PI3K抑制剂

目的 探讨miRNA-21在结直肠癌奥沙利铂(L-OHP)耐药细胞株HCT116/L-OHP中对毛细血管扩张性共济失调突变基因(ATM)/细胞周期检测点激酶(CHK)2/细胞分裂周期素(CDC)25A信号通路的影响。方法 应用细胞转染技术干扰HCT116/L-OHP细胞中miRNA-21的表达，采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测HCT116/L-OHP中ATMRemediating plant、CHK2、CDC25A和细胞周期蛋白依赖性激酶(CDK)2 mGPCR & G Protein抑制剂RNA表达，Western印迹检测该细胞株中miRNA-21表达变化后ATM、CHK2、CDC25A和CDK2蛋白表达。结果 转染miRNA-21 mimic使miRNA-21表达升高时，ATM、CHK2、CDC25A和CDK2 mRNA和蛋白的表达均随之升高，且与未转染组和阴性转染组相比较差异均具有统计学意义(P<0.05);转染miRNA-21 inhibitor使miRNA-21表达降低时，ATM、CHK2、CDC25A和CDK2 mRNA和蛋白的表达均随之降低，且与未转染组和阴性转染Staurosporine体内组相比较差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论 在结直肠癌耐药细胞株HCT116/L-OHP中，miRNA-21对ATM/CHK2/CDC25A信号通路有调控作用，抑制miRNA-21的表达可阻断ATM/CHK2/CDC25A信号通路，进而抑制耐药细胞的无限增殖。

动脉粥样硬化(AS)是一种脂质堆积、血管内皮功能障碍导致的慢性炎症性疾病，Toll样受体(TLR)/核转录因子-κB(NF-κB)通路与NOD样受体蛋白3(NLRP3)炎性小体通路在动脉粥样硬化的产生中发挥着重要的致炎作用，而瞬时受体电位香草酸亚型1(TRPV1)与瞬时受体电位锚蛋白1(TRPA1)在动脉粥样硬化的发生过程中发挥着重要的保护作用。作者对近10年国内外期刊发表的相关研selleck CCRG 81045究进行梳理，研究显示：TRPV1/TRPA1的激活可以通过多种途径激活内皮型一氧化氮合酶(eNOS)、抑制活性氧(ROS)、抑制胆固醇晶体(CC)的产生进而调控TLR/NF-κB与NLRP3炎性小体通路，抑制TLR/NLRP3介导的炎症AMG510说明书反应。同时，中医药中多种单味药有效成分与方剂可有效激活TRPV1/TRPA1或其下游途径，其对动脉粥样硬化中TLR/NLRP3通路可能具有显著的调控作用。本文进一步对已探明的方剂及中药单味药有效成分调控AS中TLR/NLRP3通路的机制进行梳理，将TRPV1/TRPA1调控TLR/NLRP3途径的机制与中药方剂与单体成分进行对应。为治疗动脉粥样硬化的中药药物相互作用机制提供新启发，为临床中医药治疗动脉Calcutta Medical College粥样硬化提供新策略。

目的：探讨乳果糖调控烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶4(NOX4)/核苷酸结合域样受体蛋白3(NLRP3)通路对类风湿性关节炎（RA）大鼠的保护作用。方法：将50只大鼠随机分为对照组、RA组、乳果糖（0.25 g/kg）组、乳果糖+NOX4抑制剂GKT137831(10 mg/kg)组、甲氨蝶呤（0.35 mg/kg）组，每组10只。除对照组外，其余各组大鼠通过尾根处皮内注射胶原乳液建立RA大鼠模型。造模完成后各组灌胃给予相应药物处理。灌胃结束次日进行关节炎评分，实时荧光定量聚合酶链式反应（RT-qPCR）法检测到大鼠粪便肠道菌群所占比例，酶联免疫吸附试验（ELISA）法检测大鼠血清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-6(IL-6)水平。苏木精—伊红（HE）染色观察踝关节prostatic biopsy puncture组织病理学变化。蛋白印迹（western blotting）法检测NOX4、NLRP3蛋白表达。结果：与对照组相比，RA组大鼠出现炎性浸润、少量纤维蛋白沉积以及滑膜出血等病理现象，粪便中拟杆菌、双歧杆菌、乳酸杆菌所占比例显著降低，而放线菌所占比例、平均关节炎评分，血清TNPF-6463922体外F-α、IL-6水平及关节组织中NOX4、NLRP3蛋白表达水平显著升高（均P<0.05）。与RA组相比，乳果糖组、甲氨蝶呤组病理现象得到改善，大鼠粪便中拟杆菌、双歧杆菌、乳酸杆菌所占比例显著增高，放线菌所占比例、平均关节炎评分，血清中TNF-α、IL-6水平，关节组织中NOX4、NLRP3蛋白表达显著降低（均P<0selleckchem Tamoxifen.05）。乳果糖组与甲氨蝶呤组上述指标比较，差异均无统计学意义（P>0.05）。与乳果糖组相比，乳果糖+GKT137831组病理损伤得到进一步改善，大鼠粪便中拟杆菌、双歧杆菌、乳酸杆菌所占比例显著增高，放线菌所占比例、平均关节炎评分，血清中TNF-α、IL-6水平，关节组织中NOX4、NLRP3蛋白表达水平显著降低（均P<0.05）。结论：乳果糖可减轻RA大鼠炎性反应，其机制可能与抑制NOX4/NLRP3通路有关。

selleck NMR目的：基于网络药理学方法，研究“土茯苓-川牛膝”药对治疗痛风性关节炎的作用机制。方BLZ945体外法：通过TCMSP平台收集“土茯苓-川牛膝”药对的主要活性成分及作用靶点，采用Swiss Target Prediction数据库预测主要活性成分靶点；通过OMIM、TTD、DisGeNET及CTD数据库获得痛风性关节炎相关靶点；通过韦恩图，得到疾病与药物的共同靶点；利用Cytoscape 3.7.2软件构建药物-化合物-靶点网络；将共同靶点上传至STRING数据库构建蛋白质相互作用（protein-protein interaction,PPI）网络图，分析后获得关键靶点；对关键靶点进行基因本体（gene ontology,GO）功能富集分析和京都基因与基因组百科全书（kyotoMultiplex immunoassay encyclopedia of genes and genomes,KEGG）通路富集分析。结果：收集并筛选出“土茯苓-川牛膝”药对17个活性成分、220个靶点，痛风性关节炎疾病相关靶点1494个“，土茯苓-川牛膝”药对与痛风性关节炎的共同靶点72个，关键靶点28个。GO富集分析得到945条富集结果，KEGG富集分析得到111条相关信号通路，主要涉及白细胞介素17信号通路、肿瘤坏死因子信号通路、Toll样受体信号通路、NOD样受体信号通路、辅助性T细胞17细胞分化等。结论：预测了“土茯苓-川牛膝”药对治疗痛风性关节炎的作用机制，体现了中药多成分、多靶点、多途径的作用特点，为进一步研究提供了理论基础和研究方向。

目的 探讨维生素AD辅助治疗儿童支气管哮喘效果及对炎症因子、T淋巴细胞亚群的影响。方法 选取2017年7月—2019年6月在该院治疗的支气管哮喘患儿120例，将患儿分为维生素A组、维生素D组、维生素AD组和常规治疗组，每组30例，观察各组治疗疗效，检测治疗前后炎症因子和T淋巴细胞亚群水平。结果 维生素A组、维生素D组和维生寻找更多素AD组治疗总有效率分别为90.00%、93.33%和100.selleck FG-459200%,高于常规治疗组的7Leech H medicinalis3.33%,但差异比较无统计学意义(P>0.05);维生素A组、维生素D组和维生素AD组治疗后用力肺活量(FVC)、第1秒用力呼气容积(FEV1)、第一秒用力通气量占预计值比例(FEV1%)、用力肺活量占预计值比例(FVC%)和最大呼气峰流速占预计值比例(PEF%)明显高于常规治疗组(P<0.05);维生素A组、维生素D组和维生素AD组治疗后白细胞介素(IL)-8(IL-8)、高敏C反应蛋白(hs-CRP)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)明显低于常规治疗组(P<0.05);维生素A组、维生素D组和维生素AD组治疗后CD3~+、CD4~+和CD8~+T淋巴细胞明显高于常规治疗组(P<0.05)。结论 维生素AD辅助治疗儿童支气管哮喘有较好的效果，更有助于患儿T淋巴细胞亚群水平改善，抑制炎症因子水平。

目的 探讨甲状腺乳头状癌(papillary thyroid carcinoma, PTC)和甲状腺乳头状GW4869体内实验剂量增生(papillary thyroid hyperplasia, PTH)中Dickkopf-1(DKK1)的表达及与上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transition, EMT)相关蛋白的关系。方法 采用生物信息学技术分析TCGA数据库中DKK1在PTC中的诊断价值；采用免疫组化EnVision法selleck检测80例PTC和60例PTH组织中DKK1蛋白的表达，以及PTC组织中MMP-2、E-cadherin和vimentin的表达，并分析其与临床病理特征及相关性。结果 生物信息学分析和免疫组化结果显示，DKK1对PTC诊断预测的曲线下面积(AUC)分别为0.674和0.874(P均<0.001),其灵敏度为95.0%,特异性为71.2%,诊断准确度为81.4%,误诊率为28.8%,漏诊率为5.0%,具有较高的诊断价值。PTC和PTH组织中DKK1的阳性率分别为28.8%(23/80)和95.0%(57/60),差异有统计学意义(P<0.001)。DKK1、MMP-2和E-cadherin表达与淋巴结转移相关(P<0.05),vimentin表达与淋巴结转移和患者年龄相关(P<0.05)。PTC组织中DKK1表达与E-cadherin表达呈正相关(r_s=0.272,P<0.05),与MMP-2、vimentin表达均呈负相关(r_s=-0.335、-0.336,P均<0.05)。结论property of traditional Chinese medicine DKK1可作为辅助PTC和PTH鉴别诊断的重要标志物；DKK1可能参与PTC的EMT过程，可作为预测PTC侵袭和淋巴结转移的潜在标志物。

目的:探讨低氧诱导因子-1α(Hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α)的小干扰RNA(SmaSAG NMRll interfering, RNA,siRNA)对胶原诱导关节炎(Collagen induced arthritiIpatasertib使用方法s, CIA)小鼠相关肺间质病变(Interstitial lung disease, ILD)的治疗效果及小鼠胸腺细胞中T淋巴细胞亚群的影响。方法:建立类风湿关节炎的动物模型CIA小鼠，实验分为空白组、CIA模型组、阴性对照组和HIF-1α-siRNA组，空白组小鼠不做任何处理，阴性对照组小鼠尾静脉注射空载体腺病毒，HIF-1α-siRNA组小鼠尾静脉注射HIF-1α-siRNA腺病毒，每周1次，共4周。实验结束后麻醉断颈处死小鼠，流式细胞术检测小鼠胸腺中Th1和Th2、Th17和Treg比例的变化，HE染色观察小鼠肺组织的病理变化。结果:CIA模型组和阴性对照组小鼠胸腺细胞中Th1细胞和Th17细胞的比例升高，Th2细胞和Treg的比例下降，与空白组比较具有统计学意Urinary microbiome义(P<0.05)。HIF-1α-siRNA组小鼠胸腺细胞中Th1和Th17细胞的比例降低，Th2细胞和Treg的比例升高，与CIA模型组和阴性对照组小鼠比较，有统计学意义(P<0.05)。模型组小鼠肺组织中出现大量淋巴细胞浸润、肺泡壁被破坏，同时出现肺间质改变，HIF-1α-siRNA处理CIA小鼠后，小鼠肺组织淋巴细胞浸润情况、肺泡壁破坏程度及肺间质改变均有所减轻。结论:HIF-1α-siRNA可以降低胸腺细胞中Th1细胞和Th17细胞的比例，同时升高Th2细胞和Treg的比例，并减轻CIA小鼠肺组织的淋巴细胞浸润情况，缓减肺泡壁的破坏及肺间质的改变，提示HIF-1α-siRNA可以通过调控胸腺细胞中的T淋巴细胞亚群，对CIA小鼠引起的肺间质病变起治疗作用。

研究目的通过筛选ox-LDL最适浓度制造钙化模型,验证IL-37干预对钙化模型的影响,研究IL-37对于人主动脉血管平滑肌细胞(HA-SMCs)的作用及其机制,为血管钙化(VC)及动脉粥样硬化(AS)寻找新的治疗靶点提供理论依据。研究方法1.筛选诱导FUT-175HA-SMCs钙化的最佳浓度:体外培养HA-SMCs,分为空白组、(10、25、50、100)μg/m L处理ox-LDL组,cck8法检测细胞增殖活性,qpcr和ELISA、WB分别检测平滑肌肌动蛋白(SMA)、平滑肌22α(SM22α)、骨形态发生蛋白(BMP2)、runx相关转录因子(RUNX2)、OC、碱性磷酸酶(ALP)、IL-37的表达,筛选出(50μg/m L)ox-LDL造模浓度,茜素红钙化染色验证模型成立。2.将HA-SMCs分为对照组、ox-LDL处理组、IL-37(2h)+ox-LDL处理组,饥饿24小时后,对照组换完全培养基,处理组换钙化培养基(10mmol/Lβ-甘油磷酸+50μg/m L L-抗坏血酸+100nmol/L地塞米松),诱导细胞3天、14天后,qpcr和WB检测TLR4、NF-κB、成骨相关因子MSX2、ALP、RUNX2的表达,cck8检测细胞增殖率,流式术检测细胞凋亡率,茜素红染色验证细胞钙化程度。3.将HA-SMCs分为对照组、ox-LDL处理组、IL-37(2h)+ox-LDL处理组、NF-κB抑制剂PDTC(2h)+ox-LDL处理组,传代后饥饿细胞24h,对照组更换完全培养基、处理组换钙化培养基,(10mmol/Lβ-甘油磷酸+50μg/m L L-抗坏血酸+100nmol/L地塞米松),qpcr、western blot检测TLR、NF-κB、磷酸化核转录因子(p-NF-κB)、RUNX2、MSX2、ALP、SMA、SM22α的表达水平。研究结果1.采用梯度浓度的ox-LDL(10、25、50、100μg/m L)处理HA-SMCs 3天,WB结果显示,50μg/m L ox-LDL处理组中IL-37的表达量最高,qpcr结果显示:梯度浓度ox-LDL处理细胞1天、7天、14天后,与对照组相比,SMA、SM22α的表达明显下降,其中50μg/m L ox-LDL处理组表达量最低,差异具有统计学意义。因此选择50μg/m L的ox-LDL作为造模干预浓度。Qupper extremity infectionspcr结果显示,与对照组相比,50μg/m L浓度ox-LDL处理细胞3天后,BMP2、RUNX2的表达量较对照组相比明显升高。ELISA结果显示,50μg/m L浓度ox-LDL处理细胞后3天,上清液中的IL-37表达有所升高。ALP试剂盒检测上清液中的ALP活性,提示ox-LDL处理组上清液中ALP活性下降,差异具有统计学意义。2.将HA-SMCs分为对照组及钙化造模组,传代后的细胞饥饿24小时后,对照组换完全培养基,造模组换钙化培养基(10mmol/Lβ-甘油磷酸+50μg/m L L-抗坏血酸+100nmol/L地塞米松)并加入50μg/m L浓度的ox-LDL诱导细胞14天,茜素红s染色结果显示,钙化造模组较对照组出现明显的橘红色钙化结节,钙化模型建立成功。qpcr、ELISA及WBEnasidenib供应商结果提示,钙化造模组IL-37在细胞内外的表达量较对照组均有明显升高,造模组成骨相关因子表达也同样升高。3.将HA-SMCs分为对照组、ox-LDL处理组、IL-37(2h)+ox-LDL处理组,饥饿24小时后,对照组换完全培养基,处理组换钙化培养基(10mmol/Lβ-甘油磷酸+50μg/m L L-抗坏血酸+100nmol/L地塞米松),诱导细胞3天后,qpcr结果显示,与对照组相比,ox-LDL处理组TLR4、NF-κB、RUNX2、MSX2、ALP的表达明显升高;与ox-LDL处理组相比,IL-37(2h)+ox-LDL处理组NF-κB、RUNX2、MSX2、ALP明显降低,同时较对照组更低。WB结果显示与对照组相比,ox-LDL处理组NF-κB表达明显升高,TLR2、RUNX2同时也升高,加入IL-37处理后,相应因子表达下降。4.茜素红染色示ox-LDL处理组钙化结节较对照组相比明显增多,而加入IL-37处理后,与ox-LDL处理组相比,IL-37(2h)+ox-LDL处理组结节数量明显减少。明确了IL-37对HA-SMCs的保护作用,增加IL-37的预处理,能够明显减少钙化结节的形成。与空白组相比、(10、25、50、100)μg/m L ox-LDL处理后,50μg/m L浓度ox-LDL组SMA表达量最低,BMP2呈高表达,差异具有统计学意义。与对照组相比,造模组IL-37高表达。(10、25、50、100)μg/m L ox-LDL处理后,细胞增殖活性明显升高,且呈浓度及时间依赖,50μg/m L ox-LDL组中加入100ng/m LIL-37预处理,细胞增殖活性被抑制。5.将HA-SMCs分为对照组、ox-LDL处理组、NF-κB抑制剂PDTC(2h)+ox-LDL处理组,传代后饥饿细胞24h,对照组更换完全培养基、处理组换钙化培养基,(10mmol/Lβ-甘油磷酸+50μg/m L L-抗坏血酸+100nmol/L地塞米松)。处理3天后,qpcr结果显示,与对照组相比,ox-LDL处理组成骨转录相关因子RUNX2、ALP、MSX2、OC明显升高。与ox-LDL处理组相比,NF-κB抑制剂PDTC(2h)+ox-LDL处理组中NF-κB明显被抑制,RUNX2的表达有所下降。WB结果显示相应蛋白表达与PCR结果的RNA表达趋势一致。证实炎症因子水平降低时,成骨相关因子的表达会被抑制,二者具有相关性。6.将HA-SMCs分为对照组、梯度浓度ox-LDL处理组(10、25、50、100μg/m L)、IL-37(2h)+ox-LDL处理组,Western blot检测磷酸化NF-κB的表达,结果显示,梯度浓度ox-LDL处理后,NF-κB的磷酸化水平呈浓度依赖性升高,50μg/m L时,磷酸化程度最强,增加IL-37预处理之后,磷酸化水平被抑制,差异具有统计学意义。与对照组相比,ox-LDL处理组TLR4、NF-κB、RUNX2的表达明显升高,加入IL-37处理后,与ox-LDL处理组相比、IL-37(2h)+ox-LDL处理组相应因子的表达明显下降、NF-κB抑制剂PDTC(2h)+ox-LDL处理组与IL-37(2h)+ox-LDL处理组具有相同趋势,但IL-37的抑制效果优于PDTC。qpcr结果提示与对照组相比,ox-LDL处理组SMA、SM22α的表达明显下降,增加IL-37、PDTC处理后,与ox-LDL处理组相比,IL-37(2h)+ox-LDL处理组SMA、SM22α表达明显升高,而NF-κB抑制剂PDTC(2h)+ox-LDL处理组与ox-LDL处理组相比,SMA的表达上升而SM22α的表达是下降的。因此,我们认为IL-37抑制炎症通路,同时抑制成骨因子表达,影响细胞表型转化,发挥钙化保护作用。研究结论综上所述,我们认为IL-37可以通过抑制TLR表达,抑制NF-κB磷酸化、抑制下游成骨转录相关因子的表达,抑制HA-SMCs成骨转化,从而抑制HA-SMCs钙化,对于血管钙化保护作用,IL-37或可作为一个新型靶点,为血管钙化及AS治疗及预后提供新的理论基础。

目的:观察体外冲击波联合针刺对早中期膝骨关节炎气滞血瘀证患者步态稳定性、膝关节功能、炎症因子水平的影响。方法:选择80例早中期气滞血瘀型膝骨关节炎患者，随机分为对照组和观察组，每组40例。对照组接受体外冲击波治疗，观察组接受体外冲击波联合针刺Pulmonary infection治疗。比较两组患者治疗前后炎症因子[白细胞介素(IL)-1、IL-1β、C反应蛋白(CRP)、前列腺素E_2(PGE_2)、6-酮前列腺素E1α(6-keto-PGE1α)、P物质(SP)]水平、步态稳定性(包括患侧着地内翻角VP-16分子式、离地仰角、着地仰角、支撑相、侧摆动相)、Lysholm膝关节评分量表(LKSS)评分及中医证候评分，评估临床疗效。结果:治疗后，两组患者IL-1、CRP、IL-1β、6-keto-PGE1α、PGE_22、SP水平均低于治疗前(P<0.05),且观察组均低于对照组(P<0.05);两组患者患侧着地内翻角、侧摆动相均较治疗前降低(P<0.05),且观察组均低于对照组(P<0.05);两组患侧离地仰角、着地仰角、支撑相均较治疗前升高(P<0.05),且观察组均高于对照组(P<0.05);两组患者中医证候评分均较治疗前降低(P<0.05),且观察组低于对照组(P<0.05);两组患者LKSS评分较治疗前GW4869升高(P<0.05),且观察组高于对照组(P<0.05)。观察组总有效率为95.00%(38/40),高于对照组的80.00%(32/40),差异有统计学意义(P<0.05)。结论:采用体外冲击波联合针刺治疗早中期膝骨关节炎气滞血瘀证，可降低患者关节液炎症因子和致痛因子水平，改善其膝关节功能，提升步态稳定性及临床疗效。

目的 应用超声造影早期定量评估结直肠癌肝转移患者抗血管生成靶向治疗的效果。方法 选取于我院就诊的54例结直肠癌肝转移患者，其中25例行贝伐单抗联合FOLFOX/FOLFIRI方案化疗治疗（研究组），29例仅行FOLFOXCCRG 81045体外/FOLFIRI方案化疗（对照组），两组均行超声造影检查并获得达峰时间（TTP）、峰值强度（PI）、上升斜率（Pw）和曲线下面积（AUC），比较其治疗前后的差异。两组患者进一步根据治疗是否有效分别分为治疗有效者和无效者，比较治疗前后超声造影定量参数的差异。结果 研究组治疗前后PI、Pw和AUC比较差异均有统计学意义（均P<0.05），对照组治疗前后仅AUC比较差异有统计学意义（P<0.05）。研究组中18例有效，7例无效；有效者治疗前后PI和Pw均高于无效者，差异均有统计学意义（均P<0.05）；有效者治疗前后PI差值和Pw差值与无效者比较差异均有统计学意义（t=5.135、4.557，均P<0.05）。对照组中6例有效，23例无效；治疗有效者更多与无效者TTP、PI、Pw、AUC治疗前后及其差值比较差异均无统计学意义。结论 超声造影可早期定量评估结肠癌肝转移患者抗genetic conditions血管生成靶向治疗的效果。