PI3K抑制剂

目的:探讨精准给药策略联合预见性护理在接受R-EPOCH方案治疗的非霍奇金淋巴瘤病人中的应用效果。方法:采用便利抽样法，选取2021年1月—2022年12月山西省某三级甲等医院血液科住院并采用R-EPOCH方案治疗的非霍奇金淋巴瘤病人为研究对象，将2021年住院的70例病人作为对照组，将2022年住院的73例病人作为观察组。对照组实施常规护理，观察组实施精准给药策略联合预见性护理。比较两组护士实际给药时间、病人焦虑情况及生命质量。结果:研究过程中对照组有2例病人失访，观察组有3例病人失访，最终对照组68例病人完成研究，观察组70例病人完成研究。观察组护士实际给药总时间为（Wnt-C59分子式96.16±9.45）h，短于对照组MK-2206生产商[（99.77±10.22）h]，差异有统计学意义（P<0.05），且观察组护士实际给药总时间更接近指南要求（持续输注96 h）。随着时间变化，非霍奇金淋巴瘤病人汉密尔顿焦虑量表（HAMA）得分有变化（P<0.05），不同组别的非霍奇金淋巴瘤病人HAMA得分不同（P<0.05），干预时间与干预方法间存在交互效应（P<0.05）。干预后，观察组病人癌症病人生命质量测定量表（FACT-G）总体及各维度得分均高于对照组，差异均有统计学意义（P<0.05）。结论:将精准给药策略联合预见性护理genetic ancestry应用于接受R-EPOCH方案治疗的非霍奇金淋巴瘤病人，可以提高病人给药时间的准确性，改善病人焦虑状况，提高病人生活质量。

目的 探究动态增强磁共振成像定量参数预测和评估鼻腔鼻窦恶性肿瘤化疗效果。方法 选取本院2019年5月～2022年8月期间selleck合成收治的50例鼻腔鼻窦恶性肿瘤患者视为研究对象，均开展磁共振动态增强诊断,统计恶性肿瘤患者的TIC分型结果、磁共振动态增强的诊断效能、常规MRI影像学表现。结果 TIC分型结果显示：流出型患者18例，占比为36.00%：平台型患者28例，占比为56.00%：上升型患者4例，占比为8.00%:P<0.05；磁共振动态增强诊断显示：Kep与AUC最大, Kep与Ktrans存在最佳诊断效能,敏感度是78.72%,Kep特异度为86.00%。结论 临床针对鼻腔鼻窦肿瘤患者开展及时Erdafitinib抑制剂有效的磁共振动态增强扫描检查,可进一步对恶性肿瘤进行鉴别Substructure living biological cell诊断,且磁共振动态增强扫描技术的诊断效能较好，建议临床不断深入研究与借鉴。

目的:本研究旨在探讨SLE合并AIHA患者的临床表现及血清学特征,进而分析SLE发生AIHA的危险因素以及SLE-AIHA患者发生慢性器官损伤的危险因素,为临床诊治提供依据。方法:回顾性收集2013年7月至2022年7月就诊于青岛大学附属医院SLE患者3554例,SLE-AIHA患者共151例(4.24%),其中符合纳入标准并且资料完整者110例(SLE-AIHA组),非贫血SLE患者2718例,于2718例非贫血SLE患者中按照随机数字表法选取110例作为对照组(SLE-non AIHA组)。比较两组的一般人口统计学资料、临床表现、系统受累、自身抗体、炎症指标。AIHA组患者按照贫血严重程度分为轻度贫血,中度贫血,重度贫血,极重度贫血,分析组间selleck Belnacasan差异。AIHA组患者再根据SDI评分,分为SDI=0组(无慢性器官损伤)与SDI≥1组(有1个及以上慢性器官损伤),分析SLE-AIHA患者发生慢性器官损伤的危险因素。结果:1、本研究SLE合并AIHA发生率为4.24%(151/3554)。SLE-AIHA患者与SLEnon AIHA患者相比性别构成无差异,发病年龄更小(≤18岁占18.18%),发病时疾病活动度高(SLEDAI=9.29±6.63)。临床表现方面,SLE-AIHA患者更易出现发热(51.82%)、心慌心悸(4.55%)、恶心呕吐(6.36%)、腹痛(9.09%)、黄疸相关症状(15.45%)、头晕头痛(13.SAG小鼠64%)、乏力(42.73%),而较少出现关节肿痛及颜面部、下肢水肿。在累及系统方面,SLE-AIHA组患者更易出现狼疮脑病(8.18%),相对于SLE-no AIHA组患者较少出现多浆膜腔积液、关节炎、淋巴结肿大以及静脉血栓形成。狼疮肺炎发病率无统计学意义,但SLE-AIHA患者有狼疮肺炎倾向,SLE-AIHA组中3例患者发生狼疮肺炎,并有2例患者出现肺泡出血,其中1例肺泡出血患者发生死亡。在合并其他自身免疫病方面,SLE-AIHA组患者更容易发生APS(12.73%)。不同程度贫血患者SLEDAI评分差异无统计学意义,SDI评分(X2=11.6,p=0.009<0.01)差异具有统计学意义,极重度贫血选择SDI≥1的比例100.00%,重度贫血选择SDI≥1的比例48.84%,均高于平均水平37.27%。不同贫血程度患者的临床表现、自身抗体方面差异无统计学意义。用药方面,中重度SLE-AIHA患者应用丙种球蛋白频率(21.57%,41.68%)更高。2、SLE-AIHAMUC4 immunohistochemical stain组患者有更高的抗核抗体滴度,SLE-AIHA组ANA滴度1:1000的比例为34.55%,1:3200的比例25.45%。自身抗体方面,SLE-AIHA组抗Sm抗体(22.73%)、a CL IgG型(28.18%),a CL IgM型(34.55%)阳性率更高。炎症指标上,SLE-AIHA组患者CRP(3.915(0.9,14.8)mg/L)水平更高,补体C3(0.57±0.33g/L)、补体C4(0.110(0.1,0.2)g/L)更低。3、SLE-AIHA分组Logistic回归分析显示发热(OR=4.507)、狼疮脑病(OR=19.745)、APS(OR=7.706)、低补体C3(OR=0.085)会对AIHA产生显著的正向影响关系。4、SDI≥1组患者初期发病时更容易出现颜面部、下肢水肿(26.83%)。系统累及方面,SDI≥1组患者更容易发生狼疮肾炎(48.78%),SDI≥1组患者不容易出现狼疮脑病(19.51%)及血管炎(1.45%)。SDI≥1组血红蛋白平均水平(59.00g/L)低于SDI=0组平均水平(73.36g/L)。自身抗体方面,抗核糖体P蛋白抗体在SDI≥1组患者中更容易出现。SDI分组的Logistic回归分析显示狼疮脑病(OR=43.425)、Hb降低(OR=0.909)会对SDI≥1产生显著的正向影响关系。结论:1、本研究显示,SLE的AIHA发生率为4.24%,发病年龄更早,疾病活动度更高,疾病活动度与溶贫严重程度无关。更易出现发热,乏力,心慌心悸,头晕头痛,胃肠道症状,较少出现关节肿痛及颜面部或下肢水肿,更容易合并APS和狼疮脑病。2、SLE-AIHA组患者抗Sm抗体、aCL IgG型、IgM型阳性率高,ANA滴度更高,补体更低。3、发热、狼疮脑病、APS、C3降低为SLE发生AIHA独立危险因素。4、Hb降低、发生狼疮脑病为SLE-AIHA患者出现慢性器官损害的独立危险因素。

目的·分析黏附性G蛋白偶联受体F1 (adhesion G protein-coupled receptor F1, ADGRF1)在胰腺导管腺癌（pancreatic ductal adenocarcinoma,PDAC）发生及发展过程中的表达变化，探究ADGRF1对PDAC细胞增殖的影响以及促进PDAC进展的潜在分子机制。方法·基于癌症基因组图谱（The Cancer Genome Atlas,TCGA）数据库和基因表达综合（Gene Expression Omnibus,GJQ1化学结构EO）数据库分析ADGRF1在正常胰腺组织及PDAC组织中的mRNA水平表达。利用实时荧光定量PCR (quantitative real-time PCR,qPCR)和蛋白质印迹法（Western blotting）检测ADGRF1在正常胰腺导管上皮细胞hTERT-HPNE及多种PDAC细胞中的表达情况。利用免疫组织化学染色（immunohistochemistry staining,IHC）检测PDAC患者的癌组织及癌旁组织中ADGRF1的表达差异。转染小干扰RNA (small interfering RNA,siRNA)敲低ADGRF1后，通过CCK8和平板克隆形成实验检测PDAC细胞AsPC-1、SW1990增殖能力的变化。构建稳定过表达ADGRF1的Patu8988细胞，通过CCK8实验检测过表达ADGRF1引起的PDAC细胞增殖变化。利用RNA测序（RNA-sequence,RNA-seq）、基因集富集分析（gene set enrichment analysis,GSEA）和免疫浸润分析预测与ADGRF1促进PDAC癌症进展相关的信号通路。结果·TCGA数据库和GEO数据库的分析结果LY294002体内实验剂量显示ADGRF1 mRNA在biodiversity changePDAC组织中的表达高于正常胰腺组织（均P=0.000）。qPCR和Western blotting结果显示，与hTERT-HPNE细胞相比，多种PDAC细胞中ADGRF1的mRNA和蛋白水平均有所上调（均P<0.05）。IHC结果显示ADGRF1在PDAC患者癌组织中的表达也高于癌旁组织。此外，下调ADGRF1能够抑制PDAC细胞AsPC-1、SW1990的增殖能力；而过表达ADGRF1则促进Patu8988细胞的增殖能力（均P<0.05）。RNAseq、GSEA富集分析和免疫浸润的结果显示，ADGRF1的表达与干扰素α (interferon-α,IFN-α)、肿瘤坏死因子α (tumor necrosis factor-α,TNF-α)和核因子κB (nuclear factorκB,NF-κB)等信号通路有关。结论·ADGRF1在PDAC细胞和组织中高表达，促进PDAC细胞的增殖，其机制可能与多个免疫相关信号通路有关。

目的 探讨普萘洛尔联合丙基硫氧嘧啶对甲状腺功能亢进症患者心功能及内分泌功能的影响。方法 选取2021年1月至2022年10月山东省泰安市妇幼保健院收治的96例甲状腺功能亢进症患者，按照随机数字表法分为两组，每组48例，丙基硫氧嘧啶组使用丙基硫氧嘧啶治疗，普萘洛尔组使更多用普萘洛尔联合丙基硫氧嘧啶治疗，两组患者均持续治疗3个月。比较两组患者临床疗效，并对治疗前后两组患者甲状腺功能指标、心功能指标、内分泌激素水平进行比较，观察两组患者不良反应发生情况。结果普萘洛尔组患者治疗总有效率（95.83%）高于丙基硫氧嘧啶组（81.25%），差异有统计学意义（P<0.01）。治疗后普萘洛尔组患者促甲状腺激素、皮质醇水平高于丙基硫氧嘧啶组，甲状腺激素Insect immunity、游离三碘甲状腺原氨酸和促肾上腺皮质激素水平低于丙基硫氧嘧啶组，差异有统计学意义（P<0.05）。治疗后普萘洛尔组患者心率低于丙基硫氧嘧啶更多组，左心室射血分数高于丙基硫氧嘧啶组，差异有统计学意义（P<0.05）。普萘洛尔组患者不良反应发生率（6.25%）低于丙基硫氧嘧啶组（22.92%），差异有统计学意义（P<0.05）。结论 普萘洛尔联合丙基硫氧嘧啶治疗甲状腺功能亢进症临床疗效显著，可明显提高患者的甲状腺功能，改善心功能指标和内分泌激素水平，减轻患者不良反应。

DNA碱基编辑器(Base editor,BE),主要包括胞嘧啶碱基编辑器(Cytosine base editor,CBE)和腺嘌呤碱基编辑器(Adenine base editor,ABE),是衍生于CRISPR/Cas9(Clustered regularly interspaced short palindromic repeats/CRISPR associated protein 9,CRISPR/Cas9)系统的新型基因编辑工具。通过将Cas9切口酶(Nickase)与胞嘧啶(APOBEC/AID家族)或者腺嘌呤碱基脱氨酶(经进化的Tad A蛋白)融合,BE可以在sg RNA的引导下在基因组特定位点进行碱基的脱氨反应,将胞嘧啶或腺嘌呤分别转换为胸腺嘧啶和鸟嘌呤。碱基编辑器在不引入DNA双链断裂且不需要额外的DNA供体模板的前提下,能高效催化碱基替换,photodynamic immunotherapy展现出广泛的应用前景。ABE可将A·T碱基对转换为G·C碱基对,但如果靶点的编辑窗口(碱基编辑器在靶点内脱氨的碱基范围)内有多个腺嘌呤,会由于旁观者效应引起非目的碱基的转换,而且ABE的DNA和RNA水平的脱靶编辑引起了大家对其安全问题的广泛关注。最近也有报导意外发现ABE会对基因组DNA中的TCN基序产生胞嘧啶脱氨活性,导致在编辑窗口内除了引起A-toG的旁观者效应还会出现C-to-T/A/G的胞嘧啶碱基编辑。随着ABE的不断改进,在其活性增加的同时(例如超高活性的ABE8e)也带来了更严重的腺嘌呤和胞嘧啶旁观者效应、更高的DNA和RNA脱靶编辑。因此,开发更加安全且高效的ABE是解决碱基编辑临床应用安全性问题的迫切需要。在本课题中,我们基于Tad A-8e腺嘌呤脱氨酶的冷冻电镜结构,通过尝试修改脱氨酶中影响与底物DNA相互作用的十个关键残基(E27、V28、P29、H57、F84、P86、N108、L145、F148以及Y149),设计并构建21个不同单个氨基酸替换的突变体。通过初步筛选,我们发现Tad A-8e-V28F、V28N、N108Q、L145C、L145T和L145Q在不降低on-target编辑活性的情况下,相比于ABE8e呈现出缩窄窗口和降低胞嘧啶碱基转换的趋势,其中ABE8e-N108Q活性最高且旁观者编辑效应最低。通过在细胞内12个含有多个腺嘌呤和9个胞嘧啶的内源性靶点测试,我们证明ABE8e-N108Q相较于ABE8e在保持主要编辑活性的同时可将主要活性窗口缩窄至A4-A7位,并可以将胞嘧啶旁观者编辑效率从平均18.02%减少至平均5.79%。然而,该变体在降低腺嘌呤和胞嘧啶旁观者编辑的表现不够完美,无法实现真正意义上的单碱基编辑。因此,我们想进一步叠加潜在能够提升脱氨酶特异性的点突变,开发窗口缩窄的ABE。在初步的筛选中,我们构建了14个组合突变体,发现ABE8e-N108Q与E27、P29、F84和L145突变残基的结合呈现出紧缩的窄窗口,仅仅编辑A5位。其中ABE8e-N108Q/L145T在维持高on-target活性同时展现出最窄的编辑窗口,我们因此将其命名为ABE9。在12个含有多个腺嘌呤的内源性靶点测试结果表明,ABE9整体编辑活性相对于ABE8e轻微降低,但其编辑活性远高于ABE7.10,可以显著降低腺嘌呤旁观者编辑,将活性窗口缩窄至1-2nt,编辑精确度相对于ABE8e-N108Q最高提升8倍(平均4.3倍)。ABE9的indels引入率相比于ABE8e和ABE8e-N108Q持平或略微降低。此外,在11个含有多个胞嘧啶的内源性靶点的测试中,ABE8e和ABE8eN108Q在所有靶点都产生严重的胞嘧啶旁观者编辑,而ABE9在10/11的靶点selleckchem Taurine中没有胞嘧啶的编辑(<1%视为不存在编辑),相对于ABE8e和ABE8e-N108Q将胞嘧啶转换比率分别降低平均56.2倍和10.2倍,证明ABE9几乎完全消除非必要的胞嘧啶编辑。此外,利用含有9120条sg RNA的靶点文库无偏见评价策略,我们发现相对于ABE8e(A4-A9)和ABE8e-N108Q(A4-A7)的宽编辑窗口,ABE9将编辑窗口缩窄至1-2nt,在A5位活性和偏好性最高。通过编辑背景序列偏好性分析,发现ABE9在编辑时对DNA靶点背景序列无依赖性。这都表明ABE9的精准脱氨与碱基在靶点中的相对位置有关系而不是靶点的背景序列。另外,经44个g RNA依赖的DNA潜在脱靶位点分析,ABE8eNirogacestat纯度在11个测试的位点诱导轻度脱靶编辑(平均4.15%),而ABE9在保持高活性的同时只在2个位点产生轻微的脱靶。在增强正交R-loop实验中,ABE9相较于ABE8e极大降低了Cas9非依赖的DNA脱靶,其DNA脱靶活性降低到接近背景水平(平均<0.3%)。在全基因组RNA-seq分析中,ABE9的RNA脱靶效应也降低至背景水平,与ABE8e和ABE8e-N108Q相比分别降低了726.1倍和117.1倍。这些结果表明,ABE9高度特异,仅引入比率极低的DNA和RNA脱靶编辑。由于编辑窗口紧缩,ABE9可融合到具有广泛PAM(Protospacer adjacent motif,PAM)兼容性的Cas9变体,进一步扩大精确校正致病性点突变的范围。总而言之,本研究通过定向改造腺嘌呤脱氨酶Tad A-8e开发出了一种新型精准安全的ABE9,其具备1-2nt的窄窗口,能够在哺乳动物细胞中精准实现A-toG转换,消除了传统ABE存在的严重胞嘧啶旁观者效应并大幅降低不可预测的脱靶编辑,为基础研究和基因治疗提供新的精准编辑研究工具。

该研究建立了一种亲水性高效液相色谱同时测定婴幼儿配方乳粉中胞嘧啶核苷酸、尿嘧啶核苷酸、次黄嘌呤核苷酸、鸟嘌呤核苷酸和腺嘌呤核苷酸共5种核苷酸含量确认细节的检测方法。婴幼儿配方乳粉样品经超纯水提取其中的核苷酸，沉淀蛋白后上清液用Oasis PRiME HLB固相萃取柱净化，采用Waters BEH Amide色谱柱分离，以0.1%磷酸溶液和乙腈为流动相进行梯度洗脱，二极管阵列检测器采集信号，外标法定量。结果表明，5种核苷酸在2～40 mg/L内线性关系life-course immunization (LCI)良好（R~(2)>0.999），方法的检出限和定量限分别为0.5～1.0 mg/kg和1.5～3.0 mg/kg；空白样品添加6、15、30 mg/kg三个浓度水平，平均加标回收率为90.17%～101.20%，相对标准偏差为1.6%～4.5%（n=6）。该Cell Cycle抑制剂方法快速准确、基质干扰小、灵敏度高，适用于婴幼儿配方乳粉中核苷酸的测定。

目的 检测CD4~+细胞毒性相关辅助T淋巴细胞在人类正常睾丸及精原细胞瘤中的表达，探讨其在精原细胞瘤免疫微环境中的作用。方法 通过基因表达相互作用分析数据库（GEPIA）基因表达特征整合分析测序数据库分析CD4~+细胞毒性相关辅助T淋巴细胞标记分子CD4和颗粒酶K(GZMK)在正常睾丸及精原细胞瘤中的表达，并分析二者表达相关性及与肿瘤分期间的关系。采用免疫组化及双重荧光染色检测正常睾丸（n=8）与精原细胞瘤（n=12）组织中CD4、GZMK及public biobanksCD4~+GZMK~+表达水平，并进行统计分析。结果 GEPIA基因表达谱分析结果显示精原细胞瘤CD4和GZMK表达水平高于正常睾丸，差异有统计学意义（P<0.05）；高分期精原细胞瘤患者GZMK表达低于低分期精原细胞瘤，差异有统计学意义（P<0.05）;CD4和GZMKAdavosertib配制表达水平呈正相关（r=0.71,P<0.05）；免疫组化结果与GEPIA基因表达谱数据一致，即精原细胞瘤CD4和GZMK表达水平高于正常睾丸，差异有统计学意义（P<0.05）；免疫荧光染色结果显示精原细胞瘤中CD4KD025抑制剂和GZMK表达共定位。结论 精原细胞瘤组织CD4、GZMK及CD4~+GZMK~+细胞表达水平较正常睾丸组织增高，提示CD4~+细胞毒性辅助性T淋巴细胞在精原细胞瘤免疫微环境中发挥重要作用。

目的 观察鼻咽癌(NPbioceramic characterizationC)放化疗患者预期性悲伤水平,并分析其相关影响因素。方法 选取2020年1月-2022年8月医院收治的73例NPC放化疗患者,采用癌症selleckchem患者预期性悲伤问卷(PGAC)对患者预期性悲伤水平进行评估,经线性回归分析NPC放化疗患者预期性悲伤水平的影响因素。结果 73例NPC放化疗患selleck INCB28060者经评估,PGAC评分平均为(45.13±4.81)分;不同家庭月平均收入、肿瘤转移、社会支持、希望水平资料的患者PGAC评分比较(P<0.05);其他不同资料的患者PGAC评分比,无统计学差异(P>0.05)。经线性回归分析,结果 显示,家庭月平均收入<3000元、肿瘤转移、社会支持低水平、希望水平低是NPC放化疗患者预期性悲伤水平的影响因素(P<0.05)。结论 NPC放化疗患者预期性悲伤水平较高,可能受家庭经济差、社会支持少、希望水平低、肿瘤转移等因素影响。

目的 探讨RNA结合锌指蛋白36(ZFP36)在MRTX849研究购买缺氧/复氧(H/R)诱导的心肌细胞损伤和自噬中的作用及分子调控机制。方法 H9C2大鼠心肌细胞感染ZFP36过表达慢病毒(OE-ZFP36)或其阴性对照慢病毒(OE-ZFP36 NC)构建稳转细胞株；转染ATG4D过表达质粒(OE-ATG4D)提高ATG4D表达。H/R处理诱导心肌细胞损伤；将H9C2细胞分为对照组、H/R组、OE-ZFP36 NC+H/R组、OE-ZFP36+H/R组、OE-ATG4D NC+H/R组、OE-ATG4D+H/R组、OE-ZFP36+OE-ATG4D NC+H/R组和OE-ZFP36+OE-ATG4D+H/R组。各组细胞应用Western blotting检测ATG4D、Beclin1、LC3和ZFP36蛋白表达；实时荧光定量PCR(qPCR)检测ZFP36和ATG4D mRNA表达；CCK-8检测细胞活性；酶联免疫吸附法(ELISA)检测白介素6(IL-6)和肿瘤坏死因子(TNF-α)水平；DCFH-DA法检测活性氧(ROS)水平；SOD试剂盒检测SOD水平；流式细胞术检测细胞凋亡；细胞免疫荧光检测LC3自噬体；双荧光素酶报告基因实验检测ZFP36和ATG4D mRNA的结合。结果 与对照组比较，H/R组中细胞活性降低，IL-6和TNF-α水平提高，ROS水平升高而SOD水平降低，细胞凋亡增加；ATG4D、Beclin1蛋白表达上调，同时LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值也显著增加；且ZFP36表达上调(P<0.05)。与OE-ZFP36 NC+H/R组比较，OE-ZFP36+H/R组中细胞活性提高，IL-6和TNF-α水平降低，ROS水平下降而SOD水平升高，细胞凋亡减少，且ATG4D、Beclin1蛋白表达下调，LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值也显著下调(P<0.05)。与感染OE-ZFP36 NC慢病毒比较，感染OE-ZFP36慢病毒降低ATG4D 3′-UTR报告基因的荧光素酶活性，降低ATG4D mRNA稳定性，下调H/R诱导的ATG4D mRNA表达(P<0.05)。与OE-ATG4D NC+H/R组相比，OE-ATG4D+H/R组中的ATG4D mRNA和蛋白表达显著上调，且细胞活性降低，IL-6和TNF-α水平增高，ROS水平升高而SOD水平降低，细胞凋亡增加(P<0.05)。与OE-ZFP36+OE-ATG4D NC+H/R组比较，OE-ZFP36+OE-ATG4D+H/R组中细胞活性降低，IL-6和TNF-α水平增高，ROS水平升高而SOD水平降低，细胞凋亡增加(P<0.05)。结论 ZFP36在H/R诱导的心肌细胞损伤acute oncology中表达上调，过表达ZFP36抑制了H/R诱导的心肌细胞损伤，并通过调控ATGAY-22989生产商4D抑制自噬，进而抵抗心肌细胞H/R损伤，证明ZFP36是抵抗心肌缺血再灌注损伤的重要调控分子。