河南省人源产ESBLs鼠伤寒沙门菌单相变异株的分子特征研究

目的 分析河南省腹泻病例粪便标本中产超广谱β内酰胺酶(ESBLs)的鼠伤寒沙门菌单相变异株耐药情况,并研究其分子学特征。方法 对河南省腹泻粪便中分离的124株鼠伤寒沙门菌单相变异株沙门菌,通过肉汤稀释法进行抗生素敏感性试验并筛选产ESBLs菌株;PCR方法检测β-内酰胺酶编码基因携带情况,采用质粒selleckchem IACS-010759接合试验分析耐药基因的水平转移情况,应用脉冲场凝Canagliflozin胶电泳(PFGE)进行亲缘关系分析。结果 124株鼠伤寒沙门菌单相变异株沙门菌耐药严重,其中有16株为产ESBLs菌株。16株产ESBLs菌株均携带CTX-M型耐药基因,并检测出OXA型和TEM型耐药基因;其中9株菌可将CTX-M基因通过质粒转移到大肠埃希菌J53,药敏分析发现其他抗生素的耐药性可以发生共转移。16株产ESBLs鼠伤寒沙门菌单相变Liver hepatectomy异株沙门菌经XbaⅠ酶切后共分为14种带型,无明显的优势带型。结论 检出产ESBLs的鼠伤寒沙门菌单相变异株沙门菌基因型具有多样性,耐药基因可通过接合性质粒在不同菌属间播散。

丝氨酸精氨酸蛋白激酶1在体外促进HepG2细胞干性的获得

目的 研究丝氨酸精氨酸蛋白激酶1(SRPK1)对肝癌细胞株HepG2肿瘤干性的作用。方法 从GEPIA2数据库获得TCGA中关于肝细胞肝癌(LIHC)的数据,分析SRPK1表达在癌组织及正常样本的差异,以及与患者生存时间、临床分期的关系。采用TIMER数据库分析SRPK1表达与肝癌组织中浸润免疫细胞的相关性。构建SRPK1过表达和抑表达的HepG2稳转细胞株,并根据SRPK1表达差异分为SRP获悉更多K1组及对照的Vector组,shRNA组及对照的Scramble组,Western blot检测4组细胞株SRPK1的蛋白水平。体外成球实验检测肿瘤细胞的成球能力,流式细胞术检测侧群(SP)细胞在细胞群中的比例。实时荧光定量PCR比较细胞肿瘤干性标记物Nanog、Oct4、CD133及Bmi1的mRNA水平。基因集合富集分析(GSEA)预测SRPK1与Wnt/β-catenin通路的相关程度。结果 SRPK1表达在LIHC患者肿瘤组织中显著高于正常组织(P<0.05),在患者各个分期中表达有差异(P<0.05),高表达SRPK1患者生存率低于PD-0332991 MW低表达SRPK1患者(P<0.05),肝癌组织中SRPK1与B细胞、CD8~+T细胞、CD4~+T细胞、巨噬细胞、中性粒细胞和树突细胞的浸润水平均相关(P<0.05)。Western blot结果显示SRPK1组SRPK1蛋白相对表达量高于Vector组(P<0.01),shRNA组则低于Scramble组(P<0.01)。SRPK1组肿瘤细胞成球率(SFE)、SP细胞比例、Nanog、Oct4、CD133及Bmi1的mRNA相对表达量均高于Vector组(P<0.05),shRNA组低于Scramble组(P<0.05)。GSEA结果显示LIHC中SRPK1高表达与Wnt/β-caMedicine and the lawtenin通路活化正相关(P<0.05)。结论 SRPK1促进HepG2细胞肿瘤干性的获得。

HER2低表达乳腺癌的临床病理学特征及其新辅助化疗疗效的相关影响因素分析

目的 探讨人类表皮生长因子受体2(human epidermal growth factor receptor 2,HER2)阴性乳腺癌中不同程度HER2蛋白表达者的临床病理学特征及HER2低表达乳腺癌新辅助化疗疗效的相关影响因素。方法 回顾性收集161例西南医科大学附属医院乳腺外科2019年3月至2021年3月期间初治行新辅助化疗的HER2阴性乳腺癌患者的临床病理资料,分析不同程度HER2蛋白表达者临床病理学特征的差异,运用非条件logistic回归模型分析HER2低表达乳腺癌患者https://www.selleck.cn/products/Lapatinib-Ditosylate.html新辅助化疗后病理完全缓解(pathologic complete response,pCR)率的影响因素。结果 161例HER2阴性乳腺癌患者中HER2低表达者共108例,占67.1%;HER2低表达患者比HER2零表达[免疫组织化学染色(immunohistochemistry,IHC) 0]患者有更高的腋窝淋巴结转移率(P=0.048),更低的组织学分级(P=0.006),激素受体表达阳性者占比更高(P<0.001);pCR率在HER2 IHC 0、IHC 1+和IHC2+/原位杂交(in situ hybridization,ISH)–三者间的差异无统计学意义(P=0.099),在总体人群及Luminal型亚组人群中HER2低表达者的pCR率比HER2 IHC 0者的低,其差异有统计学意义(P<0.05),但在三阴性乳腺癌亚组中差异无统计学意义(P=0.81genetic offset4)。logistic回归分析结果显示,年龄、组织学分级和雌激素受体表达状态是HER2低表达乳腺癌新辅助化疗后pCR率的独立影响因素(P<0.05)。结论 HER2阴性乳腺癌患者不同程度的HER2蛋白表达有独特的临床病理学特征,HER2低表达乳腺癌新辅助化疗的pCR率低于HER2零表达乳腺癌患者,年龄、组织学分级和雌激素受体表达状态为HER2低表达乳腺癌患者新辅助化疗pCRselleck NMR率的独立影响因素。

miR-122靶向调控RhoA基因影响乙型肝炎病毒复制与表达的机制研究

目的 探讨miR-122通过调控小G蛋白超家族成员RhoA基因对隐匿性乙型肝炎病毒(HBV)复制与表达的影响及其作用机制。方法 实时荧光定量PCR测定HBV(+)与HBV(-)的肝癌患者组织、HepG2细胞与HepG2.2.15细胞中miR-122表达差异,实时荧光定量PCR和Western Blot检测HBV(+)与HBV(-)的肝癌患者组织、HepG2细胞与HepG2.2.15细胞中RhoA mRNA和RhoA蛋白的表达差异;按照实验分组将pEGFP-C1-miR-122与pcDNA3.0-V14RhoA转染至HepG2.2.15细胞,实时荧光定量PCR测定miR-122与RhoA mRNA表达,Western Blot检测RhoA蛋白表达;生物信息学方法预测miR-122与RhoA基因的靶向结合位点,构建野生型RhoA 3′非翻译区(3′UTR)和突变型RhoA 3′UTR双荧光素酶表达载体,检测细胞荧光素酶活性变化;酶联免疫吸附试验测定细胞培养上清液中乙型肝炎表面抗原(HBsAg)与乙型肝炎e抗原(HBeAg)水平,实时荧光定量PCR检测细胞培养上清液中HBV DNA水平,WesternAdavosertib体内 Blot检测细胞内Rho相关蛋白激酶(ROCK)-1与ROCK-2相对表达水平。结果 相较于HBV(-)肝癌患者组织,HBV(+)肝癌患者组织中miR-122表达下调,RhoA mRNA和RhoA蛋白相对表达水平上调(P<0.05);与HepG2细胞比较,HepG2.2.15细胞中miR-122表达也下调,RhoA mRNA和RhoA蛋白相对表达水平上调(P<0.05)。经预测Smoothened Agonist细胞培养发现RhoA mRNA 3′UTR与miR-122在特定区域存在碱基互补现continuing medical education象,miR-122 mimic和RhoA 3′UTR WT重组质粒共转染的细胞中相对荧光素酶活性降低(P<0.05)。此外,过表达miR-122的HepG2.2.15细胞中RhoA mRNA和RhoA蛋白相对表达水平下调(P<0.05)。与空白组比较,miR-122组HepG2.2.15细胞培养上清液HBsAg与HBeAg水平均降低,HBV DNA表达降低,ROCK-1与ROCK-2表达均上调(P<0.05);而V14RhoA组HBsAg与HBeAg水平则高于空白组,HBV DNA表达升高,ROCK-1与ROCK-2表达均上调(P<0.05)。结论 miRNA-122可通过下调RhoA基因表达抑制HBV的复制和表达,其机制可能与抑制Rho/ROCK信号通路激活有关。

基于电融合方法的牛妊娠相关糖蛋白单克隆抗体制备及其应用

为了制备抗牛妊娠相关糖蛋白(bPAG)单克隆抗体,本试验提纯妊娠母牛子叶bPAG,免疫小鼠后进行细胞电融合,通过ELISA、Westselleckchemern blot方法对抗bPAG单克隆抗体进行筛选。结果显示:获得5株bPAG特异性强、灵敏度高的单克隆抗体,抗体最高效价为1∶256 000,亲和力最高可达到3.75×10~7 L/mol, 5株单克隆抗体均能识别天然bPAG蛋白。采用高碘酸钠法对单抗标记辣根过氧化物酶(HRP),将最佳配对抗体用于建立双抗夹心ELISA方法,对chronic infection64个血清样本进行检测。结果显示:以10H2作为捕获抗体与HRP-5G1配对建立的双抗夹心ELISA方法检测bPAG阳性和阴性血清样本,与爱德士牛早孕检测试剂盒比较符合率达95.2%。结果表明,本试验运用细胞电融合法制备的抗bPAG单克隆抗体可应用于建立双抗夹心ELISA体系,为下一步bPAG检测试剂盒的研制提供Nirogacestat IC50技术支持。

通关藤注射液通过调控ATF3表达对紫杉醇抗乳腺癌细胞的增效作用

目的 探讨ATF3介导的通关藤注射液增强紫杉醇抗乳腺癌的作用机制。方法 体外培养人乳腺癌MDA-MB-231细胞,siRNA干扰ATF3的表达,给予通关藤注射液和紫杉醇单独或联合干预。采用RT-qPCR和Western blot法分别检测ATF3及相关细胞因子CCL2、TNF-α的表达,细胞划痕实验和Transwell实验检测细胞迁移和侵袭能力,Hoechst活细胞染色和流式细胞术检测细胞凋亡情况。结果 在ATF3-siRNA干扰的MDA-MB-231细胞中,紫杉醇可上调ATF3 mRNA和蛋白表达及细胞因子CCL2、TNF-α m购买LY2157299RNA表达(P<0.05);而通关藤注射液有抵消紫杉醇引起的ATF3 mRNA和蛋白表达升高的趋势,可抵消细胞因子CCL2、TNF-α mRNA表达的上调(P<0.01)。通关藤注射液可抑制MDA-MB-231细胞的增殖和转移https://www.selleck.cn/products/liproxstatin-1.html、诱导细胞凋亡,并且联合紫杉醇组的作用更为显著(P<0.01)。结论 通关藤注射液联合紫杉醇可能通Medical coding过调控ATF3及相关细胞因子的表达,抑制乳腺癌细胞的增殖、转移、侵袭,促进乳腺癌细胞的凋亡,从而发挥增效作用。

异硫氰酸异丁酯抑制肝癌细胞HepG2生长的效应与机理

为了探究异硫氰酸异丁酯(iIntima-media thicknesssobutyl isothiocyanate)对肝癌细胞HepG2的生长抑制效应及其分子机制,该研究通过MTT实验检测化合物对细胞的生长抑制率,计算出IC_(50)值为3.5μg·mL~(-1);通过流式细胞技术检测发现0.437μg·mL~(-1)以上浓度的化合物能诱导HepG2细胞凋亡;通过划痕实验检测发现0.875μg·mL~(-1)以上selleck化学浓度的化合物能抑制细胞迁移;进一步通过生物信息学分析表明异硫氰酸异丁酯的靶蛋白可能为巨噬细胞迁移抑制因子(MIF),且HepG2细胞中MIF表达量高于低敏感株.免疫印迹实验也进一步发现化合物不仅能够抑制蛋白酪氨酸激酶2/信号转导子和转录激活子3(JAK2/STAT3)信号通路的激活,还能下调p53蛋白表达.研究结果表明,异硫CHIR-99021溶解度氰酸异丁酯可能通过靶向HepG2细胞中的MIF蛋白,影响MIF与其受体CD74相互作用,从而下调p53蛋白表达,阻滞细胞周期的正常进行,诱导细胞凋亡,对肝癌具有特异性的抑癌潜力.

红细胞比容水平与冠心病发展的相关性研究

目的 探讨红细胞比容(hematocrit, HCT)与冠心病发展的相关性及可能存在的作用机制。方法 纳入首都医科大学附属北京安贞医院体检中心体检人员共2 126名进行统计分析,根据HCT分组进行倾向评分匹配后总共匹配126对,通过二元logistic回归法分析体检人员HCT和冠心病的相关性。为探究可能存在的作用机制,本文选取一例临床诊断为冠心病的患者的冠状动脉CTA影像数据进行三维重建,采用计算流体动力学方法对比分析不同HCT水平(10%~60%)的冠状动脉血管壁面剪切力(wall shear stress, WSS)分布。结果 临床数据回归分析显示,HCT与冠心病的发生存在显著正向关系。计算流体动力学分析显示HCT水平不同,冠状动脉壁面剪切力存在差异GNE-140。HCT=10%时具有最低的剪切应力,且HCT大小与壁面剪切力呈正相关。当HCT>50%时狭窄部位WSS为42 Pa,可能导致内皮剥脱,进一步损伤血管,导致斑块破裂。结论 HCT与冠心病发展显著相关,可能通过影Growth media响冠状动脉血流动力学参与冠心Mirdametinib化学结构病的发展。提示临床医生关注HCT值和心血管危险因素的结合可能有助于临床诊疗。

FCC模式护理在乳腺癌术后中的应用

目的 分析以家庭为中心(FCC)模式的护理应用于乳腺癌术后患者的价值Hepatocyte apoptosis,为临床制订相应护理措施提供理论依据。方法 选取2018年9月—2021年6月于天津医科大学第二医院就诊的乳腺癌患者80例,均已行乳腺癌改良根治术治疗,根据建档时间分为FCC组和常规组,各40例。常规组实施常规护理,FCC组实施FCC模式护理。比较两组干预前后SAS、SDS评分、自我管理能力、康复训练依从性。结果 干预前,两组SAS、SDS评分比较差异无统计学意义(P>0.05);干预后,两组SAS、SDS评分均低于干预前,且FCC组SAS、SDS评分低于常规组,差异均有统计学意义(P<0RepSox说明书.05)。干预前,两组运动、饮食、用药、康复锻炼自我管理能力评分比较差异无统计学意义(P>0.05);干预后,两组自我管理能力指标评分均高于干预前,且FCC组高于常规组,差异均有统计学意义(P<0.05)。FCC组康复训练总依从率为95.00%,高于常规组的77.5PCI-327650%,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 FCC模式护理可改善乳腺癌改良根治术患者的心理状态,提高自我管理能力,改善康复训练依从性,同时可帮助患者融入家庭生活。

反相高效液相色谱法测定抗体药物中组氨酸的含量

目的 建立并验证用于抗体药物中组氨酸含量测定的反相高效液相色谱法(reverse-phase high performance liquid chromatography, RP-HPLC)。方法 利用柱前衍生法建立组氨酸含量检测方法,并对该方法的专属https://www.selleck.cn/products/Puromycin-2HCl.html性、准确度、重复性、中间精密度、线性、工作范围和耐用性进行验证。结果 该方法专属性良好,在组氨酸的保留时间范围内,无基质缓冲液组分和分析溶剂的干扰,且供试品和对照品的组氨酸保留时间偏差为0.45%,符合可接受标准(≤5%)。5个水平的加标溶液(70%,85%,100%,115%和130%)的回Biodiverse farmlands收率在93.0%~102.4%之间,且3次独立测定各水平浓度的变异系数均小于5%,符合准确度、线性和检测范围的验证要求(回收率在95%~105%之间,变异系数≤5%)。组氨酸浓度在2.170~4.033 mg/ml(相当于每次进样10.85~20.15μg)范围内,进样量与峰面积呈良好的线性关系(R~2=0.995),且y轴截距的95%置信区间包含原点。同一份供试品溶液的6次独立测定浓度的变异系数为1.2%,符合重复性的可接受标准(≤5%);两名实验人员分别在3个工作日对同一份供试品溶液的18次独立测定的浓度的变异系数为3.1%,符合中间精密度的可接受标准(≤10%)。衍生后的待测品和对照品溶液分别在(5±3)℃密封瓶条件下在自动进样器中暂存24 h和26 h后的回收率分别为100.3%和100.2%,符合耐用性的可接受标准(9Gefitinib-based PROTAC 3分子式5%~105%)。结论 建立了柱前衍生RP-HPLC检测抗体药物中组氨酸含量的方法,该方法重现性好、专属性强、精密度及准确度高,可对其组氨酸进行质量控制。