CircSWT1通过miR-370-3p/SNAIL轴诱导NSCLC细胞上皮-间充质转化并促进NSCLC进展的研究

研究背景和目的:在全球范围内,肺癌每年的新发病例仅次于乳腺癌,癌症死亡病例位居首位。肺癌是严重威胁人类健康的疾病之一,是提高人类预期寿命的重大障碍。非小细胞肺癌(Non-small cell lung cancer,NSCLC)占所有肺癌的80%-90%,是导致肺癌发病和死亡的主要病理类型。尽管随着早期筛查的普及,诊断技术和电视胸腔镜手术的提高以及放化疗、靶向治疗、免疫治疗等多种治疗手段的应用,肺癌患者总体的五年生存率只有22%。因此,进一步研究肺癌的发病机制和治疗方案,以提高患者的五年生存率,是当今社会亟待解决的重大健康问题。环状RNA(circ RNA)在真核生物中广泛表Medical implications达,生物学功能丰富多样,作为癌基因或抑癌因子,广泛参与肿瘤的发生和发展,是潜在的生物标志物和治疗靶点。有关circ RNAs在NSCLC中的作用机制,已经有广泛的研究。SWT1衍生的hsa_circ_0015677已经被证实可以影响心肌细胞的凋亡。然而,SWT1衍生的circ RNAs在NSCLC中的表达水平及生物学功能尚未得到充分的研究。因此,我们分析了NSCLC中SWT1衍生的circ RNAs的表达情况,筛选出高表达AZD1152-HQPA的has_circ_0004689(circSWT1),并研究了其在NSCLC进展中潜在的生物学功能及作用机制。方法:1.取四对NSCLC组织及配对的正常组织,qRT-PCR检测由SWT1衍生的circ RNAs的表达情况。2.qRT-PCR检测circSWT1在96例NSCLC组织中的表达情况。并分析circSWT1的表达水平与NSCLC患者临床病理特征和预后的关系。3.构建差异表达circSWT1的NSCLC细胞系,CCK-8、克隆形成实验、基质胶Transwell实验和划痕实验分别检测细胞的增殖、侵袭和迁移能力。qRT-PCR和Western blot检测EMT相关的生物标志物的表达情况。4.RNA下拉实验、RIP、荧光素酶报告基因实验验证circSWT1和miR-PR-171抑制剂370-3p,miR-370-3p和SNAIL是否能够相互结合。5.CRISPR Cas-9敲除SNAIL之后,检测差异表达circSWT1对NSCLC细胞增殖、侵袭、迁移及EMT的影响。6.体内实验,检测差异表达circSWT1对NSCLC进展的影响。结果:1.在41个由SWT1衍生的circ RNAs中,circSWT1(has_circ_0004689…