PI3K抑制剂

目的 观察健脾补肺化痰方对支气管哮喘缓解期小鼠肠道微生物群的影响。方法 通过卵白蛋白联合Al(OH)_3致敏雾化建立缓解期哮喘模型，将模型复制成功的小鼠随机Adavosertib分为模型组、健脾补肺化痰方组、孟鲁司特钠组，每组8只，分别予以生理盐水、健脾补肺化痰方溶液、孟鲁司特钠溶液，另设空白组8只。采用肺通气功能试验检测第1秒用力呼气量/用力肺活量、用力呼气量为25%～75%肺活量时的平均流量/用力肺活量；苏木精—伊红染色观察肺组织与结肠组织的病理变化；夹心酶联免疫吸附试验检测血清、粪便中组胺水平；采用16S rDNA高通量测序对肠道菌群进行检测。结果 与空白组比较，模型组小鼠结肠组织与肺组织存在病理改变，肺通气功能显著下降(P<0.05),血清中组胺水平明显升高(P<0.05),粪便中组胺水平与拟杆菌门(Bacteroidetes)、放线菌门(Actinobacteria)、普氏菌科(Prevotellaceae)群落丰PF-03084014采购度降低(P<0.05),厚壁菌门(Firmicutes)、毛螺菌科(LachnospiraceaBiomass exploitatione)群落丰度明显升高(P<0.05)。与模型组比较，健脾补肺化痰方组结肠组织与肺组织的病变得到缓解，肺功能提高(P<0.05),血清中组胺水平下降(P<0.05),粪便中组胺水平与拟杆菌门、放线菌门、普氏菌科、紫单胞菌科(Porphyromonadaceae)群落丰度升高(P<0.05),厚壁菌门和毛螺菌科群落丰度下降(P<0.05)。拟杆菌门、厚壁菌门、放线菌门与肺功能、组胺水平具有相关性。结论 健脾补肺化痰方可通过调节肠道菌群及其代谢产物组胺治疗缓解期支气管哮喘。

四苯乙烯(TPE)作为一种典型的具有聚集诱导发光现象(AIE)的分子,具有独特的螺旋桨状结构。因其合成简单,修饰方便,且具有优异的光学性能,在有机荧光材料领域备受关注,是一颗冉冉升起的新星。如何合理的修饰四苯乙烯,并在iCCA intrahepatic cholangiocarcinoma需要时开启或关闭AIE是四苯乙烯衍生物应用的关键。此外稀土元素具有优异的光、电、磁性能,一直是科研领域的重点研究对象,也是国家不可或缺的战略资源。在光学领域,由于稀土元素具有众多的电子激发能级,其荧光发射能够覆盖整个可见光和近红外波长范围。通过适当的方法将TPE衍生物与稀土元素结合,将AIE机理引入稀土领域,并探讨荧光团间的相互作用CX-5461使用方法,对荧光调控具有重要意义。在第二章的内容中,我们通过Suzuki偶联反应将吡啶环引入TPE,再通过吡啶与卤代烃的亲核取代反应引入氨基和离子键,合成了三种TPE衍生物。这三种TPE衍生物由TPE阳离子和简单溴离子组成,具有一定的水溶性。并且不同数量的电荷和氨基,对TPE衍生物的水溶性具有一定影响,并通过丁达尔效应和郎伯比尔定律进一步确认三种化合物在水中合适的溶解浓度。三种化合物在乙醇/乙酸乙酯混合体系中具有典型的AIE效应。此外,这三种具有AIE效应的水溶性离子型TPE衍生物,可以作为肝素检测的荧光探针,且每个探针都有自己的优点,可适用于不同条件,相信这三种荧光探针在荧光检测领域具有广泛的应用前景。在第三章的内容中,由于受到第二章中TPE阳离子和肝素阴离子结合的启发,我们发现抗衡离子对TPE阳离子的分子堆积以及荧光具有非常显著的影响,而大部分研究者都没有考虑阴离子本身的发光,因此,我们合成了一种离子型稀土配合物,并将其中的稀土配合物阴离子与TPE阳离子结合,构建了一种新型的有机稀土复合物,这种复合物能够同时购买Erdafitinib具有稀土优异的光学性能和TPE的AIE效应。该化合物在DMF/水的体系中具有独特的AIE/聚集诱导淬灭(ACQ)双重性质,并通过荧光寿命、紫外和磷光光谱等数据,探讨了分子内部的能量传递途径,且对其ATE/ACQ的这种独特的双重荧光性质做出了初步解释。此外,我们还发现该体系具有可协调性荧光的性质,可以通过添加三磷酸腺苷(ATP)和聚丙烯酸来调控体系的荧光发射,为设计可调谐荧光分子提供了一种新的思路和方法。

目的 分析下肢远端深静脉血栓(DDVT)住院患者的临床资料，探讨DDVT短期进展的影响因素。方法 回顾性分析2020年1月—2022年1月河南省人民医院诊治合并DDVT 165例住院患者的临床资料。165例入院后行下肢血管超声检查，诊断DDVT后依据血栓情况、临床症状及出血风险评估结果确定是否行抗凝治疗、抗凝药物及剂量。2周后复查下肢血管超声或行肺动脉造影，110例DDVT无变化或消失者为未进展组，55例DDVT进展至腘静脉、股静脉、髂静脉或形成无症状的肺栓塞者为进展组。比较2组性别比例、年龄、体质量指数、合并症(高血压、糖尿病、冠心病)、吸烟史、血栓部位、1个月内手术史、血栓史、下肢水肿、活动期肿瘤、中心静脉置管、卧床制动>3 d、抗凝治疗比率及出血并发症发生情况；记录入院时白细胞计数、血小板计数、血红蛋白、C反应蛋白、白蛋白、乳酸脱氢酶、空腹血糖、血肌酐、凝血酶原时间、凝血酶原活动度、活化部分凝血活酶时间、D-二聚体、总胆固醇、三酰甘油水平；多因素logistic回归分析住院患者DDVT短期内进展的影响因素。结果 (1)165例中行抗凝治疗129例，均未发生出血并发症。进展组活动期肿瘤(20.0%)、1个月内手术史(47.3%)、血栓史(14.5%)、卧床制动>3 d(56.4%)比率均高于未进展组(8.2%、30.0%、3.6%、39.1%)(P<0.05),抗凝治疗比率(61.8%)低于未进展组(86.4%)(P<0.0Oral bioaccessibility5),2组性别比例，年龄，体质量指数，合并高血压、糖尿病、冠心病比率，血栓部位，有吸烟史、下肢水肿、中心静脉置管比率，入院时白细胞计数、血小板计数、血红蛋白、selleck激酶抑制剂C反应蛋白、白蛋白、乳酸脱氢酶、空腹血糖、血肌酐、凝血酶原时间、凝血酶原活动度、活化部分凝血活酶时间、D-二聚体、总胆固醇、三酰甘油比较差异均无统计学意义(P>0.05)。(2)血栓史(OR=9.037,95%CI:2.235～36.538,P=0.002Docetaxel分子式)、活动期肿瘤(OR=3.734,95%CI:1.274～10.940,P=0.016)是住院患者DDVT短期内进展的危险因素，抗凝治疗(OR=0.150,95%CI:0.062～0.362,P<0.001)是其保护因素。结论 有血栓史和活动期肿瘤的住院患者DDVT易在短期内进展，抗凝治疗可降低DDVT进展的风险。

羊肉营养丰富,是一种药食兼用的肉类食品。作为羊肉生产大国,近几年来,我国羊肉产量持续增加,具有良好前景,但消费量却不及其他畜禽肉,并且销售形式以生鲜肉为主。我国规模化加工羊肉的企业少,标准化程度低,羊肉加PF-03084014工种类单一,市场上的羊肉香肠并不多见,我国对于羊肉香肠的加工研究仍处于探索阶段,难以实现规模化生产,除了羊肉价格高之外,这与羊肉本身存在令人不适的特殊气味也有着密切的关系,通常将这种味道称之为“膻味”。羊肉所具有的膻味会降低消费者的可接受度。因此,本课题以羊肉为研究对象,在香肠基本配方的基础上,探究乳酸菌和酵母菌协同作用对于羊肉香肠膻味的脱除效果以及最终成品品质的影响。本研究的主要研究结果如下:(1)羊肉香肠膻味指数评价模型的建立本研究利用感官评分、电子鼻、游离脂肪酸构建羊肉膻味强度指数评价模型。将感官评分进行数学拟合,可得膻味强度y值Bio ceramic=-0.77007+0.77207e^~((x/9.16271)),R~2=0.99989。利用主成分分析法分别分析电子鼻和游离脂肪酸的测定结果,发现由游离脂肪酸所构建的膻味强度评价模型计算值与感官评价结果呈显著相关(P<0.01),相关系数为0.992。膻味强度F值=0.63625F_1+0.28808F_2,其中,F_1=0.993X_1+0.428X_2+0.983X_3+0.246X_4+0.916X_5+0.901X_6+0.960X_7+0.567X_8,F_2=0.071X_1+0.852X_2-0.133X_3+0.966X_4-0.289X_5-0.394X_6-0.251X_7+0.565X_8。(2)羊肉香肠中除膻菌株的筛选鉴定及复配研究从羊肉香肠中筛选得到5株具有产脂肪酶能力且符合肉制品发酵剂相关要求的乳酸菌,分别为戊糖片球菌(Pediococcus pentose)L1、L7、L17、L21和L211,5株具有良好产酒精能力且符合肉制品发酵剂相关要求的酵母菌,分别为近平滑假丝酵母(Candida parapsilosis)Y17、Y21、Y22、Y23和Y34,均不会产生吲哚类有害物质,也均不会产生α-溶血和β-溶血,不属于溶血菌株。其中,结合乳酸菌的产酶能力、酵母菌的产酒精能力及各自的生长特性,选取了戊糖片球菌L7和近平滑假丝酵母Y22进行了拮抗和复配实验。两株菌之间无拮抗作用,且最佳复配比为L7:Y22=2:1。(3)乳酸菌、酵母菌接种对羊肉香肠膻味和品质的影响通过膻味感官评分结果和膻味强度F值,发现复配接种戊糖片球菌L7和近平滑假丝酵母Y22能够显著降低羊肉香肠中的膻味(P<0.05)。降低羊肉香肠p H值,最终达到5.33±0.22,从而控制了羊肉香肠中微生物的数量,减少组胺和酪胺的积累,还能够抑制脂肪的氧化,复配接种组羊肉香肠成品的酸价为1.26±0.20 mg/kg显著低于空白对照组的3.17±0.12 mg/kg(P<0.05),过氧化值仅为0.0069±0.0006 g/100g显著低于A组的0.0095±0.0005 g/100g(P<0.05),TBARS值始为0.17±0.01 mg/kg显著低于空白对照组组的0.22±0.01 mg/kg(P<0.05)。此外,复配接种还能提高羊肉香肠的感官品质,质构特性、色度值,增加了挥发性物质的种类,提升了风味,该组羊肉香肠的感官评分为88.50±5.28分,显著高于空白对照组的69.50±7.83分(P<0.05)。(4)乳酸菌和酵母菌复配接种发酵羊肉香肠的贮藏将乳酸菌和酵母菌最佳复配比接种发酵的羊肉香肠干燥后,经真空包装在37℃、室温(20℃)、4℃、-20℃保存28 d,结果显示,第28 d时,4℃和-20℃下贮藏均能够维持羊肉香肠的感官品质,且-20℃贮藏效果最佳,4℃贮藏selleckchem28 d的羊肉香肠感官评分为77.67±2.08分,-20℃的感官评分为83.34±1.52分。并且,-20℃下贮藏28 d能够维持羊肉香肠的酸度,TBARS值为0.22±0.01 mg/kg,TVB-N值仅为13.32±0.86 mg/100g,说明复配接种发酵的羊肉香肠在-20℃下具有良好的贮藏性。本研究的结果表明,采用从羊肉香肠中筛选得到的戊糖片球菌L7和近平滑假丝酵母Y22,复配接种发酵羊肉香肠,能够降低羊肉香肠的膻味,提升其品质,为获得膻味轻、食用品质佳的羊肉香肠提供理论支持。

目的 分析依诺肝素联合胰岛素治疗中度重症高脂血症型急性胰腺炎的安全性。方法 选取2021年6月—2023年6月南京鼓楼医院集团宿迁医院（徐州医科大学附属宿迁医院）133例中度重症高脂血症型急性medicinal food胰腺炎患者，利用最新统计学软件生成随机序列后将其分为观察组（n=65）和对照组（n=68）。观察组采用依诺肝素联合胰岛素治疗，对照组给予胰岛素治疗。观察比较两组患者治疗效果。结果 治疗后，观察组各项凝血指标均优于对照组，差异Z-VAD-FMK配制有统计学意义（P<0.05）。观察组症状缓解时间较对照组更短，差异有统计学意义（P<0.05）。治疗后，观察组三酰甘油水平（4.62±2.42）mmol/L低于对照组，差异有统计学意义（t=12.MG132061,P<0.05）。结论 依诺肝素联合胰岛素治疗能够降低中度重症高脂血症型急性胰腺炎患者血脂水平、改善凝血功能，对血小板计数无明显影响，且不增加出血相关不良事件。

目的原发性先天性青光眼(Primary congenital glaucoma,PCG)是一种罕见且严重的青光眼类型,它可带来视觉功能障碍,给患者及其家庭带来严重的经济和身心负担。在前期研究中,课题组通过全外显子测序在PCG家系中检测出一个新的候选致病基因P-A及其突变(c.580G>A,pE194K),且研究表明该突变位点具有致病性;此外,通过Hoechst33342/PI染色发现P-A突变(c.580G>A,p.E194K)诱导的凋亡细胞数增加,且流式细胞仪检测结果显示c.580G>A,p.E194K的细胞凋亡率约为28.23%,其中早期凋亡约为10.72%。在前期研究基础上,本课题继续探讨P-A突变(c.580G>A,p.E194K)对人源小梁网细胞凋亡的影响,以明确P-A在PCG中可能的致病机制,并补充诱发PCG的候选致病基因,为PCG患者的诊断和治疗提供新的思路。方法1.在P-A野生型质粒(P-A-pCMV6-Entry-Flag)中引入c.580G>A位点构建突变型真核表达质粒(P-A-pCMV6-c.580Smoothened AgonistG>A)。以人源小梁网细胞为实验对象,采用体外转染法分别将空载质粒、P-A野生型及突变型质粒转染小梁网细胞。以P-A为对照,探究P-A突变对小梁网细胞凋亡的影响。2.使用荧光光切Inflammatory biomarker显微镜检测各实验组细胞线粒体膜电位的变化,并观察各实验组细胞Annexin V-FITC凋亡染色结果。3.使用qRT-PCR和Western blot分别检测各实验组细胞凋亡相关分子mRNA水平和蛋白水平的表达情况。4.设计、合成并筛选shRNA干扰P-A突变蛋白表达,Western blot检测有明显变化的凋亡相关分子蛋白表达的情况。结果1.本研究成功构建了P-A突变的真核表达质粒(P-A-pCMV6-c.580G>A)。2.P-A突变的小梁网细胞呈现圆形、椭圆形或不规则形状,细胞间间隙增大且细胞间彼此分离,密度较P-A野生组明显降低;且P-A突变引起了小梁网细胞线粒体膜电位的下降。此外,Annexin V-FITC凋亡染色结果显示P-A突变诱导小梁网细胞出现凋亡现象。3.Western blot结果表明P-A突变可引起Bax、Caspase-3/-8/-9、细胞色素c的表达增加,Bcl-2表达下降,而Fas和TNFα则不受影响,qRT-PCR检测结果与上述基本一致。GSI-IX纯度4.与对照组相比,干扰P-A突变引起Bax、Caspase-3/-8/-9、细胞色素c的表达相对下降,而Bcl-2表达相对增加。结论本研究表明P-A突变可通过内源性凋亡途径诱导人源小梁网细胞发生凋亡。

目的 探究四烯甲萘醌（MK-4）通过减轻铁死亡对四氯化碳（CCl_4）诱导的急性肝损伤（ALI）小鼠的保护作用及其机制。方法 选用8周龄成年ICR雄鼠，适应性饲养后，分为Control组、MK-4组、CCl_4模型组（6、12、24 h）、MK-4+CCl_4组（6、12、24 h），每组6只。Control组腹腔注射同等剂量玉米油；MK-4组腹腔注射40 mg/kg的MK-4溶液，1 h后腹腔注射同等剂量玉米油；MK-4+CCl_4组（6、12、24 h）先腹腔注射40 mg/kg的MK-4溶液，1 h后和CCl_4模型组（6、12、24 h）同时腹腔注射0.3 mL/kg CCl_4溶液，分别在6、12、24 h进行取材。通过HE染色观察小鼠肝脏的病理变化；普鲁士蓝染色检测肝组织中铁聚集；生化仪检测小鼠血清中AST和ALT水平；试剂盒检测肝匀浆中组织铁含量、氧化应激指标丙二醛（MDA）、谷胱甘肽（GSH）水平；RT-PCR检测铁死亡标志基因长链脂酰辅酶A合成酶4(ACSL4)、前列腺素内过氧化物酶2(PTGS2)和谷胱甘肽过氧化物酶4hepatic arterial buffer response(GPX4)以及铁代谢相关基因铁调素调节蛋白（HJV）、转铁蛋白受体1(TFR1)和膜转铁蛋白（FPN）的表达，Western Blot检测GPX4的蛋白表达水平。计量资料多组间比较采用单因素方差分析，进一步两两比较采用LSD-t检验。结果 在时效研究中，与Control组相比，CCl_4模型组（12、24 h）的肝质量系数和血清ALT、AST水平明显上升（P值均<0.05），且通过HE染色结果也反映出，肝损伤程度随着时间延长逐渐加重。同时，MK-4+CCl_4(6、12、24 h)组和CCl_4模型组（6、12、24 h）相比时，MK-4+CCl_4(12 h)组的肝质量系数和血清ALT、AST水平下降（P值均<0.05），且肝组织的坏死面积减少，因此在后续研究中采用12 h的小鼠各组织样本进行检测。与Control组相比，CCl_4组MDA上升，GSH下降，差异均有统计学意义（P值均<0.05）；与CCl_4组相比，MK-4+CCl_4组MDA下降，GSH上升，差异均有统计学意义（P值均<0.05）。铁死亡关键指标ASCL4、PTGS2，与Control组相比，CCl_4组显著上升，GPX4则显著下降，差异均有统计学意义（P值均<0.05）;MK-4+CClNSC 127716_4组较CCl_4组而言，ASCL4、PTGS2的mRNA水平下降，GPX4的mRNA水平上升，差异均有统计学意义（P值均<0.05）。蛋白质免疫印迹的结果显示，与Control组相比，CCl_4组蛋白表达水平下降，MK-4+CCl_4组较CCl_4组相比，蛋白表达水平上升，差异均有统计学意义（P值均<0.05）。普鲁士蓝染色结果显示：与Control组相比，CCl_4组铁聚集明显上升，MK-4干预后，MK-4+CCl_4组较CCl_4组铁聚集点下降。同时在对小鼠肝脏铁代谢基因的检测中发现，与Control组相比，CCl_4组铁含量显著上升，FPN、HJV的mRNA水平下降，NirmatrelvirTFR1的mRNA水平上升，差异均有统计学意义（P值均<0.05）；进行MK-4进行保护后，铁含量下降，FPN、HJV的mRNA水平上升，TFR1的mRNA水平下降，差异均有统计学意义（P值均<0.05）。结论 MK-4提前干预可减轻CCl_4诱导的小鼠ALI，其机制可能主要是通过抑制铁死亡并改善了小鼠肝脏铁代谢相关基因的表达。

目的 通过生物信息学分析铁死亡通路关键基因在肝癌中的表达、预后价值，及其与免疫微环境的相关性。方法 利用GEPIA在线数据库分析铁死亡通路关键基因在肝癌中的表达；采用cBioPortal在线数据库分析肝癌患者中铁死亡通路关键基因的基因改变情况，Kaplan-Meier生存曲线分析其与肝癌患者预后的关系，采用TIMER数据库及TIDE数据库分析铁死亡通路关键基因与免疫环境的相关性。结果 通过GEPIA数据库发现ACSL4在肝癌组织中的mRNA表达量明显高于正常组织(P<0.05)。cBioPortal数据库分析显示肝癌中铁死亡通路关键基因存在基因改变，主要包括基因扩增、缺失突变、错义突变和框内突变。Kaplan-Meier生存分析显示GPX4的高表达与肝癌患者预后良好相关(PFS:HR=0.68,P=0.014);SLC7A11的高表达与肝癌患者预后差相关(OS:HR=2.RP56976化学结构41,P=5.3e-07; PFHepatitis CS:HR=1.79,P=0.00043)。TIMER数据RepSox供应商库分析显示SLC7A11和Nrf2与B细胞、CD8~+T淋巴细胞、CD4~+T淋巴细胞、中性粒细胞、巨噬细胞和树突状细胞的浸润均呈正相关。结论 铁死亡通路关键基因与肝癌患者的预后、免疫细胞浸润存在显著相关性，是肝癌治疗的潜在靶点，具有重要的临床价值。

脑缺血再灌注损伤(cerebral ischemia-reperfusion injury,CI/RI)是临床治疗面临的重大挑战,是缺血性脑卒中关键的病理过程,其特征在于最初限制大脑的血液供应,随后再灌注复氧,导致脑组织严重受genetic swamping损。星形胶质细胞作为脑组织中数量最多的细胞,在CI/RI中对神经元具有重要的调控和保护作用。激活素A(activin A,ActA)是TGF-β超家族的成员,广泛表达在多种组织中,在增殖、分化、凋亡和炎症中发挥重要的生理作用。ActA主要通过Smads通路及非Smad依赖性途径如丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)参与调控。MAPK信号级联反应在神经系统的形成、神经退行性疾病以及大脑的疼痛和炎症反应发挥重要作用。铁死亡是一种新发现的铁离子依赖性的细胞死亡形式。近年研究显示,铁死亡在神经退行性疾病、脑卒中等疾病的病理生理过程中发挥重要的作用。研究表明,CI/RI过程中神经元会发生铁死亡进而加剧损伤,而ActA对缺血性脑卒中神经元起保护作用,但对星形胶质细胞的影响知之甚少。综上,本研究拟探讨ActA对糖氧剥夺/复氧(oxygen Glucose Deprivation,OGD/R)星形胶质细胞的作用和机制,为进一步探索治疗CI/RI的新手段提供新思路。目的:探讨ActA对糖氧剥夺/复氧(OGD/R)星形胶质细胞的作用和分子机制。方法:1.取24h内新生C57BL/6小鼠大脑皮质分离培养,纯化原代星形胶质细胞,GFAP免疫荧光染色鉴定。2.CCK8检测OGD 2h、4h、6h和OGD/R 6h、12h、24h、48h星形胶质细胞的活力。3.Mito-Tracker Red CMXRos染色、ROS试剂盒、脂质氧化试剂盒、铁离子试剂盒以及Western Blot检测对照组、OGD/R组及OGD/R+ActA组的线粒体活性、铁死亡相关指标以及铁死亡相关蛋白表达水平的变化。4.Western Blot检测对照组、OGD/R组及OGD/R+ActA组MAPK信号通路相关蛋白表达水平的变化。5.Mito-Tracker Red CMXRos染色、ROS试剂盒、脂质氧化试剂盒、铁离子试剂盒以及Western Blot检测对照组、OGD/R组、OGD/R+ActA组、OGD/R+MAPK抑制剂、OGD/R+MAPK抑制剂+ActA组的线粒体活性、铁死亡相关指标以及铁死亡相关蛋白表达水平。结果:1.GFAP免疫荧光检测纯度大于95%。2.CCK8结果显示,与对照组相比,OGD 6h组细胞存活率下降至55.6%(v.s con,P<0.01),OGD 6h/R 24h组细胞存活率下降至46.8%(v.s con,P<0.01)而OGD 6h/R 48h组细胞存活率下降至27.3%(v.s con,P<0.01)。给予20 ng/m L ActA各个时间点与对照组相比细胞的存活率均有显著差异(P<0.01)。因此,本实验选择OGD6h/R 24h给予20 ng/m L ActA进行后续的研究。3.星形胶质细胞在OGD 6h/R 24h时线粒体活性显著下降,ROS、MDA及Fe~(2+)生成显著增多,加入ActA可见线粒体活性改善,ROS、MDA及Fe~(2+)生成显著降低。4.Western Blot结果显示,OGD 6h/R 24h组FPN1及GPX4表达水平降低,TF及TFR表达量升高,给予ActA后FPN1及GPX4表达水平显著增加,TF及TFR表达量显著下降。JNK、P-JNK、P38及P-P38表达水平显著升高,而ERK及P-ERK表达量降低,给予ActA后均显著降低。5.加JNK或P38抑制剂组相比OGD/R组线粒体活性均显著升高,ROS、MBYL719DA及Fe~(2+)生成显著减少;在同时给予ActA及JNK/P38抑制剂时,线粒体活性显著增加、ROS、MDA及Fe~(2+)生成显著减少。6.Western Blot检测显示,加JNK/P38抑制剂组相比OGD/R组GPX4表达增加,TF、TFR表达均显著下降,FPN1表达无显著变化;同时给予ActA和JNK/P38抑制剂时,与ActA组和JNK/P38抑制剂组相比,GPX4表达显著升高,TF和TFR表达显著降低。结论PR-171临床试验:1.ActA能抑制OGD/R诱导的星形胶质细胞铁死亡,减轻OGD/R时星形胶质细胞的损伤;2.ActA可能通过抑制MAPK通路中JNK及P38的表达,从而促进GPX4的表达、抑制TF及TFR的表达抑制铁死亡,发挥对星形胶质细胞OGD/R损伤的保护作用。

【背景】禾谷镰孢（Fusarium graminearum）是引起小麦赤霉病（Fusarium head blight）的主要病原真菌，侵染后导致作物品质和产量下降，同时产生多种真菌毒素，严重危害粮needle biopsy sample食生产和人类健康。氧酰基载体蛋白还原酶（3-oxoacyl ACP reductaseApoptosis抑制剂,OAR1）催化羧酰基载体蛋白还原成氧酰基载体蛋白，在脂肪酸的生物合成过程中具有重要作用。【目的】构建FgOAR1基因缺失突变体，研究其表型、显微结构、孢子产量、有性生殖和致病力等的变化，探究FgOAR1的生物学功能，揭示其对禾谷镰孢生长、发育和致病的影响，为新型抑菌作用靶点的筛选及小麦赤霉病的防控提供科学依据。【方法】以禾谷镰孢野生型菌株PH-1为材料，应用Split-Marker基因敲除技术，构建FgOAR1基因缺失突变体（ΔFgOAR1),Gap-repair技术获得缺失基因的回补突变体（ΔFgOAR1-C）；将PH-1、ΔFgOAR1和ΔFgOAR1-C菌株分别接种到常规培养基，观察菌落表型变化并测定脂肪酸含量差异；接种到含刚果红（Congo-Red）、SDS、NaCl和H_2O_2的压力筛选培养基中，观察菌丝在压力培养条件下的生长状况；接种CMC培养基，比较分生孢子产量差异；接种胡萝卜培养基，观察有性生殖及孢子性状；分别进行小麦胚芽鞘和穗部接种，统计发病率和毒素产量，比较突变体与野生型菌株的致病力差异。【结果】与野生型PH-1菌株相比，在PDAEGFR抑制剂、YEG和CM培养基中ΔFgOAR1突变体未呈现明显表型变化，在0.7 mol·L~(-1) NaCl、0.03%H_2O_2、0.01%SDS和300μg·m L~(-1)Congo-Red等压力培养条件下，突变体菌落直径显著低于野生型PH-1，表明FgOAR1与禾谷镰孢细胞膜和细胞壁的合成相关；ΔFgOAR1突变体在液体培养基中的分生孢子产量（8.1×10~5个/mL）显著低于PH-1(1.26×10~6个/mL），接种小麦胚芽鞘和麦穗后，ΔFgOAR1突变体的致病力显著低于野生型菌株PH-1。【结论】禾谷镰孢中FgOAR1参与脂肪酸的生物合成，对细胞膜合成具有重要作用，该基因缺失导致突变体抗逆性降低，分生孢子产量下降，且致病力显著降低，FgOAR1对禾谷镰孢的生长、发育和致病具有重要作用。