目的:龋病是一种在世界范围内广泛流行的慢性疾病,在我国龋病具有患病率高和治疗率低的特点。它不仅是危害口腔健康的主要疾病,也是影响全身健康的重要因素。因此,对龋病施行预防及早期治疗具有非常重要的意义。近年来,天然植物提取物成为龋病预防领域的研究热点,其中五倍子的提取物没食子酸(gallic acid,GA)已被证实不仅具有杀灭或抑制致龋菌生长、产酸和抑制釉质或牙本质脱矿的作用,还具有促进再矿化的功效。另外,GA的生物安全性高。二氧化碳(carbon dioxide,CO_2)与环氧丙烷(propylene oxide,PO)的共聚物——聚HRI hepatorenal index碳酸丙烯酯(poly(propylene carbonate),PPC)是一种具有良好生物相容性和生物降解性的高分子聚合物,在医用生物材料领域已被广泛研究,但将其应用于口腔疾病的防治则很少报道。本研究以PPC为载体搭载GA,旨在合成一种患者能够自行粘贴在牙面上使用的GA-PPC防龋膜,能够起到缓释抗菌再矿化的作用,且安全易于操作,为未来的防龋方式提供新的思路。方法:1.采用熔融共混法制备GA-PPC膜(GA含量分别为0wt%、1.25wt%、2.5wt%、5wt%、10wt%、15wt%)作为实验组,同时制备5wt%Na F-PPC贴片作为阳性对照组。利用扫描电子显微镜(scanning electron microscope,SEM)、电子万能试验机、热重法(thermogravimetry,TG)、差示扫描量热法(differential scanning calorimetry,DSC)表征其断面形貌、力学性能及热性能,酒石酸亚铁溶液法测定其药物释放情况。2.通过分析变异链球菌(Streptococcus mutans,S.mutans)的生长趋势及结晶紫染色、苯酚硫酸法、平板计数、活死菌染色探究GA-PPC膜对浮游细菌和致龋生物膜的杀灭和抑制作用,验证其抗菌有效性。3.采用CCK-8法测定GA-PPC膜对L-929细胞的毒性作用,测定其生物相容性。结果:1.合成了分子量为4万,厚度为0.2 mm的GA-PPC膜。GA成功地负载到了PPC中并能够均匀分散。除15wt%GA组外,其余各组的拉伸强度与纯PPC相比没有明显变化,均大于3 MPa,力学性能较好。GA-PPC膜的热稳定性较Na F-PPC贴片好,玻璃化转变温度(glass transition temperature,T_g)与纯PPC的相差不大。当处于口腔温度时,GA能够从PPC中持续缓慢地释放出来。2.GA-PPC膜能够抑制变异链球菌浮游菌的生长和致龋生物膜的形成,并且其抑制作用随GA含量的增加而增强,当GA含量超过5wt%时,即表现出良好的抗MCC950分子量菌效AY-22989体内果,当GA含量达10wt%时,抗菌效果与含5wt%Na F的PPC相当。3.纯PPC不具有细胞毒性,当GA-PPC膜中GA的含量不超过10wt%时,细胞毒性处于安全评级内,GA含量在10wt%和15wt%之间时,细胞毒性较大。结论:合成的GA-PPC膜具有较好的力学和热学性能,GA能够从PPC中持续缓慢地释放出来,GA含量为5～10wt%的PPC膜既能有效抗菌,又表现出良好的生物相容性,有希望实际应用于龋病的早期预防。
祖师麻皮肤刺激性观察和基于生物信息学的机制预测
目的:观察祖师麻干浸膏粉及不同萃取部位的皮肤刺激性,并基于生物信息学预测其刺激性成分及作用机制。方法:将SD大鼠随机分为完整皮肤组和破损皮肤组,观察连续给药7 d和停药后3 d皮肤状况。运用中药系统药理学数据库与分析平台(TCMSP)查询祖师麻刺激性成分和作用靶点。通过GeneCards数据库、在线人类孟德尔遗传数据库(OMIM)等数据库收集疾病靶点,运用Metascape平台进行基因本体(GO)富集以及京都基因和基因组百科全书(KEGG)富集分析,将核心靶点与祖师麻刺激性成分进行分子对接。结果:祖师麻干浸膏粉低、中剂量组对破损皮肤有轻微红斑、水肿反应;祖师麻干浸膏粉高剂量组、石油醚部位和二氯甲烷selleck HPLC部位对完整皮肤和破损皮肤均有轻微红斑、水肿反应;乙酸乙酯部位和水层部位均无红斑、水肿反应。2)从祖师麻活性成分中筛选出7种刺激性成分,通路富集的主要通路为磷酸肌醇-3-激酶/蛋白激酶B确认细节(PI3K-AKT)信号通路、细胞增殖的肉瘤基因(Ras)信号通路、促分裂原活化的蛋白激酶(MAPK)信号通路、端粒结合蛋白(Rap1)信号通路和松弛素(Relaxin)信infection risk号通路等。分子对接结果中瑞香毒素、木犀草素以及大黄素甲醚与核心靶点的结合最稳定。结论:祖师麻干浸膏粉高剂量下有轻微皮肤刺激性,可能是存在于石油醚和二氯甲烷部位中的瑞香毒素、木犀草素以及大黄素甲醚等通过多靶点、多通路的复杂作用促进炎症介质的生成,引起皮肤轻微红斑和水肿。
大麦外颖发育调控基因eog1的克隆与机制解析
【研究背景】禾谷类作物小穗与花器官的正常发育是保障结实与籽粒产量的前提。外颖的出现标志着小穗分生组织开始向小花分生组织转变,克隆外颖发育的关键调控基因并明确其分子作用机制,对于完善植物花器官发育的调控模型具有重要意义。大麦eog1(elongated outer glume 1)突DNA Methyltransferas抑制剂变体最早报道于1906年,该遗传材料表现出外颖伸长的表型,是研究花器官发育的重要遗传材料,但是其功能基因尚未克隆。【材料与方法】本研究以大麦地方品种”哈铁系”(HTX)和由它衍生的多个外颖伸长等位突变体为材料,通过遗传分析和基因组测序等方法,克隆并验证调控外颖发育的关键基因;通过亚细胞定位、时空表达谱等方法初步鉴定该基因的表达模式;利用酵母文库筛选、转录组差异分析初步鉴定该基因的调控网络。【结果Emerging marine biotoxins与分析】通过对HTX和外颖突变体M9630杂交后代的表型鉴定结果,确定外颖伸长由一个隐性基因控制,等位测验证实其与eog1互为等位基因;利用HTX与M9630组合的F2Tezacaftor配制遗传群体分离单株混池测序(BSA)、以及对其他外颖突变体进行候选基因Sanger测序,确定了导致外颖伸长的基因,EOG1基因注释为转录因子。通过烟草瞬时表达及原生质体瞬时表达,鉴定到野生型EOG1和突变型eog1蛋白均定位于细胞质膜及细胞核中;时空表达谱分析发现,野生型EOG1基因在外颖表达量最高,突变体eog1基因在雄蕊表达量最高;酵母文库筛选获得32个EOG1的互作蛋白;转录组差异分析表明受EOG1调控的基因大量富集在MYB类转录因子通路。【结论】本研究克隆了调控大麦外颖发育的基因eog1,推测其作为一个转录抑制因子调控外颖发育。本研究揭示了大麦外颖发育的调控途径,为阐明不同植物花发育调控机制的异同奠定了基础。
秸秆覆盖对油茶-花生间作系统土壤氮转化的影响研究
油茶(Camellia oleifera)是我国主要的经济林树种,尤其广泛种植于湖南、浙江、江西等南方地区。土壤氮素在油茶生长发育方面发挥着关键作用,秸秆覆盖的有效利用被认为是当前油茶产业高质量发展的关键因素,也是氮素添加的一种有效输入方式,秸秆覆盖对油茶-花生间作系统土壤氮转化速率的影响目前尚不清楚。本研究以油茶-花生间作系统为研究对象,在三个不同时段下(T1:覆盖50天、T2:覆盖100天和T3:覆盖150天)分别设置粉末覆盖(W)、整杆覆盖(S)和不覆盖(CK))三种不同秸秆覆盖处理。测定了土壤理化性质、氮组分含量和相关酶活性,并分析计算氮转化速率以及采取高通量测序方法分析氮功能微生物(AOA、nirK和nirS)群落特征,以期探究秸秆覆盖对油茶-花生间作系统土壤氮转化的影响。主要研究结果如下Adavosertib化学结构:(1)与CK相比,秸秆覆盖处理下的土壤含水率、容重、pH值几乎没有变化,且在土层之间也无显著差异;随覆盖时间的增加,土壤含Biochemistry and Proteomic Services水率和容重增加。随着秸秆覆盖时间的增加,土壤全氮含量呈现先减少后增加的趋势,土壤有机碳和土壤总磷含量略微降低;随土壤深度增加土壤有机碳、全氮、总磷含量呈现减少的趋势。土壤蛋白酶活性的变化范围为26.41-80.35 mg·g-1·d-1,T1秸秆覆盖期间,秸秆覆盖显著提高了土壤蛋白酶活性(p<0.05),且土壤蛋白酶活性均表现出表层土高于深层土壤的趋势。土壤硝酸还原酶活性随秸秆覆盖时间的增加而增加,而随土层深度的增加呈现先增加后减少的趋势,整体变化范围为0.01-1.34 μmol·kg-1·d-1。土壤亚硝酸还原酶活性整体变化范围为0.14-2.92 μmol·kg-1·d-1,秸秆覆盖处理对油茶-花生间作土壤亚硝酸还原酶活性具有提升作用,而土层深度对土壤亚硝酸还原酶活性没有显著影响。(2)不同秸秆覆盖处理中氮组分含量均呈现季节性动态变化,土壤有效氮含量整体确认细节变化范围为6.30-40.60 mg·kg-1,硝态氮含量变化范围为0.25-8.77 mg·kg-1,铵态氮含量变化范围为0.01-20.84 mg·kg-1,微生物生物量氮含量变化范围为0.02-9.83 mg·kg-1;土壤有效氮和硝态氮含量基本不受秸秆覆盖影响,粉末秸秆覆盖显著影响土壤铵态氮的含量,秸秆覆盖对土壤微生物生物量氮含量有显著的影响。在秸秆覆盖前期,秸秆覆盖处理没有明显改变土壤矿化速率,秸秆覆盖后期(平均矿化速率为0.234 mg.kg-1·d-1)土壤矿化速率显著高于前期(平均矿化速率为-0.007 mg.kg-1·d-1),秸秆覆盖后期(平均氨化速率为0.152 mg·kg-1·d-1)土壤氨化速率显著高于前期(平均氨化速率为-0.006 mg·kg-1·d-1),秸秆覆盖后期(平均硝化速率为0.082 mg·kg-1·d-1)土壤硝化速率显著高于前期(平均硝化速率为-0.001 mg·kg-1·d-1)(p<0.05),其中氨化速率和硝化速率呈现与矿化速率趋势一致。在不同秸秆覆盖处理下,土壤氮转化速率与土壤有效氮和亚硝酸还原酶之间呈显著正相关关系(p<0.05),但与土壤有机碳呈显著负相关关系。(3)秸秆覆盖对土壤氮功能微生物群落α多样性具有普遍的积极影响,其中粉末秸秆覆盖的影响最为明显。不同覆盖处理下,AOA基因、nirK基因和nirS基因群落结构β多样性有显著差异,在T3覆盖时期最为显著。而覆盖处理中粉末秸秆覆盖处理对群落组成差异最为显著(p<0.05)。尽管不同秸秆覆盖方式氮功能微生物群落组成在属类别下种类相同,但土壤氮功能微生物群落结构不同属占比受秸秆覆盖处理影响。通过冗余分析发现粉末覆盖与土壤环境因子呈正相关关系,而整杆秸秆覆盖与氮功能微生物α多样性之间呈正相关关系(p<0.05)。综上所述,秸秆覆盖提高了油茶-花生间作系统土壤的养分,加快了土壤氮转化速率,丰富了土壤氮功能微生物群落多样性和结构功能。因此,秸秆覆盖措施被认为是改善土壤质量的有效途径。其中,粉末秸秆覆盖且覆盖时间达到T3时期的覆盖方式是最有效益的。本研究旨在为农作物秸秆剩余物的处置和油茶-花生间作系统秸秆覆盖的应用提供基础信息和科学参考,并为油茶林生态系统的可持续经营管理提供理论基础。
急性脑出血患者脑组织中小胶质细胞/巨噬细胞极化状态与血肿周围水肿的关系
目的 探讨急性脑出血患者脑组织中小胶质细胞/巨噬细胞(MG/MP)极化状态与血肿周围水肿的相关性。方法 选择2020年12月至2022年11月安阳市人民医院收治的急性脑出血患者52例为研究对象。所有患者行骨瓣开颅血肿清除术，获取手术通道上未受血肿侵犯的皮质区正常脑组织和血肿周围的破碎脑组织(血肿周围脑组织)Patent and proprietary medicine vendors,采用Western blot法检测脑组织中炎症因子白细胞介素(IL)-1β、IL-6、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、IL-10、转化生长因子-β(TGF-β)的蛋白表达水平，采用荧光定量聚合酶链反应检测购买GW-572016脑组织中IL-1β、IL-6、TNF-α、IL-10、TGF-β的mRNA表达水平，采用免疫荧光共聚焦技术检测脑组织中M1型、M2型MG/MP水平。收集患者手术前的CT影像资料，计算血肿周围相对水肿体积(r-PHE),根据r-PHE将患者分为高r-PHE组(2.0≤r-PHE<2.5)和低r-PHE组(1.5
曲美替尼对K-ras突变直肠癌细胞恶性行为、耐药蛋白及巨噬细胞极化的作用机制的研究
目的 探讨曲美替尼对K-ras突变直肠癌细胞恶性行为、耐药蛋白及巨噬细胞Protein Tyrosine Kinase抑制剂极化selleck化学的作用机制。方法 取K-ras突变直肠癌细胞HCT116,将其随机分为HCT116组(HC组)、西妥昔单抗+HCT116组(CE组)、低剂量曲美替尼+HCT116组(LT组)、中immediate body surfaces剂量曲美替尼+HCT116组(MT组)、高剂量曲美替尼+HCT116组(HT组),Transwell实验及划痕实验检测细胞恶性行为，MTT法检测药物敏感性，RT-PCR法检测耐药蛋白表达，免疫印迹法检测巨噬细胞极化相关指标。结果 与HC组相比，其余四组细胞侵袭、迁移及GST-π、P-gp、TopoⅡ、CD163表达显著降低(P<0.05),CD40蛋白表达显著升高(P<0.05);与LT组相比，MT组、HT组细胞侵袭、迁移及GST-π、P-gp、TopoⅡ、CD163表达显著降低(P<0.05),CD40蛋白表达显著升高(P<0.05),且HT组比MT组变化明显(P<0.05);HCT116细胞对西妥昔单抗与曲美替尼均敏感，但与西妥昔单抗相比，曲美替尼的IC_(50)明显更低(P<0.05)。结论 曲美替尼对K-ras突变直肠癌细胞具有显著疗效，可显著改善其恶性行为，抑制耐药蛋白表达，抑制巨噬细胞M2极化。
7-甲基鸟嘌呤的高效合成工艺研究
7-甲基鸟嘌呤（7-MG）是一种抑制DNA修复酶的天然化合物，被认为是潜在的抗癌候选药物。选用廉价易得的商业化试剂鸟苷和硫酸二甲酯为原料，连续进行两步实验制备7-甲基鸟嘌呤。第一步反应首先比较了碘甲烷、碳酸二甲酯和硫酸二甲酯的甲基化效果，结果表明硫酸二甲酯具有更好的反应效果，甲基化所需的反应条件温和，反应速率快且转化率高。优化了反应溶剂、原料比例、反应的pH值、反应温度和反应时间等实验条件，提高了反应效率和产率。对最终产品重结晶提纯的方法也进PARP抑制剂行了深入研究，优化筛选了几种常见的重结晶溶剂。结果表明当溶剂为水，pH值为9时重结晶效果最佳，重结晶产率为7PD-0332991 IC508%，产品纯度可达99.6%。第一步反应最佳实验条件为：反应温度：Primers and Probes25 ℃，反应溶剂：N，N-二甲基乙酰胺（DMAc），n（鸟苷）∶n（硫酸二甲酯）= 1∶2；第二步反应最佳实验条件为：反应温度：80 ℃，反应时间：6 h，pH值：2，两步总产率：93%。
Vm-milR21调控苹果黑腐皮壳侵染致病的功能和机理
苹果黑腐皮壳(VCL13900小鼠alsamali)引起的腐烂病是苹果最具毁灭性的枝干病害。微小核糖核酸(microRNA-like RNAs, milRNAs)在真菌生长发育、侵染致病和胁迫响应等过程中发挥重要作用。前期研究发现Vm-milR21在病菌侵染阶段特异性下调表达，推测其可能参与V. mali的侵染致病过程。【目的】本文对Vm-milR21的功能进行研究。【方法】制备Vm-milR21前体过表达和沉默转化株，评价不同转化株与野生型菌株表型差异。进而，通过实时荧光定量聚合酶链反应(quantitative real time polymerase chain reaction, qRT-PCR)和共转化技术验证Vm-milR21与其潜在靶标Vm-03494之间的靶向调控关系。在此基础上，构建Vm-03494的基因敲除突变体，并鉴定突变体表型。【结果】与野生型菌株相比，过表达转化株的菌丝生长速率以及对叶片和枝条的致病力均大幅降低，而沉默转化株无明显变化。Vm-miFulvestrantlR21能够序列特异性地抑制Vm-03494表达。相较于野生型菌株，Vm-03494敲除突变体菌丝生长速率和致病力均显著降低。【结论】Vm-milR21能够调控靶标基因Vm-03494表达参与病菌侵染过程。研究结果丰富了对真菌milRNAs功能的认知，同时为全面解析V. mali的致病机理提供了新的理论Medical Abortion依据。
小剂量螺内酯联合硝普钠对扩张型心肌病致心衰患者血管内皮功能及外周血sST2、sICAM-1的影响
目的:观察小剂量螺内酯联合硝普钠对扩张型心肌病(DCM)致心力衰竭(HF)的临床疗效。方法:选取2020-07-2021-08本院收治的66例DCM所致HF患者，随机将其分为常规组(nselleck HPLC=22)、对照组(n=22)和研究组(n=22)。常规组采用常规治疗，对照组在常规组基础上联合硝普钠治疗，研究组在对照组基础上联合小剂量螺内酯治疗。治疗3个月后分析三组患者治疗前后外周血血清内皮素(ET)、Saxitoxin biosynthesis genes一氧化氮合酶(NOS)、一氧化氮(NO)、可溶性生长刺激表Bafilomycin A1作用达基因2蛋白(sST2)、可溶性细胞黏附分子1(sICAM-1)水平变化，同时比较三组临床疗效及不良反应发生情况。结果:治疗前，三组患者各指标水平差异无统计学意义(P>0.05)。治疗后，三组血清ET、sST2及sICAM-1水平较治疗前均降低，血清NOS及NO水平较治疗前均升高(P<0.01);治疗后各组ET、sST2及sICAM-1水平呈常规组>对照组>研究组，研究组血清NOS、NO水平均高于常规组，差异均有统计学意义(P<0.01);治疗后，常规组与对照组血清NOS、NO水平比较差异均无统计学意义(P>0.05),研究组与对照组血清NOS、NO水平比较差异也无统计学意义(P>0.05)。研究组治疗总有效率高于对照组和常规组(P<0.01),对照组与常规组治疗总有效率差异无统计学意义(P>0.05);三组不良反应总发生率差异无统计学意义(P>0.05)。结论:小剂量螺内酯联合硝普钠治疗能有效改善DCM致HF患者血管内皮功能，减轻心肌损伤和心肌炎症，疗效良好，安全性高，具有较好的临床应用前景。
香附子全长转录组测序及生物信息学分析
目的：通过高通量测序技术获得香附子Cyperus rotundus L.全长转录组的信息特征，为深入挖掘香附子功能基因奠定基础。方法：通过PacBio Sequel高通量测序系统，对香附子根、茎、叶、花4个部位的混样进行全长转录组测序及生物信息学分析。结果：共获得195 722条环形一致性序列（CCS）获得188 243个高质量转录本，并注释了148 563个转录本，检测出4349个转录因子和95 118个简单序列重复（simple sequence repeat,SSR）位点，还预测到64 929个长链非编码RNA (lncRNA)和45 337个mRNA，并通过京都基因与基因组百科全书（KEGG）数据途径分析了13个参与萜烯合酶合成相关的基因，以及7个参与β-石竹烯biological implant合成相关的基因。结论：https://www.selleck.cn/products/lxh254.html获得了较为可靠的香附子全长转录组数据，这将显著增强对香附子发育过程中植物化学生物合成调控基础的理解，可为深入研究香附子生物学特性、相关代谢途径、信号通路及分子机制FUT-175提供数据支持。