PI3K抑制剂

水稻细菌性条斑病是由稻黄单胞菌稻生致病变种(Xanthomonas oryzae pv. oryzicola， Xoc)所引起，尽管该病是水稻粮食生产中的严重病害之一，但目前对Xoc致病的分子机理研究较少。我们的前期工作对广西农科院分离到的Xoc菌株GX01进行基因组进行分析，发现一个编号为XOCgx＿2828的基因编码一个黄单胞菌Bucladesine IC50毒力调控蛋白XrvA。为了解该基因在Xoc致病过程中的作用，本工作采用自杀质粒pK18mobsacB介导的方法构建了xrvA基因的缺失突变体，并对突变体进行Calbiochem Probe IV反式互补。表型分析发现，xrvA基因突变体ΔxrvA在寄主植物水稻上的致病力无显著变化，其在非寄主植物烟草叶片上引起的过敏反应与野生型菌株基本一致。突变体的胞外多糖产量及胞外酶活性与野生型基本一致，但其运动性却显著增强。转录组分析发现，在营养丰富培养基NB中培养时，突变体ΔxrvA中很多与运动性相关基因的转录水平均升高；而RT-qPCR分析发现，在基本培养基XVM2中培养时，这些运动性相关基因在xrvA突变体中的表达均明显升高。这表明Xoc中的XrvA与病原菌的致病力无关，但能够通过调控运动相关基因的表达水平来调控细胞的运动性。综上所AM-2282述，本研究通过对Xoc中xrvA的基因的功能进行分析，发现不同黄单胞菌的XrvA对病原菌的致病性调控存在明显差异的，这有利于了解植物病原细菌与植物相互作用的分子机理，为日后防治水稻病害提供知识基础。

巨核细胞增生不良及血小板释放障碍在免疫性血小板减少症（ITP)中的致病作用日趋突显,并作为该病的治疗靶点而被广泛研究.升血小板胶囊在临床上可有效提高ITP患者的血小Pexidartinib MW板数量,但作用机制未知.用升血小板胶囊悬液通过灌胃处理Bal/c小鼠14 d,再腹腔注射CD41单抗造ITP模型并观察血小板回升情况.通过病理切片、流式分析、分选、RT-PCR、RNA-seqVP-16体内等技术分析升血小板胶囊对巨核细胞增殖及血小板释放的作用.结果表明,升血小板胶囊治疗组的ITP模型鼠血小板回升速度显著高于对照组;巨核细胞数量及血小板释放相关Congenital CMV infection凋亡蛋白表达增加;应用血小板生成素(TPO)受体及I型干扰素表达增加;JAK2-STAT信号通路被显著激活,均可促进巨核细胞增殖及血小板释放.本研究证明升血小板胶囊可以通过JAK2-STAT信号通路增加巨核细胞数量、促进巨核细胞血小板释放治疗ITP.

目的：依据肺腺癌（LUAD）患者铁死亡与长链非编码RNA(lncRNA)之间的相关性，结合免疫分型构建新型风险评分模型以评估LUAD患者的预后。方法：基于生物信息学技术下载TCGA数据库中LUAD样本转录组数据和临床数据，获取来自FerrDb数据库铁死亡相关的基因，通过“caret”包将整理后的504例LUAD样本随机分为50%训练集与50%验证集，采用Pearson相关性分析、单因素Cox回归得到与LUAD预后有关的铁死亡相关lncRNA，利用R软件的“ConensusClusterPlus”包和CIBERSORT软件进行免疫相关分析，LASSO回归分析建立probiotic supplementation铁死亡相关lncRNA模型，受试者工作特征（ROC）曲线及曲线下面积（AUC）评估预后模型的效能，并通Roxadustat体外过验证集进行验证。结果：单因素Cox及LASSO回归分析筛选出9个铁死亡相关lncRNA构成的风险评分模型。单Tezacaftor小鼠因素以及多因素Cox回归分析均显示，本预后模型可以作为一个独立的预后因素（P<0.001），该模型在训练集、内部验证集及外部验证集中均具有较好的预测效能。结论：本研究构建的LUAD患者风险评分模型可作为一种新的独立预后评估手段，或可具有进一步应用的价值。

背景及目的:结直肠癌(colorectal cancer,CRC)是人类常见的恶性肿瘤之一,在全球,结直肠癌的发病率排名第三,死亡率排名第二。在我国,结直肠癌发病率和死亡率呈上升趋势。过去的几十年里,我们对结直肠癌的了解不断加深。但是,仍然有相当一部分的病人预后较差。所以,探索各个信号通路及其相关基因对结直肠癌的影响有助于提高我们对结直肠癌的认知、改善结直肠癌患者的预后。有研究表明,PI3K-AKT信号通路在结直肠癌、乳腺癌等多种癌症的发生发展过程中发挥重要作用。PIK3CA基因作为PI3K-AKT通路中的一个关键基因,它的突变会引起PI3K催化活性异常增强,促使细胞发生癌变。PIK3CA基因与结直肠癌密切相关,尽管之前有研究已经报JNJ-42756493抑制剂道过PIK3CA基因对结直肠癌的影响,但是,目前仍然没有统一的定论。之前的研究更多的集中在转移性结直肠癌中,对于PIK3CA基因在非转移性结直肠癌中的研究还并不完善。并且,对于PI3KCA基因常见外显子9和外显子20的突变在非转移性结直肠癌中的研究也寥寥无几。因此,在本研究中,我们基于TCGA数据和本院数据,对PIK3CA基因及其常见外显子突变在非转移性结直肠癌中的作用进行了联合研究,旨在探讨PIK3CA基因在非转移性结直肠癌中的发生情况及其意义。方法:1、从TCGA数据库中下载结直肠癌患者的临床数据资料以及基因表达资料,筛选出非转移性结直肠癌病例。计算PIK3CA突变率及各个外显子突变率。分析PIK3CA突变在非转移性结直肠癌中与临床病理特征的相关性。同时,对于突变率前二的外显子(外显子9和外显子20),分别分析外显子突变在非转移性结直肠癌中与临床病理特征的相关性。对PIK3CA突变在非转移性结直肠癌、非转移性结肠癌和非转移性直肠癌中分别进行预后分析。分别分析突变率前三的外显子(外显子1、9、20)对非转移性结直肠癌的预后影响。2、按照纳入和排除标准,收集本院2014年12月至2021年12月非转移性结直肠癌患者相关信息并进行生存随访,同时对这些非转移性结直肠癌患者进行PIK3CA基因检测。计算PIK3CA突变率及各个外显子突变率。分析PIK3CA突变在非转移性结直肠癌中与临床病理特征的相关性。同样,分别分析外显子9和20突变在非转移性结直肠癌中与临床病理特征的相关性。分析PIK3CA突变在非转移性结直肠癌、非转移性结肠癌和非转移性直肠癌中的预后情况。分别分析外显子9和20突变对非转移性结直肠癌的预后影响。结果:1、在TCGA数据中,PIK3CA基因在非转移结直肠癌中的突变率为26.3%,在非转移性结肠癌中,PIK3CA突变率为30.0%,在非转移性直肠癌中,PIK3CA突变率仅为15.7%。在非转移性结直肠癌中,外显子9、外显子20和外显子1突变率位居前三,分别为10.3%、7.1%和5.6%。外显子9的E545K、E542K,外显子20的H1047R和外显子1的R88Q是突变频率较高的几个热点突变。进一步的分析发现,非转移性结直肠癌患者PIK3CA基因突变型与野生型在肿瘤部位(p=0.003)、TNM分期(p=0.011)、区域淋巴结转移(p=0.011)中具有统计学差异。外显子9突变型与野生型在肿瘤部位(p=0.038)中有统计学差异。外显子20突变型与野生型在肿瘤部位(p=0.002)、区域淋巴结转移(pFlow Antibodies=0.045)中有统计学差异。Kaplan-Meier分析结果显示,在非转移性结直肠癌中,PIK3CA突变型与野生型的总生存期(OS)无显著差异(p=0.753);在非转移性结肠癌中,PIK3CA突变型与野生型的OS也无显著差异(p=0.836);同样的,在非转移性直肠癌中,PIK3CA突变型与野生型的OS无显著差异(p=0.963)。具体到外显子1、9和20,在非转移性结直肠癌中,外显子1突变型和野生型OS无显著差异(p=0.402);外显子9突变型与野生型的OS无显著差异(p=0.585);外显子20突变型与野生型的OS也无显著差异(p=0.386)。2、在本院数据中,PIK3CA基因在非转移性结直肠癌中突变率为7.8%,非转移性结肠癌中突变率为9.4%,非转移性直肠癌中突变率为4.6%。在非转移性结直肠癌中,外显子9突变率为2.9%,外显子20突变率为4.9%。非转移性结直肠癌患者PIK3CA突变型与野生型在年龄(p=0.032)、肿瘤部位(p=0.029)、TNM分期(p=0.019)和区域淋巴结转移(p=0.007)中有统计学差异。外显子9突变型与野生型在年龄、肿瘤部位、区域淋巴结转移、TNM分期等临床病理特征中均无统计学差异。外显子20突变型与野生型在年龄(p=0.001)、肿瘤部位(p=0.029)、TNM分期(p=0.001)和区域淋巴结转移(p=0.015)中有统计学差异。Kaplan-Meier分析结果显示,在非转移性结直肠癌中,PIK3CA突变型与野生型的OS无显著差异(p=0.567);在非转移性结肠Taurine试剂癌中,PIK3CA突变型与野生型的OS也无显著差异(p=0.531);同样的结果在非转移性直肠癌中也被发现,PIK3CA突变型与野生型的OS无显著差异(p=0.774)。具体到外显子,在非转移性结直肠癌中,外显子9突变型与野生型在OS上无显著差异(p=0.354)。外显子20突变型与野生型在OS也无显著差异(p=0.895)。结论:1、PIK3CA基因突变与非转移性结直肠癌患者的预后无关。2、在非转移性结直肠癌中,PIK3CA基因突变与年龄、肿瘤部位、TNM分期和区域淋巴结转移有关。3、在非转移性结直肠癌中,PIK3CA外显子9突变与肿瘤部位有关;4、在非转移性结直肠癌中,PIK3CA外显子20突变与年龄、肿瘤部位、TNM分期和区域淋巴结转移有关。

血栓性血小板减少性紫癜（thrombotic thrombocytopenic purpura, TTP）是一种罕见但有致命性的血栓性血液病。TTP分遗传型（hereditary）和免疫型（immune-mediated）。遗传型TTP是由于ADAMTS13(adisintegrin and metalloprotease with thrombospondin-1 repeats, 13)基因缺陷所致，而免疫型TTP则由ADAMTS13的自身抗体抑制了其血浆活性所致。准确和及时地对疑诊TTP的患者进行诊断和分型，并将TTP与补体介导的溶血性尿毒症综合征（complement-mediated hemolytic uremic syndrome, cHUS）和其他原因所致的血栓性微血管病（thrombotic microangiopathy）相鉴别，是近年来靶向治疗成功的关键。血浆ADAMTS13活性和抑制物（或自身抗体）的检测对TTP可疑患者的诊断和进一步处理有着极其重要的临床指导意义。三期临床试验和临床实践均表明，血浆置换（thelinear median jitter sumrapeutic plasma exchange, TPE）、类固醇皮质激素（corticoMLN4924浓度steroids）、卡普拉西族单抗（caplacizumab）和利妥昔单抗（ritux点击此处imab）四联疗法对急性免疫性TTP的治疗有效且安全。这种新疗法，可显著加速血小板计数恢复正常，减少治疗期间病情的反复，并缩短重症监护室和普通病房住院的时间。更重要的是，这种四联疗法可能降低TTP所致的死亡率和持续性微血栓所致的并发症。本文将如何诊断和处理TTP的一些最新进展作一简述。

目的 探讨特纳综合征（TS）患儿不同染色体核型与自身免疫性甲状腺疾病（AITD）发生率及甲状腺功能的关系。方法 回顾性收集93例特纳综合征患儿临床资料，分析AITD及甲状腺功能异常在各组染色体核型中的详细分布情况及二者之间的关联。结果 93例特纳综合征患儿初诊时有21例（22.6%）合并AITD，其中17例甲状腺功能正常，1例亚临床甲状腺功能减退（甲减），1例临床甲减，selleck激酶抑制剂2例甲状腺功能亢进（甲亢）。21例AITD患儿在中位时间间隔3年定期复查，以评估甲状腺功能状态随时间的变化，其中10例甲状腺功能正常，4例亚临床甲减genetic distinctiveness，3例临LEE011说明书床甲减，4例甲亢。AITD组按照核型被分为3个亚组(A1亚组8例45,X染色体单体、A2亚组1例嵌合体型及A3组12例X染色体结构异常)，随访结束时，各组的甲状腺功能异常的发生率随时间推移明显增加。结论 特纳综合征患儿随着时间的推移甲状腺功能出现逐步恶化，并且AITD初诊时年龄越大，甲状腺功能恶化发生率越高。特纳综合征患者需要定期监测甲状腺功能并及时处置。

目的 探讨骨化性肌炎的临床病理学特征。方法 收集11例骨化性肌炎的临床和病理资料，行免疫组化和FISH检测，并复习相关文献。结果 11例患者中男性5例，女性6例，年龄7～62岁(中位年龄41),病变发生于大腿7例，手掌部1例，小腿1例，上肢1例，臀部1例。9例有明确外伤史BMS-354825，1例有肌肉注射史，1例否认有外伤史。组织学病变中均见不规则新生骨，部分病例可见未钙化的编织状骨小梁、钙化骨，其中5例可见骨母细胞增生活跃伴梭形纤维细胞增生，2例纤维母细胞有轻度不典型性，可见核分裂象，2例间质可见淋巴细胞散在并局灶聚集。其中1例标本病变典型，由内向外分为中心带、中间带和边缘带nonmedical use，7例病变具有分带倾向。免疫表型：vimentin和SATB2均呈弥漫强阳性，SMA、MSA和desmin呈不同程度阳性，组织细胞和破骨细胞中CD68散在阳性，S-100、SOX-10、β-catenin、CD34、MyoD1、Myoglobin和CK均阴性，Ki-67增殖指数1%～30%。2例行FISH检测，均显示USP6基因断裂阳性。结论 诊断骨化性肌炎时需结合病史、临床selleck KD025特征、影像学表现、免疫表型及分子病理检测，注意与骨肉瘤等肿瘤鉴别。

目的 探讨纤维软骨性结构不良(fibrocartilaginous dysplasia, FCD)的临床病理和分子特征。方法 回顾性分析23例FCD的临床病理和影像学特IACS-010759配制征，运用免疫组化和Sanger测序法分析FCD的免疫表型和分子特征。结果 23例FCD中男性14例，女性9例，发病年龄9～55岁，中位年龄19岁。3例为多骨性病变，其余为单骨性病变。病变主要发生于股骨(18/23),尤其好发于股骨颈；余肱骨2例，胫骨、髂骨和指骨各1例。影像学大多数表现为界限清楚的膨胀性磨玻璃样背景中见点状、环状或絮状钙化。镜检：病变内可见增生的纤维母细胞和不LY2157299成熟编织骨，以及多少不等的高分化透明软骨成分及软骨化骨。免疫表型：oncology staff纤维骨性成分均表达SATB2,Ki-67增殖指数低，不表达CK、CK5/6、p63等上皮标志物。6例分子检测提示GNAS基因第8外显子突变，分别为CGT>TGT导致的p.R201C位点突变(2例)和CGT>CAT导致的p.R201H位点突变(4例),不同形态区域突变位点一致；IDH1/IDH2均为野生型。结论 FCD是少见纤维结构不良特殊形态学亚型。纤维骨性成分和软骨成分同源，软骨成分是纤维结构不良发生、发展过程中的组成部分。纤维结构不良中出现软骨，再结合影像学改变和分子检测可辅助FCD的诊断。

目的 探索局部枸橼酸钠联合低分子肝素治疗对行连续性肾脏替代治疗(CRRT)危重症患者抗凝效果的影响。方法INCB28060供应商 前瞻性选取2018年4月至2021年4月国药葛洲坝中心医院收治的80例行CRRT危重症患者作为研究对象，根据随机数字表法分为观察组(41例)和对照组(39例)。对照组采用局部枸橼酸钠抗凝，观Dibutyryl-cAMP研究购买察组采用局部枸橼酸钠联合低分子肝素抗凝。比较2组治疗前后凝血功能指标、血清电解质、pH值、血常规指标以及抗凝有效性和血滤器使用寿命。结果 治疗后24 h, 2组活化部分凝血活酶时间、凝血酶时间、凝血酶原时间均长于治疗前，且观察组均长于对照组[(51.7±4.7)s比(43.3±2.2)s、(18.96±1.24)s比(17.86±0.31)s、(20.5±2.6)s比(18.2±2.2)s](均P<0.05);2组血清氯离子、钙离子、钠离子、钾离子水平均低于治疗前，且观察组均低于对照组(均P<0.05);2组血小板Carcinoma hepatocellular计数、血红蛋白、白细胞计数均低于治疗前(均P<0.05),但组间比较差异均无统计学意义(均P>0.05)。治疗后24 h,观察组抗凝有效性0级比例高于对照组，Ⅱ、Ⅲ级比例均低于对照组(均P<0.05)。观察组血滤器使用寿命长于对照组[(30±3)h比(28±4)h],但组间比较差异无统计学意义(t=1.918,P=0.059)。结论 局部枸橼酸钠联合低分子肝素用于行CRRT危重症患者中，能够延长血滤器使用寿命，维持机体电解质平衡。

羟自由基(~·OH)具有活性高、寿命短、氧化性强的特点,其浓度波动与多种生理过程以及疾病的发生发展密切相关。利用高灵敏与高选择性的荧光探针分析研究~·OH在不同生理以及病程中的波动变化,对于探究疾病的分子机制与评价可能的治疗手段具有重要意义。为此,本研究首先设计合成了一种新型荧光探针NADHB用于~·OH的成像检测。该探针采用3,5-二羟基苄氧基作为~·OH特异性识别基团,能够与~·OH反应后脱除,从而释放出萘酰亚胺荧光团,导致荧光开启。NADHB具有高特异性、高灵敏度与良好的生物相容性,能够在细胞与活体水平实现~·OH的原位荧光成像。首先,利用NADHB探究了高浓度同型半胱氨酸(Hcy)对于神经细胞的影响以及相应的调控机制。结果显示,Hcy可使细胞内~·OH水平升高,且该过程受到N-甲基-D-天冬氨酸(NMDA)受体和NADPH氧化酶的调控。Hcy激活NMDA受体启动下游信号通路,使NADPH氧化酶催化产生过量O_2~(·-),后者进一步通过Haber–Weiss反应与Fenton反应产生~·OH,导致谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)表达量降低,表明神经细胞发生铁死亡。此外,构建了高同型半胱氨酸血症小鼠模型,并通过行为学测试证明,高同型半胱氨酸血症诱导小鼠发生阿尔兹海默样痴呆。采用NADHB对小鼠脑内~·OH进行原位荧光成像,结果显示,相较于正常小鼠,高同型半胱氨酸血症小鼠脑内~·OH水平明显升高,而给selleck HPLC予叶酸处理的高同型半胱氨酸血症小鼠脑内~·OH水平明显降低。小鼠脑内的~·OH水平与阿尔兹海默样痴呆的严重程度呈正相关,表明~·OH是高同型半胱氨酸血症诱发阿尔兹海默样痴呆的关键致病因素。利用探针NADHB揭示了~·OH在阿尔兹海默样痴呆病变过程中所起的重要作用及相关的信号转导通路,提供了阿尔兹海默病预防与治疗的新视角。药物的时空可控释放对于提高用药安全性、实现疾病的精准治疗具有重要意义。阿霉素作为经典蒽环类抗肿瘤药物已被应用于临床治疗中,但是严重的心脏毒性限制了阿霉素的临床应用范围。实现阿霉素在肿瘤部位的可控释放将有望降低其心脏毒性,提高用药安全性。另一方面,超声波具有高时空可控、高组织穿透深度以及成本低廉等优点,已被广泛应用于临床诊断与治疗中。超声波可通过超声空化效应产生高浓度~·OH,可作为~·OH的安全来源。3,5-二羟基苄氧基与~·OH之间的特异性识别反应可用于实现~·OH介导的阿霉素可控释放。基于以上,我们将3,5-二羟基苄氧基与阿霉素的氨基相连,构建了超声激活型阿霉素前药DOXDHB。超声产生的~·OH能够与3,5-二羟基苄氧PUN30119说明书基反应使其脱除,从而释放阿霉素,实现抗肿瘤药物阿霉素的超声激活可控释放。研究结果表明,前药DOXDHB的细胞毒性与小鼠心脏毒性显著低于阿霉素,具有良好的生物安全性。DOXDHB可通过超声在肿瘤细胞内可控释放阿霉素,从而发挥抗肿瘤作用。采用~·OH介导的超声激活释放策略,实现了阿霉素的超声可控释放,有效降低其心脏毒性,为设计开发新型的激活释放型前药提供了新的思路。综上所述,基于3,5-二羟基苄氧基与~·OH之间的特异性识别反应,本论文构建了一种检测~·OH的荧光探针以及一种~·OH激活释放型前药。探针NADHB能够实现对细胞以及活体小鼠脑内~·OH的波动变化进行原位成像监测,并揭示了~·OH在高同型半胱氨酸血症诱导小鼠阿尔兹海默样痴呆过程中所起的关键性作用。前药DOXDHB能够被超声产生的~·OH特异性激Shoulder infection活,可控释放抗肿瘤药物阿霉素,在保持阿霉素抗肿瘤作用的同时,有效降低其心脏毒性。上述研究结果为~·OH相关的疾病机制研究以及药物的可控释放提供了新的思路。