目的:1)研究不同剂量亚砷酸钠(NaAsO_2)对人肝星状细胞(LX-2)铁死亡水平的影响;2)铁死亡抑制剂(Ferrostatin-1)联合NaAsO_2共同暴露对LX-2细胞纤维化指标的影响。方法:1)通过CCK-8法检测细胞IC_(50),并分为对照组、5μmol/L、10μmol/L、15μmol/L NaAsO_2组;2)采用倒置显微镜观察LX-2细胞形态;3)通过油红O染色观察不同组细胞脂滴分布;4)透射电子显微镜(TEM)观察细胞线粒体超微结构;5)Ferro Orange荧光探针检测细胞Fe~(2+)荧光强度;6)BODIPY 581/591 C11探针检测细胞脂质过氧化物产物(脂质ROS);7)酶标仪检测细胞谷胱甘肽(GSH)和丙二醛(MDA)的含量;8)实时荧光定量PCR(RT-PCR)检测细胞α-SMA、cMetal bioavailabilityollagenⅠ、SLC7A11、GPX4 m RNA表达水平;9)蛋白免疫印迹(Western-Blot)检测细胞α-SMA、SLC7A11、GPX4蛋白表达水平。10)Fer-1和NaAsO_2共同暴露LX-2细胞24h,检测Fer-1干预前后铁死亡和纤维化指标变化情况。结果:1)随着NaAsO_2染毒剂量的升高LX-2细胞增殖率逐渐下降,IC_(50)为21.44μmol/L,R~2=0.91;2)正常情况下LX-2细胞形态饱和呈“星星”状,生长方式为抱团生长。随着NaAsO_2染毒剂量的升高细胞数量逐渐减少、细胞触角开始回缩逐渐变为圆形、细胞间间隙变宽;3)油红O染色结果显示,正常情况下LX-2细胞内有较少的脂滴成分,NaAsO_2处理可能导致LX-2细胞内的脂滴流失;4)通过TEM观察到,对照组LX-2细胞线粒体结构为双层膜、光滑闭环,线粒体嵴清楚可见,随着NaAsO_2染毒剂量的升高细胞线粒体膜完整性破坏、线粒体嵴断裂和消失;5)通过Ferro Orange荧光探针检测到LX-2细胞Fe~(2+)荧光强度随着NaAsO_2剂量的升高而逐渐升高。与对照组相比,5、15μmol/L NaAsO_2染毒组细胞Fe~(2+)水平升高(P均<0.05);6)通过BODIPY 581/591 C11探针检测发现,对照组细胞未观察到脂质ROS绿色荧光,随着NaAsO_2染毒剂量的升高脂质ROS的荧光强度逐渐增强;7)GSH和MDA检测结MLN4924体内果显示,NaAsO_2染毒使LX-2细胞GSH含量均减少(P<0.05),相反MDA含量升高(P<0.05);8)RT-PCR检测结果显示,不同剂量NaAsO_2染毒LX-2细胞导致细胞纤维化指标α-SMA、collagenⅠm RNA表达水平升高,且随着NaAsO_2染毒剂量的升高而升高(P<0.05)。铁死亡指标SLC7A11和GPX4 m RNA表达水平下降,且随着NaAsO_2染毒剂量的升高其表达水平呈下降趋势(P<0.05);9)Western-Blot检测结果显示,α-SMA蛋白表达水平随剂量的增加呈上调趋势(P<0.05),SLC7Adavosertib抑制剂A11和GPX4蛋白表达水平随NaAsO_2剂量的增加而逐渐下调(P<0.05)。10)Fer-1+NaAsO_2共同暴露LX-2细胞后,CCK-8结果显示与15μmol/L NaAsO_2组相比,细胞增殖率升高(P<0.05)。Ferro Orange荧光探针检测与15μmol/L NaAsO_2组相比Fer-1干预组细胞Fe~(2+)荧光强度呈下降趋势(P<0.05)。BODIPY 581/591 C11探针检测结果显示,与15μmol/L NaAsO_2组相比Fer-1干预组细胞脂质ROS荧光强度呈下降趋势。GSH检测结果显示,与15μmol/L NaAsO_2组相比Fer-1干预致细胞GSH含量升高(P<0.05)。RT-PCR和Westen-Blot检测结果显示,与15μmol/L NaAsO_2组相比Fer-1干预组细胞SLC7A11和GPX4 m RNA和蛋白水平呈上升趋势(P<0.05),纤维化指标α-SMA、collagenⅠm RNA和蛋白表达水平呈下降趋势(P<0.05)。结论:NaAsO_2致LX-2细胞纤维化指标升高的同时铁死亡水平升高。纤维化指标(α-SMA、collagenⅠ)与铁死亡指标(SLC7A11、GPX4)之间存在负相关关系。Fer-1与NaAsO_2共同暴露使LX-2细胞纤维化指标表达水平降低。