PI3K抑制剂

目的：探究予颅脑损伤患者自拟中药剂进行口腔护理对其口腔异味的治疗效果。方法：选取2021年6月至2022年2月我院颅脑外科住院的颅脑损伤患者80例为研究对象Nirmatrelvir体外，随机分为中药组和对照组，每组各40例。中药组患者予我院内自制中selleck化学药口腔护理液进行口腔护理，对照组仅予生理盐水进行口腔护理，通过观察患者的口腔状况，对比两组不同护理方法的临床疗效。结果：中药组患者疗效优于对照组（P<0.05）。中药组患者口腔异味及口腔溃疡发生率低于对照组（P<0.05）。护理后中药组患者牙菌斑指数评分低于对照组（P<0.05）。中药组患者口腔菌数少于对照组（P<0.05）。结论：我院自拟的中药剂对颅脑损伤患者口腔护理的效果明显，可有效减少患者口腔异味及口腔溃Autoimmune vasculopathy疡的发生，并可有效抑制细菌、预防口腔感染，值得进一步研究和推广。

目的：探讨糖尿病肾病(DKD)易感性与过氧化物酶体增殖物激活受体γ辅助激活因子(PGC)-1α基因SNP位点rs8192678的相关性。方法：招募200例糖尿病(DM)患者，无肾脏病损伤，200例DKD患者。利用DNA提取试剂盒提取患者外周血DNA,应用TaqMan-MGB探针法对SNP rs8192678Belumosudil进行基因分型，分析PGC-1α基因rs8192678(G>A)等位基因分布，并评估其与DKD易感性的相关性。利用实时定量PCR检测DM患者和DKD患者血液PGC-1α mRNA表达与rs8192678基因多态性之间的关系。观察不同中医证型DKD患者rs8192678等位基因及基因型频率分布。结果：PGC-1α基因rs8192678基因型GG在DM中比例较DKD更少见(47.5%比72.5%,P<0.001)。在三个遗传模型(加性、显性和隐性)中，在年龄和性别校正后，GG基因型与较高的DKD风险相关(P=0.000)。在DM组和DKD组全血中，AA基因型患者PGC-1α mRNA水平显著高于GG基因型(P<0.01)。PGC1-α基因rs8192678位点的等位基因中，G等位基因频率在所有DKD证型中均较A等位基因频率高。DKD患者中医证候由阴虚燥热证逐渐转向阴阳两虚证过程中，患者GG表达占比逐渐增多。结论：rs8192678的风险相关G等位基因与DKD相关，G等位基Genetic compensation因Galunisertib生产商增加了DKD风险，且DKD患者中医证候分型与PGC1-α基因rs8192678多态性位点有内在关系。

目的 为了初步探索十溴二苯乙烷[1,2-Bis(2,3,4,5,6-pentabromophenyl)ethane, DBDPE]对人体的不良效应，以人源甲状腺滤泡上皮细胞系Nthy-ori3-1为研究对象，观察其甲状腺毒性及机制，为其风险评估提供科学依据。方法 用不同浓度的DBDPE染毒Nthy-ori3-1细胞24 h,通过MTT和CFSE法分别检测细胞KPT-330活力和细胞增殖能力，通过Western blot检测甲状腺激素合成关键蛋白甲状腺球蛋白(thyroglobulin, TG)、甲状腺过氧化物酶(thyroid peroxidase, TPO)、钠碘共转运体(sodium-iodine cotransporter, NIS)和调控蛋白同源盒蛋白8(paired box gene 8, PAX8)、甲状腺转录因子1(thyroid transcription factor1, TTF1)和甲状腺转录因子2(thyroid transcription factor2, TTF2)表达变化。结果 2和20 mg/L DBDPE使细胞活力降低(F=2.59,F=11.43,P<0.05),细胞增殖能力无明显变化。20 mg/L DBDPE使TPO蛋白表达降低(F=2.52,Oncology Care ModelP<0.05),2和20 mg/L DBDPE使NIS蛋白表达降低(F=3.78,F=11.34,P<0.05)。进一步检测了控制关键蛋白合成的调控蛋白PAX8、TTF1和TTF2表达情况，结果显示2 mg/L DBDPE使PAX8蛋白表达降低(F=3.78,P<0.05),2和20ZD1839抑制剂 mg/L DBDPE使TTF1蛋白表达降低(F=7.12,F=3.13,P<0.05),20 mg/L DBDPE使TTF2蛋白表达降低(F=4.05,P<0.05)。结论 DBDPE能够抑制甲状腺激素合成过程，对人体可能具有甲状腺毒性风险。

玉米(Zea mays ssp.mays L.)是中国第一大农作物,在现代玉米育种过程中,以20世纪上半叶单交种玉米育种技术的发展为标志,玉米产量增加了7倍以上,而株型及耐密性改良是玉米产量大幅提升的重要原因。由于遗传调控和农艺性状互作的复杂性,在现代玉米育种中,系统地识别关键农艺性状及其相Bio-based production关的基因组变化仍然是一个巨大的挑战,大多数农艺性状往往受大量的小效应数量性状基因座控制。而目前大多数研究是针对于玉米基因组层面的遗传选择规律和关键调控基因挖掘,对于玉米现代育种过程中表达调控变异及关键调控基因的挖掘还不够系统和深入。所以为了更好的研究现代玉米育种过程中重要农艺性状的遗传基础,挖掘调控表型变异的关键调控基因以及优异单倍型,本研究收集了代表中国不同育种时期的137份自交系(CN1960&70s、CN1980&90s和CN2000&10s),对其进行了重要农艺性状表型数据的收集,系统分析了现代玉米育种过程中的性状改良规律;对幼苗、叶片和雌穗三个不同组织进行转录组测序分析,鉴定表达基因在不同的历史育种年代的表达变化模式。结合WGCNA方法,鉴定调控重要性状的关键基因并构建共表达调控网络;通过eQTL和sQTL关联分析、相关系数和群体遗传学分析,挖掘在现代玉米育种过程中受到选择并有助于各种农艺性状遗传改良的关键候选基因。本研究主要得到以下重要研究结果:1.对137份中国玉米自交系的9个玉米产量相关的形态学性状的表型数据统计分析发现,结果表明在中国现代玉米育种过程中有四类产量相关性状(穗重、粒长、百粒重和籽粒容重)受到了显著选择。2.对137份中国玉米自交系的3个不同组织或发育阶段(幼苗、叶片和雌穗)的表达基因进行基因聚类分析,结果显示鉴定到四组在不同育种年代中表达模式变化趋势不同的表达基因(基因表达连续增加、表达呈波动性增加,CN2000&10s中表达高于CN1960&70s、基因表达连续降低、表达呈波动性降低,CN2000&10s中表达低于CN1960&70s)。基因富集分析发现不同组织的表达变化基因表现出组织特异性。这些基因可能在幼苗、叶片和雌穗相关性状的育种改良过程中发挥重要作用。3.通过对20个不同株型和产量相关性状的表型和转录组数据进行WGCNA分析,鉴定到一些与重要农艺性状相关的关键调控基因,其中包括已知功能调控基因,还鉴定到与玉米花序发育、叶夹角和叶片发育、茎发育和株高、光形态建成和光合作用以及雌穗发育的新候选调控基因。4.利用137份玉米自交系的转录组数据和结构变异图谱进行eQTL分析,在幼苗、叶片和雌穗中分别鉴定到12,920、10,624和7091个cis-eQTLs,分别调控8181、6919和6117个基因的表达变化。将调控cis-eQTLs的基因与表达连续增加或降低的基因进行重叠分析,在幼苗、叶片和雌穗中分别检测到669、352和406个受cis-eQTLs调控的适应高密度种植的农艺性状候选基因。5.cis-eQTL分析结合WGCNA、多个完整玉米基因组的结构变异分析、群体遗传学和分子实验验证,我们确定了一组可能在现代玉米育种中受选择并对各种农艺性状的遗传改良有贡献的候选基因及其功能变异/优良单倍型,包括一些已知的与株型、开花时间和产量相关性状关键调控基因,挖掘到了GL15和ZmPHYB2的有利单倍型分别调控穗行数和开花期,并鉴定了ZmPYL10及其功能变异对玉米株高和穗位高起到重要调控作用。6.通过对不同年代玉米材料中的表达转录本分析发现,基因在玉米育种过程中发生可变剪接的比例增加约20%。结合全基因组关联分析,发现幼苗、叶片和寻找更多雌穗中分别有2056、511和1473个cis-sQTLs,分别调控1745Z-IETD-FMK分子量、859和2381个基因的可变剪接变化。通过cis-sQTLs和cis-eQTLs的共定位分析发现,在幼苗、叶片和雌穗中分别鉴定到8、162和504个SNP同时调控基因表达和可变剪接变化。功能变异分类分析发现cis-sQTLs主要富集在内含子区域,而cis-eQTLs主要富集在基因间区,说明二者受不同的顺式元件调控。综上,本研究综合利用中国不同育种时期的玉米自交系的表型、重测序及转录组数据,分析了育种过程中表达基因的表达变化趋势,构建调控重要农艺性状的关键候选基因调控网络,并鉴定了现代玉米育种过程中调控重要农艺性状改良的关键候选调控基因和功能变异,为耐密型玉米品种的分子设计育种提供重要的理论指导及宝贵的遗传资源。

目的 探究无导针器技术联合生理盐水对超声引导下改良塞丁格（Seldinger）外周置入中心静脉导管（点击此处PICC置管术患者一次性穿刺成功率的影响。方法 选取2019年2月至2020年2月抚州市第一人民医院收治的70例行超声引导改良Seldinger PICC置管术的患者作为研究对象，采用随机数字表法将患者分为对照组和试Genetics behavioural验组，各35例。对照组采用超声引导套件进行穿刺，试验组采用无导针器技术联合生理盐水进行穿刺，比较两组患者的一次性穿刺成功率、疼痛评分以及并发症发生情况。结果 试验组一次穿刺成功率、一次置管成功率以及置管总成功率高于对照组，差异有统计学意义（P<0.05）；试验组的疼痛视觉模拟量表（VAS）评分低于对照组，差异有统计学意义（P<0.05购买BAY 73-4506）；试验组穿刺期间的并发症总发生率低于对照组，差异有统计学意义（P<0.05）。结论 对超声引导下改良Seldinger PICC置管术患者采用无导针器技术联合生理盐水穿刺可显著提升一次性穿刺成功率及置管成功率，缓解患者疼痛并减少并发症发生情况。

目的探讨儿童快进展型中枢性性早熟(RP-CPP)患儿经Gn RHa单一治疗、Gn RHa联合rh GH对生长发育指标的影响,为临床医师medication-overuse headache治疗提供参考依据。方法纳入宁夏医科大学总医院2018年9月至2021年9月诊断为(RP-CPP)的患儿119例。将所有入组患儿按照治疗情况不同分为单一治疗组与联合治疗组,详细收集患儿病史、体格检查、实验室检验及影像学检selleck HPLC查,分析治疗前后生长发育指标变化,并评估疗效及安全性。结果1.单一组与联合组生长指标分析发现,Ht、BMI、Ht SDS-BA、BA/CA经过半年、1年的治疗,除BMI外,不同时间点比较差异均具有统计学意义(p_(时间)<0.05);从数值上来看,Ht、Ht SDS-BA随着时间推移,数值增高,BA/CA随着时间推移,数值下降;单一组和联合组比较,除身高外,其他指标两组间比较有差异(P<0.05);治疗时间与组别间具有交互作用,说明时间对治疗方法有影响2.单一组与联合组发育指标分析发现,经过半年、1年的治疗,子宫大小、卵巢大小、E2、LH、FSH、卵泡>4mm个数差异均具有统计学意义(P_(时间)<0.05);两组进行比较,子宫大小、卵泡数>4mm的个数有差异,且治疗时间与组别间具有交互作用,卵巢大小、E2、LH、FSH在两组之间差异无统计学意义,治疗时间与组别间不具有交互作用。3.通过单一组与联合组同一个时间点进行两独立样本t检验分析发现,治疗半年及1年BMI在两组间差异均具有统计学意义(p<0.05);治疗半年Ht SDS-BA在两组间差异均具有统计学意义(p<0.05);治疗半年及1年BA/CA在两组间差异均具有统计学意义(p<0.05),见表6。4.通过单一组与联合组同一个时间点两独立样本t检验分析发现,治疗半年及1年子宫大小在两组间差异均具有统计学意义(p<0.05);单一组与联合组两独立样本t检验发现,治疗半年和1年的卵泡>4mm的个数在两组间差异均具有统计学意义(p<0.05),说明随着治疗时间得延长,对子宫大小及卵泡个数得控制效果更佳。5.两组在治疗期间出现,出现不良反应有注射部位疼痛、红肿、头疼及阴道流血;且两组间上述不良反应差异无统计学意义(P>0.05)。结论1.RP-CPP患儿经Gn RHa联合rh GH治疗较单一用药增加身高更为显著。2.单一与联合用药均会抑制RP-CPP患儿性腺发育、抑制骨龄成熟度、延缓骨龄进展。3.在激素水平方面两组抑制效果一致;治疗后子宫体积缩小单一组明显;治疗后PLX-4720抑制剂卵泡个数减少联合组明显,与部分研究不一致,可能原因是本研究样本小,研究时间短,结果可能存在偏差。4.RP-CPP患儿经单一、联合用药1年后BMI较治疗前未见显著变化,且仍在正常范围内波动。5.单一与联合用药均具有较好的安全性。6.联合治疗组中RP-CPP患儿平均就诊年龄较单一治疗组大,大部分患儿在出现月经初潮后才来就诊,提示临床医师应加强对CPP相关知识的宣讲,提高广大家长对CPP的认识,避免错过最佳治疗时机。

氨基糖苷类抗生素(Aminoglycoside antibiotics,AAs)分子结构是氨基糖与氨基环醇通过氧桥连接而成的苷类化合物,包括卡那霉素、新霉素、庆大霉素等。因其成本低、高效、广谱等特点,在奶牛养殖中应用较常见。通常采用多种AAs协同治疗奶牛的乳腺炎等疾病,因而一种牛奶中检测出多种抗生素超标现象时有发生,严重影响食用者的身体健康。为保障公共健康,避免滥用药物,及时准确地检测出牛奶中的抗生素残留是保障食品安全的重要环节。若单一检测,样本量大,复杂耗时,建立针对同一类抗生素的同步检测方法,可以减少样本量,实现样品的快速高效检测。基于适配体的传感分析方法成为AAs同步检测的重要手段,而适配体传感器多残留检测方法的突破有赖于获得抗生素广谱适配体,其特性决定着分析检测的灵敏度和准确性。因此,本论文具体研究内容及其结果如下:以卡那霉素、新霉素和庆大霉素为混合靶标,采用非固定化氧化石墨烯(Graphene oxide,GO)-SELEX方法筛选AAs广谱适配体。筛选过程中靶标处于游离状态,GO能够通过π-VE-822π共轭作用吸附未与靶标结合的ssDNA。经过12轮的筛选,然后克隆测序、序列分析和亲和力测定,得到最佳的适配体初步序列AAs 03,对新霉素、庆大霉素和卡那霉素的解离常数(Dissociation constant,Kd)分别为219.69 nM、244.86 nM和312.46 nM。进一步分析了适配体AAs 03的广谱性和特异性,发现适配体AAs 03可识别链霉素、妥布霉素等AAs,Kd值为285.57～322.47 nM,具有良好的广谱性,而对四环素、氯霉素等其他类抗生素结合能力明显弱于AAs,具有良好的特异性。由于适配体AAs 03含有79个碱基,碱基序列过长易形成空间位阻。基于适配体二级结构对其进行剪切优化,获得含有49个碱基的适配体截短序列AAs 03-2,Kd值为94.44～185.94 nM,与原始序列AAs 03相比,Kd值降低1倍,亲和力提高。进一步探讨适配体与抗生素的结合机理,圆二色谱结果表明适配体AAs 03-2与抗生素结合后,适配体的碱基堆积作用减少,其发生构象变化。通过分子模拟软件进行适配体建模和分子对接,发现适配体AAs 03-2碱基位点TGCTAT结合区域形成结合口袋,将AAs包裹起来,在AAs的共有结构脱氧链霉胺与适配体之间的氢键、静电盐桥以及范德华力作用下,以空间结构互补的方式,使二者形成稳定的复合物。为验证筛选的广谱适配体AAs 03-2的应用性能,将其作为识别元件,构建了基于有序介孔碳(Ordered mesoporous carboAZD2281n,OMC)@Ti_3C_2 MXene 纳米材料的新型电化学传感器。OMC能够嵌入到Ti_3C_2 MXene纳米片中,防止Ti_3C_2 MXene堆叠,产生良好的电流通道,增强电极的导电性。OMC@Ti_3C_2 MXene具有较大的比表面积,能够很好的作为纳米载体warm autoimmune hemolytic anemia,容纳大量的适配体以识别和捕获靶标。在AAs存在的情况下,适配体与AAs结合形成复合物,阻碍了电极表面的电子转移,导致电化学信号下降,通过电化学信号的变化定量检测AAs。在最佳的检测条件下,适配体传感器的线性检测范围为10～2,000 nM,检测限(Limit of detection,LOD)为3.51 nM。同时,该适配体传感器具有良好的特异性、稳定性和重现性,能够用于检测AAs。为进一步提高传感器的检测灵敏度,以筛选的广谱适配体AAs 03-2作为识别元件,采用酶辅助循环放大技术构建双模式适配体传感器检测AAs。采用OMC@Ti_3C_2MXene作为基底材料修饰在电极表面,将Au-Pd@Fc纳米材料与信号DNA偶联制备信号探针。当AAs存在时,适配体AAs 03-2与其结合,在核酸外切酶Ⅲ作用下,发生靶标诱导的循环扩增反应,使电极表面信号探针增多,促进电子转移,增强电信号,根据电信号的变化定量检测AAs,检测限为0.0355 nM。同时,信号探针上的Au-Pd@Fc纳米材料具有纳米酶的特性,能够催化3,3′,5,5′-四甲基联苯胺显色反应,随着AAs浓度的变化,溶液颜色发生变化,通过测定溶液吸光度定量检测AAs,LOD为0.0458nM。适配体传感器在电化学和比色双模式下检测溶液中的AAs,检测结果相互验证,提高了检测方法的准确性。将构建的适配体传感器用于检测牛奶样品中的AAs,牛奶中蛋白质、脂肪、乳糖、Na+、Ca2+主要成分对传感器的电化学信号以及适配体与靶标的结合均造成干扰。制备了能够特异性吸附AAs的磁性分子印迹聚合物(Magneticmolecular imprinted polymers,MMIPs)材料,比较了乙腈萃取结合MMIPs磁吸附分离和乙酸处理结合MMIPs磁吸附分离2种牛奶样品处理方法,发现乙腈结合磁分离的方法对牛奶样品处理效果较好。采用此方法处理样品,并分别通过第4章和第5章构建的电化学适配体传感器对AAs进行检测,LOD分别为3.45～3.97ng/mL和0.0439～0.0574 ng/mL,加标回收试验的回收率分别为96.20%～98.21%和97.19%～98.70%,表明乙腈结合磁分离的方法处理牛奶样品是可行的,并且所构建的适配体传感器能够用于同步检测牛奶中的AAs含量。本研究为适配体应用于抗生素等食品危害物的同步检测提供了理论基础。

第一部分2型糖尿病患者肌肉含量与体内GLP-1水平的关系目的:肌肉减少加重2型糖尿病患者的糖代谢紊乱,GLP-1类似物是目前应用的新型降糖药物,它除降糖作用外具有多器官多靶点保护效应,那么是否对于肌肉减少有影响,本实验探讨了2型糖尿病患者GLP-1水平与骨骼肌含量的关系。方法:回顾选取2020年3月至2021年2月我院住院的非肥胖男性2型糖Paramedian approach尿病患者51例,年龄(59.86±8.41),收集受试者糖尿病病史,测量所有受试者血压、身高、体重并计算体重指数(BMI),空腹8 h后于次日晨起抽取静脉血用于检测空腹血糖(FBG)、血脂水平(TC、TG、HDL-c、LDL-c)及糖化血红蛋白(Hb A1c),应用ELISA法测定GLP-1和DPP-4水平。采用双能X线骨密度仪(DXA)测量所有受试者的骨骼肌含量从而计算骨骼肌指数(SMI),以SMI做分组,A组(n=25,SMI<7 kg/m2)、B组(n=26,SMI≥7 kg/m2)。结果:1.A组和B组两组之间在病程、年龄、空腹血糖、甘油三酯、总胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇、高密度脂蛋白胆固醇和DPP4的水平,差异没有统计学意义(P>0.05),A组GLP-1水平显著低于B组[(0.3(0.22)vs(0.5(0.20)ng/ml,P<0.01]。2.单因素分析显示SMI与GLP-1呈正相关(r=0.526,P<0.05)。3.多元线性回归分析显示年龄(β=-0.299,95%CI:-0.054～-0.009,P=0.015)与SMI负相关,而GLP-1(β=0.435,95%CI:0.18～1.612,P=0.001)与SMI正相关。4.二元Logistic回归分析显示以SMI为自变量,以年龄、病程、空腹血糖、糖化血红蛋白、GLP-1水平为因变量,GLP-1水平在P_(50th)以下发生低SMI的风险是P_(50th)以上的10.55倍(95%CI:2.894-38.504,P=0.001)。结论:GLP-1水平在2型糖尿病合并低SMI患者体内是下降的。2型糖尿病中SMI与GLP-1水平独立正相关,随GLP-1水平下降,低SMI的风险明显增加。第二部分GLP-1受体激动剂缓解2型糖尿病小鼠肌肉减少的机制研究目的:探讨GLP-1受体激动剂利拉鲁肽通过直接抑制MAFbx和Mu RF1的表达缓解糖尿病小鼠肌肉减少。方法:1.细胞部分1)以不同浓度利拉鲁肽(100n M,200n M,500n M)对体外培养的C2C12细胞进行刺激,48小时后应用MTT法进行细胞活性检测。2)按照分组将细胞加入药物:对照组(未处理组)、阴性对照组(甘露醇25mmol/L)、高糖组(葡萄糖25mmol/L)、高糖+利拉鲁肽组(葡萄糖25mmol/L+利拉鲁肽200nmol/L),应用Western blot对骨骼肌特异性泛素蛋白酶E3(MMC3供应商AFbx和Mu RF1)和AMPKα蛋白表达水平进行测定。采用ELISA法对3-MH进行检测。2.动物部分将KK-Ay小鼠分为两组,利拉鲁肽治疗组(250ug/kg/d)和等量生理盐水治疗组,每3天记录进食量情况,干预8周。应用骨密度仪测量其脂肪(Fat)和骨骼肌含量(SMM)。在处死小鼠前对小鼠进行眼球取血,应用葡萄糖氧化酶法测定葡萄糖浓度,断颈处死后快速解剖留取四肢的骨骼肌组织,PBS缓冲液冲洗,吸干表面残留液体,电子天平称重,得到湿重。提取骨骼肌RNA及蛋白质,应用Real-time RT-PCR和Western blot对小鼠骨骼肌MAFbx和Mu RF1的m RNA和蛋白水平进行检测。结果:1.高糖组较甘露醇组和对照组的AMPKα水平明显下降(P<0.01),利拉鲁肽-200干预后AMPKα水平明显升高(P<0.05)。2.高糖组MAFbx和Mu RF1水平明显高于空白对照组和甘露醇组(P<0.01),利拉鲁肽-200干预后MAFbx和Mu RF1水平明显较高糖组降低(P<0.01)。3.甘露醇组和空白对照组3-MH水平无差别,高糖组3-MH水平明显高于空白对照组和甘露醇组(P<0.01),利拉鲁肽-200干预后3-MH水平较高糖组明显降低(P<0.05)。4.KK-Ay小鼠应用利拉鲁肽组较盐水治疗组进食量减少、体重减轻(P<0.01)、血糖下降(P<0.05)。利拉鲁肽治疗组小鼠四肢骨骼肌湿重较生理盐水组有明显升高(P<0.01)。5.利拉鲁肽治疗组的KK-Ay小鼠骨骼肌Mu RF1和MAFbx的m RNA和蛋白表达水平较盐水组明显下降(P<0.05)。结论:高糖环境下AMPKα的表达受抑制,而MAFbx和Mu RF1的m RNA和蛋白水平表达增加,3-MH表达增加即骨骼肌蛋白质分解增加,而利拉鲁肽干预后可缓解这一病理过程。利拉鲁肽能降低糖尿病小鼠的血糖、减轻体重,骨骼肌含量增加,在糖尿病小鼠骨骼肌组织同样可观察到利拉鲁肽对Mu RF1和MAFbx的m RNA和蛋白表达水平有抑制作用。第三部分GLP-1受体激动剂缓解肌肉减少的机制探讨目的:通过地塞米松制造肌肉减少模型,应用GLP-1受体激动剂(利拉鲁肽)干预,观察其缓解肌肉减少的机制。方法:1.将体外培养的C2C12肌细胞用不同浓度利拉鲁肽(10n M,100n M,1000n M)进行刺激,分为空白对照组、利拉鲁肽10 n M组、利拉鲁肽100n M组、利拉鲁肽1000 n M组,对C2C12细胞进行荧光染色,DAPI染色细胞核,以MHC染色评估肌管分化效率。2.将体外培养的C2C12细胞用10u M地塞米松处理制造肌肉减少模型,以不同浓度利拉鲁肽(10n M,1000n M)进行干预,分为空白对照组、地塞米松组、地塞米松+利拉鲁肽10 n M组、地塞米松+利拉鲁肽1000 n M组,仍然进行荧光染色以MHC染色评估肌管分化效率。同时应用Real-time RT-PCR检测MAFbx和Mu RF1 m RNA的表达水平。3.将带有GFP荧光的MAFbx和Mu RF1过表达重组腺病毒进行转染,只表达GFP荧光的腺病毒作为阴性对照,并在MOI为100的条件下转染48 h,MHC染色评价肌管萎缩程度,应用Real-time RT-PCR检测MAFbx和Mu RF1 m RNA的表达水平。结果:1.MHC荧光强度随着利拉鲁肽浓度的增加而增强,利拉鲁肽-1000n M干预组MHC荧光强度最大;Real-time RT-PCR结果显示MAFbx和Mu RF1的m RNA表达水平随利拉鲁肽浓度的增加表达逐渐降低,利拉鲁肽-1000n M干预组下降最显著,差异有统计学意义(P<0.05)。2.地塞米松处理后MHC荧光强度明显下降,应用利拉鲁肽10n M、100n M和1000n M处理后荧光强度逐渐增加,利拉鲁肽-1000n M干预组增加最明显,差异有统计学意义(P<0.05)。3.Ad-GFP组地塞米松处理后MHC荧光强度明显减弱,应用利拉鲁肽1000n M后MHC荧光强度较前增加,差异有统计学意义。Ad-MAFbx和Ad-Mu RF1显著拮抗利拉鲁肽增加MHC荧光强度的作用,差异有统计学意义,(P<0.05)。结论:GLP-1受体激动剂利拉鲁肽以剂量依赖的方式促进成肌细胞分化,并以剂量依赖的selleck HPLC方式抑制MAFbx和Mu RF1 m RNA的转录表达。地塞米松处理组肌管形成显著减少,增加了细胞内MAFbx和Mu RF1的表达水平,利拉鲁肽以剂量依赖的方式降低其诱导的MAFbx和Mu RF1高表达进而改善肌管减少。利拉鲁肽在促进肌肉分化的同时也通过抑制MAFbx和Mu RF1的表达而缓解地塞米松诱导的肌肉减少。

目的 探讨miR-125a对巨噬细胞脂质代谢及主动脉粥样硬化（atherosclerosis,AS）病变的影响及作用机制。方法 油红O及比色法检测巨噬细胞内脂滴情况及脂质含量；生物信息学Mobile social media预测miR-125a下游靶标；双荧光素酶报告基因验证miR-125a与sortilin mRNA靶向结合；qPCR、Western blot和免疫组化检测荷脂THP-1巨噬细胞和低密度脂蛋白受体敲除（LDLR~(-/-)）小鼠中miR-125a及sortilin表达；全自动生化分析仪测定血脂改变；组织染色显示主动脉AS斑块面积及脂质沉积情况。结果 过表达miR-125a可减轻THP-1巨噬细胞内脂质蓄积；生信分析和荧光素酶报告基因显示sortilin mRNA是miR-125a的作用靶标；过表达miR-125a可下调巨噬细胞sortilin表达，减少胞内脂滴数量及脂质含量，改善LDLR~(-/-)小鼠血脂谱selleck HPLC，抑制主动脉脂质沉积及AS病变面积。结论 miR-125a可通过下调sorBelumosudil细胞培养tilin表达抑制巨噬细胞脂质蓄积及主动脉AS病变。

目的 探讨细胞外组蛋白H4对小鼠淋巴细胞Raw264.7细胞凋亡的影响及其与促分裂素原活化蛋白激酶（MAPKs）信号通路的调控关系。方法 收集Raw264.7细胞分为低浓度刺激组、高浓度刺激组及对照组，分别加入50μg/m L、100μg/m L组蛋白H4及不做任何处理，采用FCM法检测各组细胞凋亡率，选取既能诱导细胞凋亡又具有较低细胞毒性的组蛋白刺激浓度进行后续实验。组蛋白H4在去除脂多糖污染后，使用筛选浓度刺激Raw264.7细胞，分别在刺激开始0、5、10、30、60、120 min收取细胞，Western blotting法检测细胞磷酸化ERK(p-ERK)、p-JNK、p-p38蛋白表达。分别使用ERK通路抑制剂、JNK通路抑制剂、p38通路抑制剂、DMSO细胞冻存液预处理Raw264.7细胞1 h，作为ERK抑制组、JNK抑制组、p38抑制组、阴性对照组，另设空白对照组正常培养不做处理，每组分别给予或不给予筛选浓度的组蛋白刺激，采用FCM法检测各组给予或不给予组蛋白刺激的细胞凋亡率。结果 低浓度刺激组、高浓度刺激组细胞凋亡率均高于对照组（P均<0.05），低浓度刺激组、高浓度刺激组细胞凋亡率比较差异无统计学意义，但高浓度刺激组晚期细胞凋亡率及死亡率较低浓度刺激组增高（P均<0.05）。考虑到细胞毒性，选取50μg/m L作为组蛋白H4的刺激浓度。p-ERK蛋白表达在组蛋白刺激10 min及30 min时均高于0 min时，且在30 min时达到高峰，在60 min及120 min时降至初始水平；p-JNK蛋白表达在组蛋白刺激10 miProsthesis associated infectionn及30 min时均高于0 min时，且在10 min时达到高峰，在60 min及120 miAMG510n时降至初始水平（P均<0.05）;p-p38蛋白表达在各时点差异均无统计学意义。空白对照组、阴性对照组组蛋白刺激的Raw264.7细胞凋亡率均高于没有组蛋白刺激的细胞（P均<0.05）,ERK1、JNK及p38抑制组组蛋白刺激、不刺激的细胞凋亡率比较差异均无统计学PF-02341066意义。结论 细胞外组蛋白H4刺激可促进淋巴细胞凋亡，其作用可能通过激活MAPKs信号通路中ERK和JNK信号分子来实现。