PI3K抑制剂

目的：探讨miR-149-5p对胃癌细胞迁移侵袭能力的影响及分子机制。方法：qRT-PCR检测胃癌细胞株和组织标本中miR-149-5p的表达，分析其表达水平与胃癌患者临床病理特征参数及预后的相关性，建立过表达和干扰miR-149-5p的胃癌细胞株，Transwell实验检测miR-149-5p表达水平对胃癌癌细胞迁移侵袭能力的影响；生物信息学网站预测miR-149-5p的靶基因，采用荧光素酶报告基因实验加以验证。结果：miR-149-5p在胃癌组织和细胞株中均低表达（均P<0.05）。miR-149-5p的表达水平与胃癌患者的浸润深度（P=0.016）、淋巴结转移（P=0.001）和TNM分期（P=0.023）相关。miR-1Adavosertib小鼠49-5p低表达是胃癌患者总生存期的独立危险因素。与对照组相比，miR-149-5p mimics明显抑制胃癌细胞的迁移侵袭能selleckchem力（均P<0.01），而转染miR-149-5p inhibitors后得到了相反的结果（均P<0.05）。miR-149-5p靶向调控脂肪细胞增强结合蛋白1(Adipocyte enhancer binding protein 1,AEBP1)蛋白的表达。荧光素酶报告基因实验表明，miR-149-5p明显抑制了野生型AEBP1载体的荧光素酶活性（P<0.01），而突变型的荧光素酶活性不受影响。敲低AEBP1可部分逆转下调miR-149-5p对胃癌细胞迁移侵袭能力的影响。结论：miR-149Multiple markers of viral infections-5p在胃癌组织中低表达，通过靶向AEBP1负性调控胃癌癌细胞的迁移侵袭。

目的 探讨房颤一站式术后晚期房颤复发率及其危险因素。方法 纳入2019年3月～2021年7月因房颤就诊于空军军医大学第二附属医院心血管内科的患者318例，根据手术方式分为一站式组Religious bioethics（射频消融术联合左心耳封堵术，n=82）和单纯射频消融组（n=236），对比两组术后房颤晚期复发的情况。采用单因素及多因素Logistic回归分析一站式组内房颤晚期复发和未复发亚组间患者的年龄、性别、病程、房颤类型、LAD、LVEF和NLR等临床特征。结果 一站式组和单纯射频消融组在年龄、性别、病程、BMI、CHA2DS2-VASc评分、HASBLED评分、房颤类型、合并症、左心房内径、左室射血分数的差异均无统计学意义。比较两组患者住院时长，一站式组明显长于单纯射频消融组（8.4±2.8 vs. 6.7±2.1）天（PF-03084014纯度P<0.01），差异有统计学意义。一站式组发生围术期并发症9例（11%），单纯射频消融组发生14例（6www.selleck.cn/products/chir-99021-ct99021-hcl%），两组的差异无统计学意义,一站式组和单纯射频消融组术后均给予抗心律失常、抗凝药物治疗，两组药物使用率差别无统计学意义。一站式组术后房颤早期复发率高于单纯射频消融组（27%vs. 13%, P<0.01）,差异有统计学意义。两组术后晚期房颤复发率差异无统计学意义。多因素Logistic回归分析结果显示：房颤病程（OR:1.014,95%CI:1.000～1.027,P=0.05）、左心房内径（OR:1.182,95%CI:1.030～1.357,P<0.05）、术前中性粒细胞与淋巴细胞比率（OR:2.092,95%CI:1.146～3.819,P<0.05）和术后房颤早期复发（OR:13.884,95%CI:3.215～59.962,P<0.01）是一站式组术后房颤晚期复发的独立危险因素。结论 一站式手术安全有效，不加重射频消融术后房颤晚期复发风险。房颤病程、左心房内径、术前中性粒细胞与淋巴细胞比率和术后房颤早期复发是一站式手术房颤晚期复发的独立危险因素。

目的 探究年龄、房颤和舒张压对急性缺血性脑卒中重组组织型纤溶酶原激活剂(rt-PA)静脉溶栓后发生颅内出血转化的影响因素。方法寻找更多 采用随机抽样的方法，选取2020年1月至2021年12月蚌埠市第三人民医院卒中中心收治的采用rt-PA静脉溶栓治疗的急性缺血性脑卒中患者92例，根据是否发生颅内出血分为出血组(n=20)和非出血组(n=72)。对两组患者的临床资料进行单因素分析，对存在统计学差异的变量(年龄、房颤和舒张压)进行二元logistic回归，构建临床预测方程，检测方程的区分度和校准度，利用受试者工作特征(ROC)曲线分析影响因素的预测效度，用分层回归分析差异变量舒张压在年龄和是否出血转化间的中介效应。结果 两组患者年龄、房颤和舒张压Liproxstatin-1小鼠存在差异，二元logistic回归结果显示，年龄(OR=1.072,95%CI:1.007～1.142)、房颤(OR=12.980,95%CI:1.701～99.026)、舒张压(OR=1.076,95%CI:1.030～1.123)是rt-PA静脉溶栓后颅内出血的危险因素，ROC曲线分析显示，年龄[曲线下面积(AUC)=0.692,P=0.003,诊断界限值72.5岁)、舒张压Transperineal prostate biopsy(AUC=0.844,P<0.001,诊断界限值82.5 mmHg)和房颤(AUC=0.690,P=0.004)对出血转化有较好的预测效度，中介分析显示，舒张压、房颤在年龄和是否出血转化间起部分中介作用。结论 高舒张压、伴发房颤和老年是急性缺血性脑卒中rt-PA静脉溶栓后颅内出血发生的危险因素，rt-PA静脉溶栓前调整舒张压，针对房颤采取防治措施可能是减少老年人发生溶栓后出血转化的重要手段。

研究背景衰老细胞发生不可逆的增殖停滞,表现出高代谢活性,并抵抗细胞凋亡。衰老细胞具有独特的形态和分子特征及功能,使其与其他非分裂细胞群(如静止细胞和终末分化细胞)区分开来。细胞衰老的特征包括细胞周期停滞、转录改变、获得衰老相关分泌表型(Senescence-associated secretory phenotypes,SASP)、大分子损伤和代谢失调等。研究发现,各种免疫细胞群体都可经历细胞衰老的过程,呈现细胞衰老的特征,如细胞周期抑制因子P16、P21表达上调,SASP增多及衰老相关-β半乳糖苷酶(Senescence-associated β-galactosidase,SA-β-GAL)活性升高等。巨噬细胞是可塑性最强的免疫细胞,巨噬细胞在组织稳态和炎症中发挥关键作用,并参与癌症和各种炎症性疾病等多种疾病的发展。研究表明,老年小鼠腹腔巨噬细胞呈异质性和拉长的形态,细胞周期抑制因子P53/P21的表达增强,SA-β-GAL活性增强,目前关于巨噬细胞衰老的研究还不够深入。组织居留的巨噬细胞被认为是长寿的巨噬细胞,研究显示,T细胞免疫球蛋白及粘蛋白-4(T-cell immunoglobulin and mucin domain-containing protein 4,Tim-4)在肝脏、肠道、脂肪、心脏、肌肉等多个器官组织居留巨噬细胞中高表达。Tim-4是Tim家族的一员,被鉴定为磷脂酰丝氨酸(Phosphatidylserine,PS)受体,参与巨噬细胞对凋亡细胞的胞葬作用。Tim-4在维持巨噬细胞稳态、调控巨噬细胞功能中发挥不可或缺的作用。文献报道,Tim-4可参与诱导肿瘤免疫耐受,可异位表达于肿瘤细胞并促进肿瘤细胞的增殖和干性。本实验室前期发现,Tim-4可通过LKB1激活AMPK诱导巨噬细胞自噬。文献报道,自噬与衰老密切相关,老年人单核细胞中Tim-4表达降低,但Tim-4在巨噬细胞衰老中的作用尚不清楚。本研究利用利用自然衰老的小鼠、野生型(Wild Type,WT)以及Tim-4基因敲除(Tm-4 Knock Out,Tim-4KO)小鼠,初步探讨了 Tim-4在巨噬细胞衰老中的作用及机制。研究方法与结果1.衰老巨噬细胞中Tim-4的表达降低。利用自然衰老的小鼠,我们发现Tim-4+居留的腹腔巨噬细胞(Peritoneal macrophages,PEMs)随年龄增加比例降低;肝组织中Tim-4的表达也随年龄增加而降低;利用磁珠分选肝脏巨噬细胞,发现衰老后肝脏巨噬细胞Tim-4的表达也降低。体内和体外的研究表明,肿瘤微环境抑制Tim-4的表达,并且肿瘤微环境刺激下,巨噬细胞呈现衰老表型。2.Tim-4缺失PEMs呈现衰老表型。分离WT以及Tim-4 KO小鼠的PEMs确认细节进行RNA-seq,KEGG富集到与细胞衰老相关的细胞周期以及P53信号通路,qRT-PCR结果发现,Fer-1细胞培养衰老相关指标P21 Cip1、Tp53表达上调,Laminb1表达降低;SA-β-GAL活性升高;在LPS刺激下,Tim-4 KO小鼠的PEMs细胞周期进程受阻;Tim-4缺失PEMs呈现衰老表型。3.Tim-4缺失后肝脏巨噬细胞呈现衰老表型。相较于WT小鼠,我们发现Tim-4KO小鼠肝组织中衰老相关指标P21、P53的表达上调;利用F4/80磁珠分选肝脏巨噬细胞,Western blotting结果显示肝脏巨噬细胞中P21、P53的表达也上调;流式细胞术检测结果显示,Tim-4缺失后肝脏中的两群巨噬细胞即F4/80hi CD11blow居留的枯否氏细胞(Kupffer Cells,KCs)和 F4/80low CD11bhi 单核细胞来源的巨噬细胞(monocyte-derived macrophages,MoMφs)SA-β-GAL的活性均升高,Tim-4缺失的肝脏巨噬细胞呈现衰老表型。4.Tim-4 缺失后骨髓来源的巨噬细胞(Bone marrow-derived macrophages,BMDMs)呈现衰老表型。我们分离WT及Tim-4KO小鼠的BMDMs,qRT-PCR结果显示,Tim-4 KO组BMDMs中衰老相关指标P21Cip1、Tp53表达显著上调。免疫荧光结果显示,Tim-4 KO组DNA损伤指标γ-H2AX表达上调、SA-β-GAL活性升高。以上结果表明,Tim-4缺失后BMDMs呈现衰老表型。5.Tim-4缺失导致巨噬细胞色氨酸代谢受损。对WT及Tim-4 KO KCs进行RNA-seq,通过KEGG以及GSEA分析,发现色氨酸代谢通路显著富集。色氨酸是NAD+从头合成途径的底物,Ido1、Ido2、Kmo、Qprt、Kynu为NAD+从头合成途径中的关键酶。qRT-PCR检测结果显示,Tim-4缺失后,KCs细胞中NAD+从头合成途径中关键酶的表达降低,NAD+消耗酶Cd38无明显变化。巨噬细胞体外过表达Tim-4,Ido1显著上调,提示Tim-4可能通过影响色氨酸代谢从而调控细胞NAD+水平,进而调控巨噬细胞向衰老表型的转变,具体机制有待深入研究。研究结论及意义本研究发现衰老巨噬细胞中Tim-4的表达降低,Tim-4缺失后巨噬细胞呈现衰老样表型,Tim-4调控巨噬Electrophoresis细胞衰老可能与色氨酸代谢通路有关。本研究初步揭示了 Tim-4在巨噬细胞衰老中的作用,为Tim-4在组织稳态中的功能研究提供新的思路,具有重要理论研究价值。

目的:明确银椴苷(Tiliroside)对NLRP3炎症小体活化以及内毒素诱导的小鼠急性肺损伤(Acute lung injury,ALI)的影响并探讨其可能的分子机制。方法:1.动物实验:实验小鼠随机分为4组:Vehicle组、LPS组、LPS+银椴苷低剂量(50 mg/kg)给药组和LPS+银椴苷高剂量(100 mg/kg)给药组。造模前9天,给药组小鼠每天灌胃给予一次对应剂量的银椴苷,其余组小鼠均给予等体积的0.5%CMC-Na溶液。给药第9天,在灌胃两小时后用3 mg/kg LPS进行腹腔注射以建立内毒素诱导的小鼠急性肺损伤模型,待24 h后进行样本收集。采用血细胞分析仪检测外周血中性粒细胞及单核细胞计数及占比;收集小鼠肺、脾、肝、肾,计算脏器/体重比值;收集左上肺,计算肺组织湿/干重量(W/D)比;苏木精-伊红(HE)染色观察肺组织结构变化,并进行肺组织病理学评分及测量平均肺泡面积;收集支气管肺泡灌洗液(Bronchoalveolar lavage fluid,BALF)并采用BCA法检测BALF中蛋白质浓度;实时定量PCR(q RT-PCR)检测肺组织中炎性介质Il-1β、Inos、Il-6和Cxcl-2的m RNA表达水平;Western blot检测肺组织中NLRP3炎症小体相关蛋白的表达和AMPKα磷酸化蛋白的表达水平;免疫荧光检测肺组织CD68标记的炎性巨噬细胞浸润以及炎症因子IL-1β的表达。2.细胞实验:构建LPS联合ATP诱导的THP-1巨噬细胞NLRP3炎症小体活化和炎症模型,实验分为control组,LPS+ATP组,以及LPS+ATP+银椴苷(3,10,30μM)给药组。采用Western blot检测THP-1细胞中NLRP3、procaspase-1、pro-IL-1β、AMPKα、p-AMPKα(Thr172)和培养液上清中caspase-1p20和IL-1β的蛋白表达水平;q RT-PCR检测THP-1细胞中炎性细胞因子IL1B、IL6、IL8和TNFA的m RNA表达水平;免疫荧光观察THP-1细胞内NLRP3与ASC共定位情况;Mito SOX标记法检测THP-1细胞线粒体活性氧(mt ROS)的生成;JC-1标记法检测线粒体膜电位的变化情况。结果:1.动物实验:脏器指数结果表明与Vehicle组小鼠相比,LPS处理后显著提高肺、脾、肝脏器指数,而在给予银椴苷(100 mg/kg)干预后肺、脾脏器指数明显下降,同时肝、肾脏器指数也均呈现降低趋势;外周血白细胞分类和计数结果表明小鼠给予LPS刺激后中性粒细胞占比、中性粒细胞数量和单核细胞占比均明显上升,且单核细胞数量也呈现上调趋势,而银椴苷预处理后使得上述各项指标均呈现降低的趋势;HE染色病理形态学检测显示ALI模PS-341临床试验型小鼠肺组织出现肺泡壁和间隔明显增厚、肺内大量炎性细胞浸润、肺组织病理损伤评分升高以及平均肺泡面积减少的现象,而银椴苷干预可明显改善肺组织病理损伤;肺组织W/D检测结果也表明银椴苷显著降低LPS诱导的肺组织水肿;BALF中蛋白含量检测表明,LPS组BALF中蛋白浓度显著上调,而给予银椴苷预处理后其蛋白含量明显降低;q RT-PCR实验结果显示银椴苷明显降低了ALI小鼠肺组织中炎症介质Il-1β、Inos、Il-6和Cxcl-2的基因表达;Western blot结果表明银椴苷显著下调ALI小鼠肺组织中炎症小体相关蛋白pro-caspase-1β、pro-IL-1β、caspase-1 p20的表达并上调p-AMPKα(Thr172)的蛋白表达;肺组织免疫荧光结果显示,银椴苷显著减少了LPS诱导的CD68标记的巨噬细胞浸润、以及炎症因子IL-1β的表达。基于已报道的NLRP3炎症小体和巨噬细胞在急性肺损伤中的关键作用,综合以上实验结果,提示银椴苷可能通过抑制巨噬细胞NLRP3炎症小体的活medication knowledge化、进而改善肺组织炎症反应来抵抗内毒素诱导的小鼠急性肺损伤。2.细胞实验:CCK8细胞毒性实验结果表明在30 h内,银椴苷(0-30μM)剂量对THP-1巨噬细胞活性无影响;Western blot实验结果显示银椴苷呈剂量依赖性地抑制LPS+ATP诱导的THP-1巨噬细胞分泌caspase-1 p20和成熟IL-1β,并且免疫荧光实验结果表明银椴苷显著抑制LPS+ATP诱导的NLRP3和ASC在核周胞质区域的共定位,说明银椴苷显著抑制巨噬细胞NLRP3炎症小体的活化;q RT-PCR结果显示银椴苷还显著减少LPS+ATP诱导的THP-1巨噬细胞炎症因子IL1B、IL6、IL8和TNFA的m RNA表达水平;mt ROS及线粒体膜电位水平检测结果显示银椴苷显著下调LPS+ATP诱导的THP-1巨噬细胞mt ROS生成以及改善线粒体膜电位的降低。同时,Western blot实验发现银椴苷能够显著上调THP-1巨噬细胞AMPKα的磷酸化水平。基于已报道的AMPK-mt ROS轴在NLRP3炎症小体活化调控中的重要作用,综合以上实验结果,我们推测银椴苷很可能通过增强AMPKα磷酸化进而抑制mt ROS生成并改善线粒体损伤这一途径来抑制巨噬细胞NLRP3炎症小体的活化过程。结论:银椴苷可能通过靶向巨噬细胞AMPK信号通路来抑购买EPZ-6438制mt ROS的生成,从而降低NLRP3炎症小体的活化,进而抑制巨噬细胞介导的过度炎症反应并改善内毒素诱导的小鼠急性肺损伤。

[目的]探讨心房颤动射频消融术中联合内镜检查的应用价值。[方法]选取因心房颤动行射频消融术并接受了术中购买Navitoclax内镜检查的64例患者，回顾性分析其一般资料以及射频消融术中内镜检查结果。[结果immune stress]64例中62例(96.8%)恢复了窦性心律，2例(3.1%)恢复了窦性心律后再次出现了Ceralasertib化学结构心房颤动。术中内镜检查发现了6例射频消融相关食管损伤，包括3例(4.7%)食管出现血疱样隆起、3例(4.7%)食管出现红斑，总体发生率为9.4%。术中内镜检查在发现射频消融相关食管损伤的同时，也检查出来了一些合并的胃部病变。[结论]心房颤动射频消融术中联合内镜检查有助于早期发现食管损伤，有利于及时采取防治措施，在追求治疗效果的同时避免严重并发症的发生，能够为接受射频消融的心房颤动患者提供精准治疗，具有一定的临床应用价值。

背景 妊娠和经阴道分娩是导致女性盆底功能障碍（PFD）的重要因素，表现为盆腔器官脱垂（POP）selleckchem Imidazole ketone erastin、压力性尿失禁（SUI）以及性功能障碍；产后盆底功能康medical isotope production复近年来成为研究热点，通过主动锻炼和被动收缩以刺激盆底肌群，提高逼尿肌稳定性、改善肛提肌功能，以预防和治疗PFD。目的 探讨生物反馈电刺激+盆底肌训练（PFMT）联合疗法在经阴道分娩产妇盆底功能康复中的应用价值。方法 选取2020年1月—2022年1月在首都医科大学附属世纪坛医院妇产科分娩后存在PFD的产妇作为研究对象，采用随机数字表法将研究对象分为观察组和对照组。观察组采用生物反馈电刺激+PFMT方法 进行盆底功能康复，对照组仅采用PFMT方法 进行盆底功能康复。记录两组治疗前后盆底Ⅰ类与Ⅱ类肌纤维肌力情况以及SUI比例、POP分度情况；产后PFMT训练情况；治疗前及治疗后3个月、6个月的盆底功能障碍问卷（PFDI-20）、盆底障碍影响简易问卷7(PFIQ-7)、尿失禁问卷表简表（ICI-Q-SF）评分情况。结果 观察组共纳入327例、对照组共纳入343例。治疗后：观察组Ⅰ类与Ⅱ类肌纤维肌力MRTX1133小鼠恢复情况均优于对照组（P<0.001）；观察组SUI比例低于对照组（P=0.005）；两组POP分度情况比较，差异无统计学意义（P>0.05）。观察组治疗后3个月和治疗后6个月PFMT频次≥5次/周的比例均高于对照组（P<0.001）；观察组治疗后3个月和治疗后6个月PFDI-20、PFIQ-7、ICI-Q-SF评分均低于对照组（P<0.05）。结论 与单纯PFMT比较，产妇经阴道分娩后采用生物反馈电刺激联合PFMT进行盆底功能康复Ⅰ类与Ⅱ类肌纤维肌力恢复情况更好、SUI比例更低，实施PFMT的依从性更高，生活质量评分也更佳。

白酒糟经酶解后可作为丁醇发酵的优良原料，但其水解液中含有的抑制物质会对丁醇发酵造成影响。该研究利用Ca(OH)_2对酒糟水解液进行脱毒处理。采用气相色谱-质谱联用（GC-MS）技术对酒糟水解液中的主要成分进行分析，并应用多元统计分析方法确定主要的抑制物质种类。结果表明，酒糟水解液中共检测出18种化合物，其中酸类和酯类含量最高，分别为232.81 mg/L和126.69更多 mg/L。用Ca(OH)_2脱毒处理表明对酸类和酯类物质的去除率最高，分别达到38.2%protective autoimmunity～78.9%和83.1%～93.3%，最佳脱毒条件为pH 10,25℃处理1 h。结合主成分分析（PCA）和偏最小二乘分析（PLS）结果，油酸乙酯、亚油酸乙酯、棕榈酸乙酯、棕榈酸、己酸是丁醇发酵的显著负相关因子。潜在抑制物单因素试验结果表明，己酸添加量达800 mg/L时，对丁醇CX-5461生产商发酵有显著抑制作用（P<0.05），其他四种物质对其没有显著影响（P>0.05）。五类物质（等量混合）添加量达400 mg/L时，其对丁醇发酵具有协同抑制作用（P<0.05），丁醇含量相比于对照组减少了29.1%。综上，两种酸类和三种酯类物质是酒糟水解液中的潜在抑制物，其协同作用抑制了丁醇发酵。

心genetic exchange房颤动(房颤)是最常见的心律失常疾病之一，因其与多种心脑血管疾病相关，近年来房颤的死亡率不断上升。目前房颤的治疗以药物和导管消融手术治疗为主，但二者均存在一定的局限性。近年来，自主神经调节已成为治疗房颤的一种新兴疗法。研究表明，内关穴可通过调节自主神经平衡治疗房颤。自主神经系统在结构上分为中枢自主神经和外周自主神经系统两大部分。现阶段研究表明，针灸内关穴治疗房颤与中枢自主神经系统的活动调节有一定的相关性。大量临床Bucladesine IC50研究已证实针灸治疗可以有效降低房颤的复发率，LY-188011体外同时相关实验研究观察到针灸通过调节中枢自主神经活动治疗房颤的潜在机制。因此，本文主要针对针灸治疗房颤的相关中枢自主神经机制进行归纳论述，以期为房颤治疗提供新的思路和方向。

目的:探索精神分裂症患者与健康对照组烟酸皮肤反应的差异,探索精神分裂症患者三个月内的烟酸皮肤反应变化,分析烟PS-341半抑制浓度酸皮肤反应的改变与精神症状,社会功能以及认知功能之间的关系。方法:采用上海交通大学万春玲团队制作的烟Berzosertib酸皮肤反应一体化平台,收集40例精神分裂症患者在治疗前、第6周末、第12周末的烟酸皮肤反应面积值,并在这三个时间点进行阳性症状量表,阴性症状量表,功能大体量表,事件相关电位P300的检测。结果:精神分裂症的烟酸皮肤反应在基线期与健康对照组有显著性差异,将年龄作为协变量排除后,两组之间的差异具有显著性(P=0.020)。使用单因素重复方差分析的方法分析精神分裂症在治疗前,第6周末,第12周末三个时间节点的烟armed forces酸皮肤反应变化差异无显著性(P=0.900)。采用Spearman相关分析,在治疗前阴性症状与烟酸皮肤反应具有弱负相关性(r=-0.366,P=0.020),但阳性症状评分,功能大体量表评分,事件相关电位P300潜伏期,事件相关电位P300波幅,均未与烟酸皮肤反应检出明显相关性(均P>0.05)。结论:精神分裂症患者的烟酸皮肤反应与健康对照组相比显著减弱。精神分裂症患者减弱的烟酸皮肤反应在系统抗精神病药物治疗三个月内没有明显变化,是精神分裂症患者的一种内表型。精神分裂症的烟酸皮肤反应与阴性症状存在较弱的负相关,但是与阳性症状、社会功能、以及认知功能无相关性。