾性骨病组>对照组，差异有统计学意义(P<0.05);Pearson相关性分析显示，肾性骨病组患者入组时的血清IL-6与PTH(1-84)水平呈明显正相关(P<0.05),β_2-MG与BALP水平呈明显正相关(P<0.05);ROC曲线显示血清CRP(AUC=0.769,截断值为18.41mg/L时敏感度77.80%、特异度77.90%)、IL-6(AUC=0.791,截断值为243.53pg/mL时敏感度83.30%、特异度69.10%)、β_2-MG(AUC=0.731,截断值为5.605mg/L时敏感度73.90%、特异度70.28%)、PTH(1-84)(AUC=0.839,截断值为173.235ng/L时敏感度77.80%、特异度85.30%)、BALP(AUC=0.810,截断值为23.575U/L时敏感度94.40%、特异度64.70%)、OPG(AUC=0.826,截断值为365.93pg/mL时敏感度83.30%、特异度76.50%)对诊断MHD合并肾性骨病的预测效能良好。结论:骨转化指标[PTH(1-84)、BALP、OPG]及微炎症指标(CRmilk microbiomeP、ATM/ATR抑制剂IL-6、β_2-MG)水平在MHD患者中异常升高，对诊断MHD合并肾性骨病具有良好预测效能。

目的 探索一种旨在阻断干眼形成通路且具有抗炎、缓释和良好生物相容性等特性的纳米药物。方法 采用薄膜分散-水化超声法制备汉防己甲素(Tet)和聚乳酸-羟基乙酸共聚物(PLGA)的纳米微球(Tet-ATS@PLGA)并Komeda diabetes-prone (KDP) rat检测其室温(25℃)下稳定性、包封率、载药量等性质。分组实验：正常组(未行干预的正常兔眼);制备成功的干眼模型兔随机分为控制组(未行任何干预)、ATS组(人工泪液干预)、Tet-ATS组(人工泪液及Tet干预)、Tet-ATS@PLGA组(Tet-ATS@PLGA干预)。流式细胞术检测各组干预24 h后炎症化兔角膜上皮细胞凋亡率；干预14 d后，观察并记录兔角膜上皮细胞着染情况、泪膜破裂时间(BUT)、眼表泪液分泌(Schirmer试纸检测)情况；HE染色观察兔角膜上皮细胞厚度、球结膜杯状细胞形态和数量；提取兔角膜蛋白行ELISA实验检测血管内皮生长因子(VEGF)、白细胞介素(IL)-1β、前列腺素E2(PGE2)和肿瘤坏死因子(TNF)-α等炎症因子表达情况。采用独立样本t检验进行组间比较。结果 Tet-ATS@PLGA纳米药物的包封率和载药量分别为77.43%和30.26%,室温下性质稳定，在眼表温度(33℃)下易释放。与其他组比较，Tet-ATS@PLGA组BUT最大，泪液分泌量最大，角膜上皮厚度恢复接近正常，球结膜SCH727965 molecular weight杯状细胞数量恢复最多，24 h后炎症化兔角膜上皮细胞细胞凋亡率最高，VEGF、IL-1β、TNF-α和PGE2表达水平最低，差异均有统计学意义(均为P<0.05)。结论 Tet-ATS@PLGA纳米药物可有效作用于炎症化兔角膜上皮细胞，促进炎症细胞凋亡，并进一步通过抑制VEGF、IL-1β、TNF-α和PGE2等炎症因子的表达，Liraglutide作用阻断干眼的炎症反应，改善眼表泪液分泌情况。

目的 探讨N3系脂肪酸干预对炎症性肠病病人复发风险的影响。方法 前瞻性选取2018年1月至2020年5月于沧州市人民医院就诊的炎性肠病病人216例，均接受规范化治疗，按照随机数字表法分为对照组108例，予以常规饮食干预；干预组108例，在对照组基础上予以N3系脂肪酸干预；随访观察12个月，记录两组复发情况，根据病人复发情况分为复发组和非复发组，利用Cox回归分析明确N3系脂肪酸干预对炎性肠病病人复发风险的影响。结果 随访12个月，无1例失访，共75例病人出现复发，复发率34.72%；其中干预组30例复发，复发率（27.78%）较对照组45例复发，复发率（41.67%）低（log-rankχ2=6.91,P=0.009）；复发组和未复发组C-反应蛋白（CRP）、红细胞沉降率（ESR）、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、SAHA体外氧化三甲胺（TMAO）、粪便钙购买RepSox卫蛋白、吸烟比例比较，差异有统计学意义（P<0.05）;Cox回归分析显示：ESR[HR=1.03,95%CI:(1.01,1.05)]、TNF-soluble programmed cell death ligand 2α[HR=1.05,95%CI:(1.03,1.07)]、粪便钙卫蛋白[HR=1.03,95%CI:(1.02,1.03)]、TMAO[HR=1.38,95%CI:(1.12,1.71)]为炎性肠病复发危险因素（均P<0.05）,N3系脂肪酸干预[HR=0.56,95%CI:(0.35,0.90)]为炎性肠病复发风险的保护因素（P<0.05）。结论 N3系脂肪酸干预有助于降低炎性肠病病人复发风险。

目的 探讨分析急性ST段抬高型心肌梗死（STEMI）患者脂蛋白相关磷脂酶A_2(Lp-PLA_2)、脂蛋白a[Lp(a)和糖化血红蛋白（HbA1c）水平与颈动脉粥样硬化的相关性。方法 选取2021年1月至12月潍坊市人民医院收治的221例STEMI患者为病例组，根据颈动脉狭窄程度分为轻度狭窄（n=81）、中度狭窄（n=87）和重度狭窄（n=53）3个亚组，另取同期体检中心健康者70人为对照组，检测两组的Lp-PLA_2、Lp(a)和HbA1c水平。Berzosertib采用SpeaHRI hepatorenal indexrman相关性分析观察各指标与颈动脉狭窄程度的相关性，采用多因素logistic回归分析各指标与颈动脉病变的关系。结果 经单因素分析，病例组的Lp-PLA_2、Lp(a)和HbA1c水平高于对照组，差异有统计学意义（P<0.05）。轻度狭窄、中度狭窄和重度狭窄3个亚组患者的Lp-PLA_2、Lp(a)和HbA1c水平比较，差异有统计学意义（P<0.05）。Spearman相关性分析显示，Lp-PLA_2、Lp(a)和HbA1c水平与狭窄程度呈正相关（r=0.422,0.349,0.305，均P<0.获悉更多05）。多因素logistic回归分析结果显示，患者体内Lp-PLA_2(β=0.027,OR=1.027,95%CI:1.016～1.038)、Lp(a)(β=0.007,OR=1.007,95%CI:1.016～1.038)、HbA1c(β=0.462,OR=1.588,95%CI:1.156～2.180)水平是影响颈动脉狭窄程度的独立危险因素（P<0.05）。结论 STEMI患者体内Lp-PLA_2、Lp(a)和HbA1c水平越高，颈动脉粥样硬化程度越严重。

目的 探讨余氏膝痹理筋六法配合小针刀治疗膝骨性关节炎(KOA)患者的临床效果。方法 选取2020年7月至2021年12月龙岩市中医院骨伤科收治的80例KOA患者为研究对象，将患者随机分为试验组与对照组，每组40例。试验组采用余氏膝痹理筋六法配合小针刀治疗，对照组采用双氯芬酸钠缓释胶囊配合玻璃酸钠治疗，均治疗4周，比较两组治疗前后疼痛程度[采用视selleckchem SB203580觉模拟评分法(VAS)评估]与膝关节功能[采用日本骨科协会(JOA)评分表评估]。结果 治疗前，两组VAS评分比较，差异无统计学意义(P>0.05);治疗4周后，两组VAS评分均低于治疗前，且试验组低于对照组，差异有统计学意义(P<0.05);治疗前，两组JOA评分比较，差异无统计学意义(P>0.05);治疗4周后，两组JOA评分均高于治疗前，且试验组高于对照组，差异有统计学cognitive biomarkers意义(P<0.05)。结论 余氏膝痹理筋六法配合小获悉更多针刀治疗KOA患者可显著减轻疼痛程度，改善膝关节功能。

伊立替康(喜树碱-11,CPT-11)是7-乙基-10-羟基喜树碱(SN38)的前体药物,通过抑制拓扑异构酶I进而阻止DNA复制来发挥疗效,主要用于治疗晚期或复发性结直肠癌及其他实体肿瘤。由于伊立替康的内酯环结构不稳定,在生理条件下易开环失活,其在人体内消除半衰期约为6小时,活性代谢物SN38的转化率仅为2-8%,且存在骨髓毒性及胃肠道毒性,导致其临床应用受限。聚乙二醇(PEG)化修饰技术因其可改变药物的药代动力学性质,延长药物体内循环时间,提高药物生物利用度,降低不良反应发生率,被越来越多的用于修饰抗肿瘤小分子药物,以实现其“增效减毒”。为克服伊立替康的临床局限性,天津键凯科技有限公司成功地开发了三价PEG化伊立替康(PEG-[CPT-11]_3),该药目前已经进入II期临床试验。PEG-[CPT-11]_3由三个部分组成:一个20 k Da的直链m PEG(PEG20K),一个不对称三载药点的连接臂以及三分子CPT-11。不同于小分子药物,对多价PEG修饰后的小分子药物进行全轮廓的体内外精准分析,一直是药物分析与药代动力学研究领域亟待突破的关键科学问题。究其原因在于:1)目前,药物分析首选的技术手段是基于液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)的多重反应监测扫描模式(MRM),然而,高分子PEG化药物分子量成多分散性,在质谱检测过程中可产生带有多种电荷与多种加合离子的难以计数的前体离子,而MRM的LC-MS/MS受质谱扫描速度的限制,只能对有限个目标分子进行定量分析,因此无法满足PEG-[CPT-11]_3无数前体离子全轮廓分析的需求;2)PEG-[CPT-11]_3整体属于多载药聚合物-药物偶联物,除了每个PEG分子连有3分子的CPT-11原形药物以外,至少还可能存在分别连接2,1,0个分子的CPT-11,即,PEG-[CPT-11]_2、PEG-[CPT-11]和PEG20K;3)CPT-11是前体药物,分子内已经含有一个内酯的“代谢软点”,其与PEG偶联后,在体内可能会派生出两种并行的代谢释药行为,即PEG-[CPT-11]→PEG20K+CPT-11→SN38和PEG-[CPT-11]→PEG-[SN38]→PEG20K+SN38;4)PEG部分在体内也会被代谢,而这种代谢既会发生在完全释药后的PEG20K,也可能发生在载药的PEG部分;5)PEG-[CPT-11]_3及其体内代谢产物PEG-[CPT-11]_2,PEG-[CPT-11],PEG20K和CPT-11具有相同的特征性碎片,质谱无法对其进行有效区分,色谱分离充满挑战。如上所述,由于缺少适合的分析策略和手段,人们对这类复杂高分子键合药的体内命运尚不清楚。针对PEG化小分子药物体内不明确的释药过程、药代动力学行为以及不确定的潜在毒性,本论文以PEG-[CPT-11]_3作为研究对象,基于LC-ESI-TOF MS技术建立全轮廓的定性及定量分析方法,并对PEG-[CPT-11]_3的吸收、分布、代谢、排泄、释药过程、抗肿瘤疗效及毒性进行了全面系统的研究,实现了多价PEG化小分子药物体内命运全轮廓分析从无到有的突破,为高分子键合药的临床及临床前研究提供有力的药代动力学理论基础与技术支持,加速了该类药物的临床转化速度与成功率。本论文的具体研究内容如下:(1)PEG-[CPT-11]_3、PEG20K及CPT-11的质谱裂解规律研究基于高分辨飞行时间质谱(ESI-TOF MS)结合全谱扫购买Compound 3描(MS ~(ALL))策略,分别对CPT-11、PEG20K和PEG-[CPT-11]_3的质谱裂解规律进行研究,并对各待测物特征性碎片进行解析及归属,首次发现了PEG-[CPT-11]_3的特征性碎片m/z 569.2740。依据碎片的特异性及响应强度,最终确定PEG20K和CPT-11的定量碎片分别为m/z 177.1098和m/z 587.2901。质谱裂解规律解析及定量碎片的确定为后续LC-ESI-TOF MS定量分析方法的建立以及各代谢产物的鉴定提供了前提条件。(2)PEG-[CPT-11]_3的大鼠血浆药代动力学研究开发可实现具有相同碎片且极性相似各组分基线分离的液相方法。创新性地建立PEG-[CPT-11]_3及其体内五种代谢产物PEG-[CPT-11]_2,PEG-[CPT-11],PEG20K,CPT-11和SN38在大鼠血浆中的提取方法及LC-ESI-TOF MS检测方法。以盐酸伊立替康作为对照组,对PEG-[CPT-11]_3药代动力学进行研究并揭示PEG-[CPT-11]_3的释药过程。PEG-[CPT-11]_3组CPT-11和SN38的半衰期分别是对照组的7倍和4.5倍,AUC_(0-t)分别是对照组的2-3倍,显著高于对照组(P<0.05)。此外,PEG-[CPT-11]_3组SN38的C_(max)明显低于对照组(P<0.05)。结果表明,PEG-[CPT-11]_3逐步释放CPT-11形成PEG-[CPT-11]_2,PEG-[CPT-11]和PEG20K,与此同时,释放的CPT-11被代谢为SN38。PEG-[CPT-11]_3有潜力降低SN38产生的毒性,保障患者用药安全性。(3)PEG-[CPT-11]_3的荷瘤鼠组织分布研究以人结直肠癌(HCT-116)荷瘤鼠为动物模型,基于本文已建立的全轮廓分析新方法,分别考察了PEG-[CPT-11]_3和盐酸伊立替康的组织分布。PEG-[CPT-11]_3组及盐酸伊立替康组中CPT-11和SN38在荷瘤鼠各组织中的分布趋势相似,CPT-11主要分布于肿瘤组织,SN38主要分布在大肠和小肠,其次是肝和肿瘤。48小时PEG-[CPT-11]_3组CPT-11和SN38在肿瘤组织浓度分别是对照组的86.2和2293倍,组织暴露时间更长。PEG-[CPT-11]_3在组织中的释药过程同血浆中一样,逐步释放CPT-11,延长了活性代谢产物SN38在肿瘤组织的暴露时间,有效改善了CPT-11抗肿瘤的疗效。(4)PEG-[CPT-11]_3的代谢研究基于碱水解和衍生化方法对PEG-[CPT-11]_3的高分子代谢产物进行考察,本文首次发现并表征了五种高分子代谢产物:PEG-[CPT-11]_2,PEG-[CPT-11],PEG20K,PEG_(10K)-[CPT-11]_(3-x)(x=0,1)和PEG10K,并且发现,除了逐步释放CPT-11形成的高分子代谢物,大鼠尿液中还存在因体内代谢而产生的更低聚合度PEG化伊立替康和更低聚合度的PEG。另外,以盐酸伊立替康作为对照组,对PEG-[CPT-11]_3体内产生的伊立替康相关小分子代谢产物进行了考察。相同考察时间内,对照组共检测到10种伊立替康相关代谢产物:SN38、SN38G、APC、NPC、M1～M6,其中主要代谢产物为SN38、SN38G和M4(CPT-11的羧酸型),PEG-[CPT-11]_3组共检测到SN38和SN38G两种伊立替康相关代谢产物。上述结果表明:PEG修饰后改善了CPT-11的结构稳定性,降低了其代谢失活生成羧酸型CPT-11的比例,使其可以更多地被转化为活性代谢SN38,进而提高抗肿瘤的疗效。(5)PEG-[CPT-11]_3的排泄研究研究发现PEG-[CPT-11]_3及其高分子代谢产物大部分经尿排泄,尿排泄是其主要排泄途径;盐酸LY-188011临床试验伊立替康对照组中CPT-11和SN38在尿液中的累计排泄率分别为11%和1%,在粪便中的累计排泄率分别为18%和5%。PEG-[CPT-11]_3组中对应的累计排泄率分别为4%和3%以及6%和17%。这提示,PEG修饰改变了CPT-11和SN38的排泄量和排泄率,进一步证实了经PEG修饰后CPT-11可以被更多地转为SN38活性代谢产物。(6)PEG-[CPT-11]_3的药效学和毒性研究以人结直肠癌(HCT-116)荷瘤鼠为动物模型,考察了PEG-[CPT-11]_3的体内抗肿瘤效果。与生理盐水对照组相比,盐酸伊立替康和PEG-[CPT-11]_3均能延缓肿瘤生长,且PEG-[CPT-11]_3的抗肿瘤疗效优于盐酸伊立替康。基于体重、食量、临床观察及组织学检查对大鼠的重复剂量毒性进行考察。盐酸伊立替康组出现3例动物死亡,存在系统毒性及骨髓毒性,而PEG-[CPT-11]_3组未观察到明显的系统毒性及骨髓毒性,提示PEG-[CPT-11]_3的安全性更高。综上所述,本文以PEG-[CPT-11]_3作为模型药物,首次从时间、空间维度上全面揭示了多价PEG化小分子药物的体内命运:1)PEG-[CPT-11]_3在体内逐步释放CPT-11,并相继代谢生成PEG-[CPT-11]_(3-x)(x=1,2)和PEG20K,释放出来的CPT-11再被高效地快速转化为活性代谢产物SN-38;2)与此同时,PEG-[CPT-11]_Lab Automation3在体内还可以进一步代谢生成更低聚合度的PEG化伊立替康及更低聚合度的PEG;3)与盐酸伊立替康相比,PEG修饰改善了CPT-11内酯环结构的稳定性,降低CPT-11代谢失活的比例,提高了其向SN38活性代谢产物的转化效率,延长了CPT-11和SN38的血浆半衰期及其在肿瘤组织的暴露时间,提高了抗肿瘤疗效和安全性。本论文的研究思路和技术手段对于阐明高分子键合药的体内时空命运具有十分重要的意义,藉此可以指导该类药物的科学设计与工艺优化,将大大提高该类药物的临床转化成功率。