PI3K抑制剂

表面增强拉曼散射(SERS)探针光谱信号灵敏度极高(增强因子可达10~6–10~(14))且具有指纹特征,理论上可同时区分高达10–100个特征拉曼波段,从而能够实现对生物样品的高对比度成像,已被广泛应用于生物成像领域。纤维素纳米晶(CNC)是自然界中最微小的纤维素物理结构单元,其独特棒状形态、超精细模板结构和良好可修饰性使其成为一种理想的构筑一维SERS探Tethered bilayer lipid membranes针的基底。本文以CNC为模板,通过金巯(Au-S)键负载不同尺寸的金纳米颗粒,构筑了不同表面性质和结构的一维有机-无机纳米复合SERS探针,探究了其构建策略、SERS增强效应、分散稳定性、生物相容性和SERS生物成像性能。具体研究内容如下:(1)阳离子型CNC基一维SERS探针的构筑及其分散稳定性和生物相容性。以羧基化纤维素纳米晶(CNC-COOH)为多功能载体,利用C2/C3羟基活性位点引入季铵基团增强电荷排斥作用,同时利用C6羧基活性位点引入巯基基团,并进一步通过Au–S键组装负载Au NPs成功构建了具有一维固定“热点”结构的纳米SERS探针。由于阳离子季铵基团的引入,改性后的CNC的Zeta电位达到+50.3 m V,在VX-661体内实验剂量电荷排斥作用下,SERS探针即使在200 m M的高浓度盐溶液中依然表现出优异的水分散稳定性。以罗丹明6G作为拉曼报告分子,SERS探针可在低至5×10~(-6)g/L浓度下显示可识别特征拉曼信号。与金胶体溶液聚集形成的可变“热点”相比,CNC基SERS探针由于固定“热点”结构的存在,光谱信号稳定性和再现性极大提高。但由于表面正电荷特性,SERS探针呈现较高的细胞毒性未能成功用于细胞成像。(2)核壳型CNC基一维SERS探针的构筑及其细胞成像性能。以磺酸基纤维素纳米晶(CNC-SO_3H)为多功能载体,连续通过Na IO_4氧化和席夫碱反应在C2/C3位点引NSC 125973入巯基官能团,利用Au–S键组装负载Au NPs构建了一维“热点”结构,并进一步在其表面修饰Si O_2保护壳层提高SERS探针的生物相容性。由于在CNC-SH@Au NPs表面包覆了二氧化硅层,能够避免探针之间因发生相互作用而出现的团聚现象。结果表明,Si O_2@CNC-SH@Au NPs即使在0.1 M高浓PBS环境下放置长时间的吸收光谱未出现变化。用4-巯基苯甲酸作为拉曼信号分子,在10~(-6)M低浓度的条件下也能产生增强的拉曼信号,在0.1 M PBS溶液中随时间变化的SERS光谱也稳定不变。惰性的二氧化硅壳层可将CNC-SH@Au NPs与外源性物质隔绝,提高探针的稳定性和生物相容性,减少了纳米粒子之间与外界环境的之间的干扰,防止了拉曼报告分子解吸附。将合成核壳结构的SERS探针用于He La细胞中,在1580 cm~(-1)通道中成功实现了活细胞中的SERS成像。(3)聚乙二醇接枝型CNC基一维SERS探针的构筑及细胞成像性能。以磺酸基纤维素纳米晶(CNC-SO_3H)为多功能载体,连续通过Na IO_4氧化和席夫碱反应在C2/C3羟基活性位点选择性引入聚乙二醇(PEG)和巯基基团,利用Au-S键组装负载Au NPs构建一维“热点”结构,并进一步在其表面修饰甲氧基聚乙二醇巯基(m PEG-SH)提高SERS探针的稳定性和生物相容性。实验结果表明,由于PEG的修饰,CNC-PEG-SH在400 m M的Na Cl溶液中能表现出优异的分散性。以4-巯基苯甲酸作为拉曼信号分子,在10~(-6)M浓度下依然能显示特征的拉曼信号峰,并且在0.1 M PBS中随时间变化的SERS信号表现出良好的灵敏度和信号重复性。进一步在CNC-PEG-SH@Au NPs表面引入m PEG-SH,其细胞毒性相较于未修饰前显著降低,细胞活力维持在高达87%以上。m PEG-SH能有效置换金纳米颗粒的表面活性剂,探针的生物相容性得到改善。将合成的SERS探针用于He La细胞中,成功实现1075 cm~(-1)和1580 cm~(-1)双通道细胞SERS成像。

目的：探讨加味苇茎汤对RAW264.7巨噬细胞焦亡模型干预作用，及对半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-1（Caspase-1）/消皮素D（GSDMD）焦亡通路的影响。方法：采用脂多糖（LPS）刺激RA寻找更多W264.7细胞模拟巨噬细胞焦亡模型。空白组给予空白血清，干预组分别给予不同体积分数的加味苇茎汤含药血清，24 h后，细胞活力检测试剂盒法（CCK-8）检测LPS对RAW264.7细胞增殖活性的影响和不同浓度含药血清对细胞活力的影响，扫描电镜观察各组细胞的焦亡情况，predictive toxicology相差显微镜观察各组细胞形态，实时荧光定量聚合酶链式反应（RT-PCR）和蛋白免疫印迹法(Western blot)检测各组细胞中核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)、Caspase-1、GSDMD 的mRNA和蛋白的表达情况，酶联免疫吸附测定法（Elisa）检测各组细胞中白介素-18(IL-18)和IL-1β的表达情况。结果：电镜观察RAW264.7细胞，空白组细胞形态和结构最好，与空白组比较，模型组细胞明显焦亡，部分细胞内容物释放至胞外；与模型组比较，各干预组细胞焦亡状态均有不同程度减轻，其中高剂量组最接近空白组。光镜观察各组细胞形态，空白组细胞基本呈圆形，与空白组比较，模型组细胞形态不规则，大部分长触角，与模型组比较，各干预组形态均有改善，其中高剂量组最接近空白组。与空白组比较，模型组NLRP3、Caspase-1、GSDMD的mRNA和蛋白的表达升高(P＜0.05)，与模型组比较，各干预组中上述指标的表达有不同程度的降低(P＜0.05)。与空白组比较，模型组细胞IL-18、IL-Lapatinib溶解度1β的表达升高(P＜0.05)；与模型组比较，高、中剂量组细胞IL-18、IL-1β的表达降低(P＜0.01)。结论：加味苇茎汤可能通过下调Caspase-1/GSDMD通路抑制巨噬细胞焦亡，减少炎症因子的释放，发挥治疗NASH的作用。

背景和研究目的:帕金森病(PD)是最常见的神经退行性疾病之一,随着社会老龄化加剧,PD患病率在全球呈现显著增高态势。然而,目前仍然没有药物能够有效地lung infection阻止和减缓PD的发展,因此拓宽PD药物谱具有重要意义。胰高血糖素样肽-1(GLP-1),作为肠促胰岛素的一种,被普遍认为是治疗神经退行性疾病的一个重要靶点。但由于其进入血液循环后可被广泛存在的二肽基肽酶-IV(DPP-IV)快速降解,半衰期仅为1～2分钟,因此其治疗潜力受限。尽管目前研制出GLP-1类似物以克服这一缺陷,但需要长期注射和高昂的价格使得患者的经济负担和生活质量受到了严重影响。随着基因编辑技术在医药领域的应用,工程细菌被广泛应用于治疗疾病,为解决该问题提供了新的思路。基于此,本研究构建了一株可以持续表达GLP-1的酪酸梭菌(C.butyricum),旨在探究C.butyricum-p MTL007-GLP-1工程菌对1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(MPTP)诱导的PD模型小鼠的影响及作用机制,为PD提供了一种可替代的治疗方式。方法:1、C.butyricum-p MTL007-GLP-1工程菌株的构建:先将GLP-1基因整合到p MTL007质粒,再将重组质粒p MTL007-GLP-1接合转入C.butyricum宿主菌基因组中,构建基因组整合型C.butyricum-p MTL007-GLP-1工程菌。2、C.butyricum-p MTL007-GLP-1工程菌株的体外功能验证:通过ELISA检测C.butyricum-p MTL007-GLP-1的GLP-1分泌量。通过生长曲线、耐酸实验和耐胆盐实验评价工程菌的益生特性。3、PD小鼠模型的建立和治疗:取40只8周龄C57BL/6雄鼠,随机分为对照组(C组)、模型组(M组)、模型组+C.butyricum(CB组)、模型组+利拉鲁肽组(L组)、模型组+C.butyricum-p MTL07-GLP-1组(CBG组),每组8只。C组连续灌胃明胶生理盐水14 d。除C组外,其余小鼠连续7 d腹腔注射20 mg/kg MPTP构建PD小鼠模型。造模成功后,M组每天灌胃明胶生理盐水100μL;L组每天腹腔注射利拉鲁肽0.4 mg/kg;CB组每天灌胃10~8 CFU/m L C.butyricum 100μL;CBG组每天灌胃10~8 CFU/m L C.butyricum-p MTL007-GLP-1 100μL,PUN30119临床试验共七天。4、机制分析:通过行为学方法进行小鼠运动能力评估。通过免疫组织化学和超微结构形态学检测小鼠组织病理改变。通过Western-blot检测小鼠PD相关蛋白、线粒体自噬通路相关蛋白和肠道屏障蛋白(ZO-1、Occludin)表达。通过高通量测序观察工程菌对小鼠肠道菌群的影响。通过试剂盒检测小鼠黑质和血清中氧化应激的水平。结果:1、C.butyricum-p MTL007-GLP-1具有良好的体外益生性质:(1)ELISA结果显示C.butyricum-p MTL007-GLP-1的GLP-1的表达量为97.97 pg/m L(300 m L体系);(2)生长曲线实验显示C.butyricum-p MTL007-GLP-1跟C.but3-MA IC50yricum的生长特性无明显差异;(3)耐酸、耐胆盐实验显示C.butyricum-p MTL007-GLP-1在p H值为3至7范围内均能保持活菌数高于10~6 CFU/m L;在0.5%胆盐条件下,活菌数仍保持在10~7 CFU/m L以上,这表明C.butyricum-p MTL007-GLP-1具有良好的耐酸、耐胆盐能力。2、C.butyricum-p MTL007-GLP-1对PD的影响:(1)C.butyricum-p MTL007-GLP-1可以改善PD小鼠的运动协调和探索能力(P<0.01);(2)C.butyricum-p MTL007-GLP-1可以上调PD特征蛋白TH和DAT的表达,下调α-syn的表达(P<0.01);(3)C.butyricum-p MTL007-GLP-1可以促进线粒体自噬信号通路蛋白Beclin-1、PINK1、Parkin、Atg7、LC3B II和LAMP-1的表达(P<0.01)和抑制p62表达(P<0.05),来消除异常的线粒体;(4)C.butyricum-p MTL007-GLP-1可以恢复PD小鼠血清和脑组织中GSH-Px和SOD的活性(P<0.01),抑制MDA的活性(P<0.01);(5)C.butyricum-p MTL007-GLP-1使PD小鼠的肠道菌群多样性和丰度增加,并降低了PD相关的双歧杆菌(Bifidobacterium)相对丰度(P<0.05);此外,C.butyricum-p MTL007-GLP-1可以增加肠道屏障蛋白(ZO-1,Occludin)的表达(P<0.01)。结论:在本研究中,我们成功地构建了可以持续表达GLP-1的C.butyricum,即C.butyricum-p MTL007-GLP-1,体外实验表明工程菌具备良好的耐酸耐胆盐能力,这保证了它们在宿主胃肠内的存活。在动物实验中,C.butyricum-p MTL007-GLP-1可以改善PD的运动功能障碍和神经病理学变化,这一神经保护作用可能是通过促进PINK1/Parkin介导的线粒体自噬和减弱氧化应激所介导。此外,C.butyricum-p MTL007-GLP-1给药可以增加PD小鼠肠道菌群多样性以维持肠道屏障功能。

鸭肉是我国三大肉类之一,具有较高的营养价值。酱卤肉制品是我国典型的传统肉制品,因色泽诱人、味道浓郁深受消费者喜爱,常采用常压高温卤制,也使用定量卤制或超声辅助等卤制技术提升品质。真空低温烹饪(SVC)技术利用真空条件隔绝环境氧,在较为温和可控的温度(50～90℃)条件下完成烹饪操作,使产品细嫩多汁、减少微生物污染。SVC技术相关研究主要集中在牛肉、猪肉、羊肉、鸡肉、鱼肉等,对鸭肉的研究相对较少。随着预制菜的兴起和即食产品的出现与推广,餐饮烹饪品质形成机理亟待深入挖掘,基于现代食品分析方法和食品工业加工技术融合将会推动食品产业发展。本研究以鸭肉为原料,采用典型酱卤肉配方进行SVC卤制加工卤鸭,利用模糊数学感官评价法结合正交试验优化SVC卤鸭加工工艺,分析SVC技术对卤鸭风味及贮藏过程中的品质特性变化,探讨SVC条件对鸭肉肌原纤维蛋白(MP)凝胶特性的影响,为SVC卤鸭加工生产和贮藏运输过程中的品质调控提供科学理论指导。主要研究内容和结果如下:(1)以卤制温度(60～80℃)、卤制时间(30～150 min)、料液比(1:0.5～1:2.5)为单因素,采用模糊数学感官评价法结合正交试验优化SVC卤鸭加工工艺。结果表明,鸭肉SVC卤制技术的影响因素顺序为:卤制温度>卤制时间>料液比,最佳SVC卤制条件为:卤制温度70℃、卤制时间105 min、料液比1:1.75;该SVC卤鸭感官评分为89.03分、出品率为69.52%、L*值为65.04、a*值为5.88、b*值为15.76、硬度为1092.28 g、胶黏性为603.86、咀嚼性为425.18、弹性为0.697 mm、剪切力为6.13 N。此工艺下的SVC卤鸭色泽均匀一致、光泽亮丽,香气馥郁、卤味丰富,肉质嫩弹有嚼劲。(2)以常压高温短时卤制作为对照组,运用电子鼻和气相色谱-质谱联用技术(GC-MS)等分析不同卤制温度(60～80℃)对SVC卤鸭风味品质的影响。结果表明,不同卤制温度的SVC卤鸭的电子鼻响应信号值差异显著(P<0.05),可以较好实现不同卤制温度的SVC卤鸭风味差异分析;不同卤制温度的SVC卤selleck NMR鸭共检出16种游离氨基酸,总含量在234.97～270.60 mg/100 g之间,呈先上Autoimmune recurrence升后下降的趋势(P<0.05),且显著高于对照组(P<0.05),70℃的SVC卤鸭总游离氨基酸含量达到最大值;不同卤制温度的SVC卤鸭共检出6种核苷酸及降解产物,其中风味核苷酸含量在32.88～41.08 mg/100 g之间,整体呈先上升后下降的趋势(P<0.05),70℃的SVC卤鸭风味核苷酸含量达到最大值;不同卤制温度的SVC卤鸭共检出7种游离脂肪酸,其中饱和脂肪酸(SFA)含量呈先下降后上升的趋势,但都低于对照组,不饱和脂肪酸(UFA)含量呈先上升后下降的趋势,但都高于对照组,C16:0、C18:1、C18:0占总脂肪酸的75%以上,对SVC卤鸭的风味具有重要贡献;不同卤制温度的SVC卤鸭分别检测出75种、73种、81种、78种、80种挥发性风味物质,70℃的SVC卤鸭挥发性风味物质种类最多,以醛类化合物(主要是正壬醛、selleckchem正己醛、1-辛醛、正庚醛、十六醛)和醇类化合物(主要是芳樟醇、桉叶油醇、正辛醇、1-辛烯-3醇、(-)-4-萜品醇、α-松油醇)为主要特征挥发性风味物质,占比为80.18%,其中醛类物质占比高达52.58%,对卤鸭整体香气起主导作用。综上,SVC技术能够促进游离氨基酸的释放以及抑制UFA的氧化降解。其中,70℃的SVC卤鸭滋味物质与风味物质最为丰富。(3)以不包装沸水煮制凝胶作为对照组,分析不同SVC温度(60～80℃)对鸭肉MP凝胶特性的影响,探讨其品质形成机理。结果表明,SVC鸭肉MP凝胶的白度值、保水性、化学作用力显著高于对照组(P<0.05);随着SVC温度的升高,鸭肉MP凝胶的保水性、硬度、咀嚼性、胶黏性、弹性呈先上升后下降的趋势,均于SVC温度70℃达到最大值;随着SVC温度的升高,鸭肉MP凝胶的蒸煮损失率逐渐上升,但都显著低于对照组(P<0.05),化学作用力逐渐下降,凝胶孔径逐渐变小,网状结构变得更加清晰、有规则,α-螺旋和β-转角含量逐渐下降,β-折叠含量逐渐上升。综上,SVC技术能够提高鸭肉MP凝胶性能,从而改善卤鸭的品质。(4)以常压高温短时卤制作为对照组,在4℃冷藏条件下,探究SVC卤鸭贮藏过程中理化指标和微生物指标的变化规律。结果表明,贮藏10 d内,SVC卤鸭的水分含量及pH呈先下降后上升的趋势(P<0.05);L*值逐渐减小,a*值、b*值逐渐增大,其中b*值变化不显著(P>0.05);硬度、咀嚼性、胶黏性先上升后下降,弹性变化不显著(P>0.05);TVB-N值、羰基含量逐渐增大,巯基含量、感官评分逐渐下降,但试验组整体变化趋势缓慢;菌落总数显著增加(P<0.05),对照组在第8 d超过限量标准,而试验组第10 d才接近标准限值。综上,SVC技术有助于延长冷藏条件下的卤鸭保质期。

目的 探讨彩超引导下经皮腔内高压球囊扩张血管成形术治疗自体动静脉内瘘狭窄的安全性及效果。方法 18例动静脉内瘘狭窄患者,均应用彩超引导下经皮腔内高压球囊扩张血管成形术治疗,观察手术情况、术后随访情况,比较手术前后血管情况。结果 18例患者手术均成功,手术成功率为100.0%。术后所有患者均未见血管出血、破裂及血栓等并发症发生。术后,狭窄处内径(4.37±0.58)mm、透析血流量(251.37±18.29)ml/min大于术前的(2.01±NSC 127716试剂0.56)mm、(182.24±15.19)ml/min,狭窄处峰值流速(210.67±30.45)cm/s慢于术前的(490.50±44.31)cm/s,差异有统计selleck化学学意义(P<0.05)。术后随访12个月,患者半年内再干预率为5.6%(1/18), 1年内再干预率为22.2%(4/heritable genetics18), 1年通畅率为72.2%(13/18)。结论 彩超引导下经皮腔内高压球囊扩张血管成形术治疗自体动静脉内瘘狭窄简便易行,安全性高,疗效确切,具有良好的应用价值。

目的:基于美国食品和药品管理局不良反应报告系统(FAERS)的数据，挖掘核苷(酸)类似物(NAs)相关各种肌肉骨骼及结缔组织疾病事件信号，为临床合理用药提供参考。方法:下载并清洗2017年第一季度至2022年第三季度FAERS数据，提取NAs相关各种肌肉骨骼及结缔组织疾病事件，采用报告比值比法(ROR)和综合标准法(MHRA)检测信号。结果:共提取到NAs相关的各种肌肉骨骼及结缔组织疾病不良事件(ADEs)22 416条，其中富马酸替诺福韦二吡呋酯(TDF)21 068条、阿德福韦酯(ADV)626条、拉米夫定(LAM)426条、恩替卡Sexually explicit media韦(ETV)127条以及富马酸丙酚替诺福韦(TAF)169条，检测出的信号数分别为TDF34个、ADV22个、LAM13个、ETV2个和TAF2个。在高位组语层面，TDF、ADV、LAM、TAF的信号主要分布在骨骼类疾病(不MDV3100体内包括先天性疾病及骨折),分别为97.33%、67.08%、72.73%和JQ1半抑制浓度78.57%。ETV的信号主要分布在肌肉类疾病，为86.96%。且TDF、ADV、LAM的信号以骨质疏松、骨软化等代谢性骨病为主，而TAF和ETV的信号则不涉及代谢性骨病。结论:NAs相关各种肌肉骨骼及结缔组织疾病风险信号在药品之间可能存在差别，应重视TDF、ADV及LAM引起骨骼类疾病的风险，加强临床用药监测，对存在骨骼类疾病高风险患者建议优选ETV和TAF。

肿瘤坏死因子(TNF)SAHA配制相关凋亡诱导配体(TRAIL)是TNF超家族的一员。TRAIL能够通过与受体(TRAILR)结合选择性诱导肿瘤细胞的凋亡,并且几乎不存在全身毒性。因此,在寻找理想的肿瘤治疗药物的过程中,TRAIL迅速引起人们的兴趣。目前已开发出多种针对TRAIL-TRAILR的候选抗肿瘤药物,其中多个重组可溶性TRAIL蛋白药物已进入临床试验阶段。遗憾的是,临床实验中并没有显示出显著的抗肿瘤活性,导致失败的原因,包括耐药性、脱靶毒性、半衰期短等。为了解决这些弊端,研究人员通过生物工程获得更稳定的三聚体形式重组TRAIL,利用纳米材料进行靶向递送,以及利用载体表达TRAIL基因进行基因治疗等,但尚未进一步推动TRAIL的临床应用。TRAIL除了能特异性诱导肿瘤细胞凋亡外,对炎症和自身免疫模型的研究表明,TRAIL可以通过许多不同的方式影响免疫细胞。虽然TRAIL最初被发现是在自然杀伤(NK)细胞或细胞毒性T细胞的肿瘤防御中具有重要作用,但TRAIL对调节性T细胞(Tregs)、效应T细胞、中性粒细胞和抗原提呈细胞的附加作用也成为人们关注的焦点。尽管目前已有一些研究报道了重组TRAIL能够通过诱导Tregs等免疫细胞凋亡影响肿瘤免疫微环境,但其在肿瘤微环境(TME)中潜在的调节作用和机制尚不清楚。研究重组TRAIL在TME中的免疫调节作用和机制可能会提供一个重要的视角去理解重组TRAIL的临床耐药,并有助于探索更有效的肿瘤治疗策略。由于人源TRAILR和鼠源TRAILR存在结构差异,人源TRAIL对鼠源TRAILR的亲和力较弱,为了能够更好的在免疫全能鼠中评价重组TRAIL在肿瘤免疫微环境中的调节作用和机制,本论文首先构建并纯化得到可溶性鼠源TRAIL(sm TRAIL)用于鼠源系统中的评价。在体外,通过细胞杀伤实验确定了鼠乳腺癌细胞4T1为sm TRAIL的敏感细胞系,结直肠癌细胞CT26和黑色素瘤细胞B16为sm TRAIL的非敏感细胞系。以上述三种细胞在免疫全能小鼠中建立肿瘤模型,参考TRAIL临床试验中的治疗浓度,选择0.5 mg/kg、2 mg/kg、8 mg/kg sm TRAIL三种剂量进行治疗。但值得注意的是,肿瘤治疗效果并未呈现剂量依赖,2 mg/kg sm TRAIL治疗组不管是敏感细胞系还是非敏感细胞系中都展现出最好的肿瘤治疗效果;而8 mg/kg sm TRAIL组治疗效果较差甚至表现出促肿瘤生长的作用。通过免疫组化对肿瘤组织内caspase检测可知,不同剂量的sm TRAIL能够诱导4T1细胞的凋亡但诱导CT26和B16细胞的凋亡能力较弱,这说明在肿瘤治疗过程中,除了凋亡作用还存在其它因素(如免疫调节)影响了sm TRAIL在体内的抗肿瘤效应。接下来,我们选择sm TRAIL敏感细胞4T1及非敏感细胞CT26作为研究模型,通过流式细胞术对小鼠肿瘤组织中的免疫细胞进行分析,检测发现:2 mg/kg sm TRAIL可激活先天性免疫细胞和CD8~+T细胞;而8 mg/kg sm TRAIL会抑制NK细胞和CD8~+T细胞的活化,并显著增加M2样巨噬细胞的浸润数量。同时,我们分别对4T1和CT26小鼠肿瘤模型的肿瘤进行转录组测序及单细胞RNA测序,测序得到的结论与流式检测的结果相一致,进一步印证不同剂量sm TRAIL对瘤内的免疫细胞会产生不同的调节作用,进而影响肿瘤生长情况。我们还分别在蛋白水平以及转录水平对两种肿瘤模型瘤内的细胞因子表达进行了检测,结果显示:2mg/kg sm TRAIL可促进IL-12、IFN-γ的表达,8 mg/kg sm TRAIL会使IL-10、VEGF的表达增高。结合免疫细胞浸润和激活结果可知,2 mg/kg sm TRAIL治疗有利于免疫激活,实现肿瘤杀伤;而8 mg/kg sm TRAIL组则促进免疫抑制微环境的生成,抵消sm TRAIL对肿瘤细胞的凋亡作用。随后,我们着重探究了8 mg/kg sm TRAIL治疗引发免疫抑制的机制。首先,通过体内体外实验验证了sm TRAIL对NK细胞的抑制作用,结果发现,NK细胞在sm TRAIL的肿瘤治疗中至关重要,但NK细胞的活化受到抑制并不是sm TRAIL直接作用于NK细胞导致。随后,我们对sm TRAIL对肿瘤细胞的影响进行了探究,结medical demography果显示,sm TRAIL通过TRAIL-TRAILR轴可以诱导肿瘤细胞分泌CCL2,阻断TRAIL-TRAILR轴可以有效控制瘤内CCL2的分泌,并抑制肿瘤相关巨噬细胞(TAMs)的招募,进而使得8 mg/kg sm TRAIL组显著抑制肿瘤的生长。单细胞RNA测序等结果也表明,8 mg/kg sm TRAIL治疗可促进M2样巨噬细胞的募集。此外,我们还发现sm TRAIL对巨噬细胞也会产生直接作用促进M2样巨噬细胞的极化。sm TRAIL与巨噬细胞表面的TRAILR结合后,使得胞内Fox O1表达增多,Fox O1与IL-10启动子结合,促进IL-10的分泌。对8 mg/kg sm TRAIL治疗引发的免疫抑制机制进行总结:sm TRAIL与肿瘤细胞的TRAILR结合后,诱导肿瘤细胞分泌CCL2,CCL2对CCR2~+TAMs进行招募;同时sm TRAIL还可以直接作用于TAMs,促进M2样TAMs的极化以及IL-10的分泌,进一步促进免疫抑制微环境的形成,从而抑制了肿瘤微环境中NK细胞和CD8~+T细胞的激活和功能。最后,我们在免疫系统人源化小鼠模型(HU-HSC-NPG.GM3)中评价了重组可溶性人源TRAIL(sh TRAIL)的抗肿瘤效果及免疫调节作用,结果显示,2mg/kg和8 mg/kg sh TRAIL都能显著抑制人结直肠癌细胞HCT116的生长,而8mg/kg sh TRAIL会使得瘤内Tregs和M2样巨噬细胞的数量增多,导致其与2 mg/kg sh TRAIL治疗组相比没有更好的治疗效果。sh TRAIL在TME中的调节作用与sm TRAIL的作用相似,都是通过增加瘤内的M2样巨噬细胞而产生免疫抑制作用,为解除这种免疫抑制,我们将sh TRAIL与巨噬细胞靶向药物曲贝替丁(trabectedin)进行联合用药。联合治疗组能够显著提升淋巴细胞及激活的CD8~+T细胞的浸润,显著减少瘤内Tregs和M2样巨噬细胞的数量,重塑了肿瘤免疫微环境,增强了瘤内抗肿瘤免疫作用,提升了sh TRAIL的抗肿瘤效果。综上所述,本论文在不同小鼠肿瘤模型中全面地评估了sm TRAIL的抗肿瘤效果以及对瘤内多种免疫细胞的影响,发现sm TRAIL在免疫功能正常的小鼠肿瘤模型中具有与剂量相关的免疫调节作用,并对其在肿瘤微环境中的免疫调节机制进行了探究。同时,在人源化小鼠肿瘤模型中使用sh TRAIL验证了其抗肿瘤效果及其免疫调节作用,并通过联合化药进一步放大抗肿瘤效应及激活机体抗肿瘤免疫。论文关于重组TRAIL在肿瘤微环境中免疫调节机制的探究,为TRAIL的进一步临床应用提供了重要基础和依据,并对TRABLZ945细胞培养IL与化药及免疫治疗药物的联合治疗策略优化具有一定的指导意义。

目的 探讨颞叶内侧癫痫伴抑郁（MTLEWD）病人在静息态功能磁共振成像（rs-fMRI）中功能活动异常的脑区的特点。方法 纳入2021年1—12月在海南医学院第一附属医院神经内科门诊符合国际抗癫痫联盟（ILAE）诊断分类标准的颞叶内侧癫痫病人，根据HAMD评分将病人分为MTLEWD组和颞叶内侧癫痫不伴抑郁组（MTLE组），同时纳入与病人性别、年龄相匹配的对照组。使用GE Discovery MR7503.0T设备根据预先设定参数行磁共振扫描，获取静息态功能磁共振数据。采用SPSS 22.0统计MC3说明书分析软件对一般人口学资料进行分析。基于MATLAB 2018平台采用DPABI软件对磁共振数据进行预处理，使用功能连接密度（FCD）分析指标对三组被试者行ANOVA分析差异有统计学意义的脑区，然后行组间两样本的t检验，根据高斯随机场（GRF）理论满足体素显著性<0.001、连续体素数量≥23，团块显著性<0.05的区域被认为差异有统计学意义。结果 共纳入MTLE组病人20例，MTLEWD组病人21例，对照组25例，三urinary infection组病人一般资料（年龄、性别）差异无统计学意义（P>0.05）。三组的FCD值差异的脑区主要在楔前叶、颞中回、颞下回、左侧小脑cruse1区、左侧小脑cruse2区、左侧小脑7b区AM-2282溶解度、左侧小脑8区、额中回、左侧颞极（颞上回）、颞极（颞中回）等脑区。结论 MTLEWD病人活动异常脑区主要集中在默认网络相关脑区及小脑，上述脑区功能紊乱与病人的抑郁症状相关；使用Rs-fMRI分析方法能够客观地对病人进行功能评价。

目的:探究艾普拉唑钠对消化性溃疡出血患者的治疗效果。方法:按随机数字表法将我院2020年10月—2021年10月收治的86例消化性溃疡出血患者分为两组。对照组(nselleck HPLC=43)予以奥美拉唑钠治疗，研究组(n=43)加用艾普拉唑钠治疗，对比两组临床疗效、症状缓解时间、胃蛋白酶原(PG)[血清蛋白酶血清胃蛋白酶原Ⅰ(PGⅠ)、胃蛋白酶原Ⅱ(PGⅡGSK J4分子量)、PGⅠ/PGⅡ比值(PGR)]及胃泌素[胃泌素-17(G-17)]、止血成功率、再出血率和不良反应。结果:研究组治疗后临床疗效、止血成功率均高于对照组，再出血率低于对照组，症状缓解时间短于biomass additives对照组，研究组治疗后PGⅠ、PGⅡ、G-17水平低于对照组，研究组治疗后PGR水平高于对照组(P<0.05);两组不良反应对比，无统计学差异(P>0.05)。结论:艾普拉唑钠治疗消化性溃疡出血患者疗效显著，可有效改善PG及G-17水平，患者预后良好，安全可靠，值得临床推广应用。

目的 探讨瓜石汤联合丹参片治疗玫瑰痤疮的疗效及安全性。方法 选取2021年6月-2023年6月期间在庆阳市中医医院收治的Tamoxifen溶解度辩证属阴虚内热兼血瘀的玫瑰痤疮患者90例，按治疗方案的不同分为对照组和观察组，各45例。对照组给予常规药物治疗（外用甲硝唑凝胶+口服多西环素胶囊），研究组在常规用药的基础上给予瓜石汤联合丹参片治疗，均治疗8周。观察两组患者的治疗有效率、主观和客观症状评分、皮肤屏障功能评分、玫瑰痤疮生活质量量表（RosaQoL）评分及不良反应发生情况。结果 研究组治疗总有效率为93.33%，整体疗效显著优于对照组（P <0.05）；治疗后，两组主观症状总分和各客观皮损症状（潮红、红斑、毛细血管扩张、丘疹脓疱）评分均显著降低，且研究组的主观症状总分和各客观皮损症状评分均低于对照组（P <0.05）；治疗后，两组的经皮水分流失量(TEWL)均显著降低，角质层含水量显著升高（P <0.05）；治疗后研究组的TEWL低于对照组，角质层含水量高于对照组（P <0.05）；治疗后，两组RosaQoL的各维度得分及总分均显著降低，且研GSK J4价格究组的RosaQoL各维度得分及总分均低于对照组（P <0.05）；两组不良反应无显著性差异（P> 0.05）。结论 瓜石汤联合丹参片治疗属阴虚内热兼血瘀的玫瑰痤疮疗效佳，可明Mediterranean and middle-eastern cuisine显缓解患者的症状和改善皮肤状态，并提高生活质量，安全性高。