目Decitabine浓度的 构建lncRNA LINK-A的特异性RNAi慢病毒载体，并借此敲减人U251胶质瘤细胞株内的LINK-A,探究LINK-A对U251胶质瘤细胞增殖的影响。方法 针对人LINK-A设计siRNA序列，构建RNAi慢病毒载体质粒并进行测序鉴定；利用pHelper 1.0、pHelper 2.0以及shRNAi 3种质粒分别转染293T细胞，筛选分离慢病毒并测定滴度；用PBS及构建好的慢病毒感染人U251胶质瘤细胞，实验分3组：空白组(PBS)、NC组(空载病毒)、LINK-A(-)组(LINK-A RNAi慢病毒),72 h后利用RT-PCR检测细胞中LINK-A的表达情况；取病毒感染成功后的U251胶质瘤细胞行平板克隆实验培养10 d,行CCK-Immunodeficiency B cell development8实验分别于24 h、48 h检测。结果 RNAi慢病毒载体质粒测序结果与RNAiIACS-010759设计序列一致，提示LINK-A RNAi慢病毒载体构建成功，滴度为3×10~8 TU/mL;病毒感染U251胶质瘤细胞72h后，细胞生长状态良好，荧光持续稳定表达，LINK-A RNA相对表达量明显降低(P<0.05),表明病毒成功感染U251细胞；10 d后LINK-A(-)组细胞克隆形成数及形成率较空白组及NC组明显减少(P<0.05);与空白组及NC组相比，24 h后LINK-A(-)组OD值减少(P<0.05),72 h明显减少(P<0.05)。结论 人LINK-A RNAi慢病毒构建成功；LINK-A表达降低可抑制U251胶质瘤细胞增殖。