目的:分析慢性阻塞性肺疾病急性加重期(AECOPD)早期使用低分子肝素的临床疗效。方法:选取郑州大学第一附属医院2021年6月至20CL 318952小鼠22年6月收治的100例AECOPD患者,将接受常规方案治疗的50例患者纳入对照组,将早期使用低分子肝素联合常规方案治疗的50例患者纳入观察组。比较两组患者呼吸状况、血常规、炎症因子、血管内皮功能和血液流变学相关指标情况及治疗相关不良反应。结果:治疗后,观察组患者中性粒细胞/淋巴细胞比率、血小板/淋巴细胞比率均低于对照组,差异具有统计学意义(P <0.05);治疗后,观察组患者的白细胞介素–6、肿瘤坏Biomass management死因子–α水平均低于对照组,差异具有统计学意义(P <0.05);治疗后,观察组患者内皮素–1水平低于对照组,一selleckchem MLN4924氧化氮水平高于对照组,差异具有统计学意义(P <0.05);治疗后,观察组患者红细胞比容、血浆黏度及全血高切黏度水平均低于对照组,差异具有统计学意义(P <0.05);治疗后,观察组患者呼吸困难评分低于对照组,差异具有统计学意义(P <0.05);两组患者均无不良反应发生。结论:AECOPD患者应尽早使用低分子肝素治疗,有助于缓解高凝血状态,保护血管内皮功能,控制机体炎症反应程度。
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碘氧化铋基光阳极的制备及光电催化降解罗丹明B的研究
在当今时代自然环境的有机水污染问题已非常严重,是人类可持续发展所面临的重大挑战之一。光电催化技术由于其具有清洁、高效、不造成二次污染和可循环利用等优点,成为解决当今有机水污染问题的有效方法。Bi OI作为一种无毒、稳定及对可见光具有较强吸收的光阳极材料,引起研究学者的关注。但Bi OI的光生电子-空穴极易复合,使光电催化活性较低,限制了其实际应用。将Bi OI与碳材料、半导体复合,可以提升其光电催化活性。本论文针对Bi OI光阳极光生电子-空穴对的容易复合的缺陷,通过引入生物质碳材料和构建异质结的方法对其进行改性,制备了Bi OI@C和g-C_3N_4@Bi OI@C光阳极,采用XRD、SEM、TEM、FTIR、XPS等测试方法对其进行了表征,AZD1152-HQPA半抑制浓度优化了Bi OI@C和g-C_3N_4@Bi OI@C光阳极的制备工艺条件和光电催化降解罗丹明B的工艺条件,考察了其循环稳定性,利用LSV、响应光电流、EIS、Mott-schott Ky、活性基团捕获实验初探了其光电催化降解罗丹明B的机理。为Bi OI基光阳极在处理有机废水中的实际应用提供理论基础和实验参考。主要工作包括以下两方面:(1)以生物质碳(玉米秸秆为碳源)、Bi(NO_3)_3·5H_2O和KI为原料,乙二醇(EG)和乙醇(Et OH)的混合液为溶剂,采用溶剂热法制备了Bi OI@C光阳极。研究结果表明,Bi OI@C光阳极的最佳制备工艺条件为:生物质碳的Automated Workstations用量为3 mg,EG与Et OH的体积比为15:35,溶剂的p H值为1.6。该条件下制备的Bi OI@C光阳极中Bi OI以纳米片形式在生物质碳表面进行了组装。在外加电压为1.5 V,罗丹明B初始浓度为20 mg/L、初始p H为3时,Bi OI@C光阳极对罗丹明B的光电催化效果最佳。在100 min内对罗丹明B的降解率为100%,而同样降解条件下Bi OI光阳极的只有59%。经过活性基团捕获实验确定了Bi OI@C光阳极光电催化降解罗丹明B的主要活性基团为羟基自由基和空穴。(2)采用溶剂热联合热聚合法制备了g-C_3N_4@Bi OI@C光阳极。当尿素用量为80μL时制备的g-C_3N_4@Bi OI@C光阳极具有最高的光电催化活性,该条件下制备的g-C_3N_4@Bi OI@C光阳极中g-C_3N_4均匀包裹在组装于生物质碳表面的Bi OI纳米片上。g-C_3N_4@Bi OI@C光阳极在罗丹明B初始浓度为20 mg/L、初始p H为3、外加电压为3 V时,对罗丹明B的光电催化降解效果最佳,20 min内对罗丹明B的降解率达100%,而相同条件下Bi OI@C光阳极对罗丹明B的降解率仅为17%。经过6次循环降解实验g-C_3N_4@Bi OI@C光阳极对罗丹明B降解率仅下降了3.5%,而Bi OI@C光阳极经过3次循环降解实验对罗丹明B的降解率下降了16.2%。经过活性基团捕获实验确定了g-C_3N_4@Bi OI@C光阳极光电催化降解罗丹明B的活Captisol分子量性基团为超氧自由基和空穴。
不同能量饲喂策略对湖羊糖代谢及羊肉品质的影响研究
随着我国肉羊产业的迅速发展,羊肉贸易水平的不断上升,消费需求逐步向着追求更高质量肉品质迈进。糖代谢对于动物机体的生产性能起着重要作用,饲粮中不同的能量水平和能量供给方式可通过影响机体糖代谢,进而对肉品质产生影响。本试验以湖羊为研究对象,研究不同能量饲喂策略(即不同能量饲喂水平和供给方式)对湖羊糖代谢和羊肉品质的影响。选取3月龄(体重为17.22±0.02kg)的健康断奶湖羊公羔96只,随机分成4组,每组6个重复,每个重复4只羊。预试期15 d,正试期90 d。按不Staurosporine MW同能量饲喂策略分为低能组(L-L组,试验全期均饲喂低能饲粮,代谢能为8.83 MJ/kg)、高能组(H-H组,试验全期均饲喂高能饲粮,代谢能为10.84 MJ/kg)、低高组(L-H组,试验前期(1-60 d)饲喂低能饲粮,试验后期(61-90 d)饲喂高能饲粮)和高低组(H-L组,试验前期饲喂高能饲粮,试验后期饲喂低能饲粮)。结果如下:一:不同能量饲喂策略对湖羊机体糖代谢的影响。试验结束后从每重复中选取接近组内平https://www.selleck.cn/products/ag-221-enasidenib.html均体重的2只湖羊进行颈静脉采血,采集5 m L血液制备成血清。屠宰后迅速采集肝脏和背最长肌组织各10 g左右置于无菌低温保存管中。测定结果表明:(1)不同能量饲喂策略对湖羊血清中葡萄糖、丙酮酸和乳酸含量及乳酸脱氢酶活性的影响差异不显著(P>0.05)。(2)H-H组和L-H组的肝糖原含量显著高于H-L组和L-L组(P<0.05)。H-H组和H-L组的磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶显著高于L-L组(P<0.05)。H-L组的丙酮酸羧化酶和葡萄糖-6-磷酸酶显著高于L-L组和L-H组(P<0.05)。(3)H-L组和L-L组的肌糖原含量显著高于H-H组和L-H组(P<0.05)。H-L组和L-L组的丙酮酸含量、乳酸含量、己糖激酶、磷酸果糖激酶、丙酮酸激酶及糖酵解潜力显著低于H-H组和L-H组(P<0.05)。H-H组的ATP含量显著高于其它三组,H-L组和L-L组的ADP含量显著高于H-H组和L-H组,H-H组的AMP含量最低,L-L组的AMP含量显著低于H-L组(P<0.05)。二:不同能量饲喂策略对湖羊肉品质的影响。试验结束后在每组的每个重复中选取1只体重接近组内平均水平的羊进行屠宰,取胴体左半部分的背最长肌的中端250 g用于测定肉品质指标。结果表明:(1)L-L组的羊肉蛋白质含量最高,H-H组的羊肉蛋白质含量最低(P<0.05)。H-H组的羊肉粗脂肪含量显著高于其他三组,H-L组显著高于L-H组和L-L组(P<0.05)。(2)H-H组羊肉的p H_0、p H_(24)和剪切力均显著低于其他组(P<0.05)。H-L组的p H_(24)要显著低于L-L组(P<0.05)。H组的肉色亮度要显著高于其他组(P<0.05)。(3)H-H组和L-H组的羊肉饱和脂肪酸、C15:0、C17:0、C18:0、C20:0含量显著低于L-L组和H-L组(P<0.05)。H-H组和L-H组的羊肉不饱和脂肪酸、C18:1n-9c含量及UFA/SFA显著高于L-L组和H-L组(P<0.05)。L-H组的单不饱和脂肪酸含量显著高于L-L组和H-L组(P<0.05)。(4)H-H组和H-L组羊肉的肌纤维面积和肌纤维直径均显著小于L-L组和L-H组,且H-H组羊肉的肌纤维面积显著小于于H-L组(P<0.05)。(5)在肌球蛋白重链(My HC)基因表达量中,H-H组羊肉的My HC-I的表达量要显著大于L-L组和L-H组,H-L组羊肉的My HC-I的表达量要显著大于L组(P<0.05)。三:不同能量饲喂策略下,湖羊糖代谢与肉品质的相关性分析。结果表明:(1)血糖含量与肉品质中水分、不饱和脂肪酸和多不饱和脂肪酸存在显著正相关,而与肉色黄度和红度及饱和脂肪酸存在显著负相关(P<0.05)。(2)肝糖原与肉品质中蛋白质含量、p H_0、p H_(24)、剪切力、饱和脂肪酸和肌纤维面积存在显著负相关,而与脂肪含量、肉色亮度、不饱和脂肪酸和单不饱和脂肪酸存在Fetal medicine显著正相关(P<0.05)。肝脏中葡萄糖含量、丙酮酸含量、磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶、葡萄糖-6-磷酸激酶与蛋白含量呈显著负相关,而与脂肪含量呈显著正相关(P<0.05)。(3)肉品质中p H_(24)、肌纤维直径、肌纤维面积与肌糖原、ADP含量存在显著正相关,而与丙酮酸、乳酸、ATP、丙酮酸激酶、磷酸果糖激酶及糖酵解潜力存在显著负相关(P<0.05)。饱和脂肪酸与肌糖原、ADP存在显著正相关,与丙酮酸、乳酸、己糖激酶、丙酮酸激酶、磷酸果糖激酶和糖酵解潜力呈显著负相关;不饱和脂肪酸与单不饱和脂肪酸刚好与之相反(P<0.05)。综上所述,饲粮前期能量水平对肌纤维类型与特性起着决定性作用,后期能量水平对糖代谢影响较大并与脂肪酸组成及含量有着密切关系。综合来看,前期高后期低的能量饲喂策略可以更好的调控糖代谢途径,减缓宰后肌肉糖酵解速率,使羊肉有着较高的脂肪与蛋白含量,肉色、剪切力和系水力也较优。
Prkcaa调控斑马鱼社会行为的作用及机制研究
蛋白激酶C(Protein Kinase Dorsomorphin体外C,PKC)是一类对蛋白质的丝氨酸和苏氨酸残基进行磷酸化修饰的蛋白激酶,按照结构特点分为经典PKC、新型PKC和非经典PKC三种亚型。蛋白激酶Cα(PKCα/PRKCA)属于经典PKC家族。研究表明PKCα是昼夜节律的重要调节因子,PRKCA基因的突变与人类精神疾病如自闭症谱系障碍和精神分裂症紧密相关,然而对于PRKCA在调节动物情绪行为方面的作用及其内在机制仍不明确。由于基因组部分加倍,斑马鱼prkca基因在进化中产生了两个旁系同源基因prkcaa和prkcab,分别位于第6和第3号染色体上。斑马鱼Prkcaa和Prkcab分别包含670和671个氨基酸,其序列一致性高达87%。这两个基因在除肝脏外的所有组织中均有一定表达,但表达模式有所不同,prkcaa在卵巢中表达水平最高,其次Y-27632采购是眼睛和脑组织;prkcab在脑组织的表达量最高,其次是眼睛和鳃。在293T细胞中进行过表达Prkcaa和Prkcab,发现Prkcaa仅定位于细胞质中,而Prkcab在细胞质和细胞膜中均有定位。为了进一步研究prkcaa基因在调控动物社会行为的作用和机制,我们采用CRISPR/Cas9技术构建了prkcaa基因缺失的斑马鱼突变体模型,并获得“-2 bp”和“-11 bp”两种突变品系,分别命名为zko3145A和zko3145B。prkcaa基因缺失不影响斑马鱼在正常条件下的生长、发育和繁殖。以prkcaa敲除突变体为模型分别进行新型水箱实验、镜像攻击实验、社交偏好实验和集群实验,研究Prkcaa在调控鱼类行为中的作用。新型水箱实验结果显示:prkcaa纯合突变体进入新型水箱上层的潜伏期(P<0.001)、总次数(P<0.001)以及在上层停留时间(P<0.001)均显著低于WT,呈现出现类似焦虑的行为表型;镜像攻击实验结果显示:突变体进入接近区(Approcah area,AA)的次数(P<0.01)显著降低,镜前咬合时间(P<0.01)、频率(P<0.001)均明显降低,说明突变体在镜前的攻击/攻击性趋势行为明显减少;社交偏好实验中突变体与WT之间对同种群体的偏好值具有极显著的差异(P<0.001);突变体鱼在集群实验中表现出更松散、更大的鱼群,体现在平均鱼间距离(P<0.001)、平均近邻距离(P<0.001)、群体面积(P<0.001)的增加,此外离群频率(P<0.001)也显著增加,代表鱼群游泳方向一致性的极化值也显著降低(P<0.001),表明Prkcaa的缺失导致斑马鱼的社交能力产生缺陷。以上结果表明,斑马鱼prkcaa在对斑马鱼情绪行为调控中具有重要的作用。为Biobehavioral sciences探究Prkcaa在调控鱼类行为改变的作用机制,我们采用RNA-seq方法分别检测了WT和3145A突变体脑组织在早晨(9:00 AM)和夜间(9:00 PM)的基因表达情况。对基因表达数据进行主成分分析的结果显示,斑马鱼的基因型(WT与3145A)和采样时间(夜间/早晨)对基因表达均有明显影响。对差异表达基因进行韦恩分析发现,有175个昼夜节律基因受到prkcaa突变的影响,包括44个夜间偏好的基因(在夜间有更高的表达,GS1)和131个早晨偏好的基因(在早晨有更高的表达,GS2)。独立性G检验分析结果表明,prkcaa的突变对早晨偏好基因的表达有明显的影响(P<0.001),但对夜间偏好基因没有明显影响(P=0.1045)。代表性egr2a,egr4a,fosaa,fosab和npas4a等即时早期基因,它们在夜间的下调由于Prkcaa功能障碍有所减弱。这些基因同时也与神经系统发育和神经活动显著相关。与之一致的是,prkcaa突变体表现出昼夜运动节律的颠倒,夜间活性显著高于早晨,主要表现在夜晚的运动距离显著高于白天(P<0.05)。另外我们基于游泳速度将斑马鱼的运动划分为大运动、中运动、小运动和静止四种类型,WT斑马鱼在早上大运动比例明显较高,而在晚上的中、小运动占比最高;zko3145A突变体的大运动比例无论白天黑夜始终保持在低水平,在早上的小运动比例偏高,在晚上的中度运动较多。我们的数据证实了PRKCA在调节动物社会互动方面的作用,并将社会行为缺陷与紊乱的昼夜节律联系起来,为了解Prkcaa的功能所依据的分子机制提供了新的见解。
红枣多糖超高压耦合低共熔溶剂提取工艺优化及其抗氧化活性
为了实现红枣多糖的高效制备及开发利用,本研究建立了红枣多糖超高压耦合低共熔溶剂提取工艺,并探究了红枣多糖的抗氧化活性。以红枣为原料,从七种不同类型的低共熔溶剂(Deep Eutectic Solvent,DES)体系中,筛选确定以氯化胆碱和乙二醇组成的DES提取红枣多糖,在单因素试验的基础上,采用Bo更多x-Benhnken中心组合试验设计优化红枣多糖的超高压耦合DES提取工艺,建立四因素回归模型,确定其最优提取工艺条件为提取压力483 MPa,保温时间8.25 min,DES中氯化胆碱和乙二醇的摩尔比为1:3.75,DES含水量为53%,此时红枣多糖实际得率为14.22%。同时该工艺制备得到的红枣多糖具有较高的DPPH、ABTS自由基清除作用,以及铁离子和氧自由基还原能力,分别为1.47mgAA/gDW、10.69mgAA/gDW、30.43μmolFe E/gDW和193.67host-microbiome interactionsμmPLX4032体内实验剂量ol TE/g DW,具有显著的抗氧化活性,表明超高压耦合DES提取工艺具有制备高得率、高抗氧化活性红枣多糖的潜力。
提前肝素化对ST段抬高型心肌梗死患者冠状动脉血流的影响及时间依赖性
目的 探讨提前肝素化对ST段抬高型心肌梗死(STEMI)患者急诊经皮冠状动脉介入(PCI)治疗前梗死相关血管(IRA)血流的影响及其时间依赖性。方法 选取发病12 h内的接受急诊PCI的STEMI患者376例,随机分为试验组(n=181)和对照组(n=195)。试验组患者确诊后立即静脉推注普通肝素(UFH)60 U/kg,最大剂量5 000U。对照组患者穿刺成功后动脉内应用UFH 2000U。两组患者PCI前均补充至(80~100)U/kg。比较两组患者PCI前IRA血流情况及PCI后慢血流、院内死亡、心力衰竭、出血的比例与住院时间。分析症状出现至UFH给药时间与UFH给药至冠脉造影时间对IRA再通的影响。结果 试验组患者PCI前IRA再通比例高于对照组,血栓抽吸、住院时间低于对照组,差异有统计学意义(均P<0.05); PCI前冠脉内可见血栓、PCI后慢血流,院内心衰、出血及死亡的比例差异无统计学意义。提前肝素化与PCI前IRA再通呈正相关(OR=1.819,95%CI:1.166~2.837,P<0.01)。在试验组和对照组患者中,症状出现至UFH给药时间和IRA再通之间存在时间依赖性(<3 h:50.Gefitinib-based PROTAC 3 MW0%vs. 29.2%,P<0.05;其余时段无统计学差异),与PCI前IRA再通负相关(OR=0.945,95%CI:0.816~0.986,P<0.05)。在试验组患者中,UFH给药至冠脉造影时间>30 min的患者PCI前IRA再通比例较高,差异有统计学意义(P<0.05),与PCI前IExperimental Analysis SoftwareRA再通呈正相Smoothened Agonist细胞培养关(OR=2.610,95%CI:1.153~5.911,P<0.05)。结论 提前肝素化能提高STEMI患者急诊PCI前IRA再通比例,改善患者预后,且不增加出血风险。症状出现后越早给予UFH,改善IRA再通的作用越强。确诊后立即应用UFH可作为无UFH禁忌症的STEMI患者PCI的辅助抗凝方案。
艾曲泊帕治疗儿童免疫性血小板减少症的临床综合评价
目的 对艾曲泊帕治疗儿童免疫性血小板减少症(Immune thrombocytopenia, ITP)进行临床综合评价,为药品说明书修订、临床合理selleck Regorafenib用药提供循证依据。方法 以中文关键词“艾曲泊帕/艾曲波帕/瑞弗兰”“免疫性血小板减少症/特发性血小板减少性紫癜”“儿童”和对应的英文关键词“eltrombopag”“immune thrombocytopenia/idiopathic thrombocytopenic purpura”“child/children”在中国知网、万selleck PF-07321332方、PubMed、Cochrane library等数据库检索从建库至2023年5月的文献。采用文献研究、成本效果研究等方法,比较艾曲泊帕与罗米司亭、海曲泊帕以及重组人血小板生成素(rhTPO)治疗儿童ITP的有效性、安全性、经济性。结果 本研究共检索到相关文献613篇,最终纳入符合标准的有效文献14篇。艾曲泊帕在减少出血事件和改善生活质量方面显著优于罗米司亭,并且艾曲泊帕的增量成本效果相较于罗米司亭具有优势。此外,艾曲泊帕在治疗儿童ITP方面并未出现明显有别于罗米司亭的安全性事件。结论 艾曲泊帕具有良好Invertebrate immunity的有效性、安全性、经济性。应开展更多的真实世界相关研究,为艾曲泊帕治疗儿童ITP提供更多临床循证依据。
基于生物信息学的香豆雌酚靶向SLC39A8抑制人结直肠癌细胞增殖的作用机制研究
结直肠癌(Colorectal cancer,CRC),又名大肠癌,是一种发生在结肠直肠上皮的恶性肿瘤,2020年WHO统计数据表明,在全球范围内,CRC发病率位列第三,死亡率位列第二。2020年全球结直肠癌新发病例数约193万,死亡病例数约93万,中国结直肠癌新发病例达55万,死亡病例约28万。中国是全球结直肠癌疾病负担较为沉重的国家之一。CRC病因复杂,与遗传和环境有关。CRC的常规治疗方法是手术、化疗和放疗。早期CRC可通过手术治疗,但CRC早期症状不明显,难以发现和确诊。中晚期患者才多就诊,常因肿瘤太大或肿瘤转移而无法手术。化疗和放疗在杀伤癌细胞的同时,也会在一定程度上杀伤正常细胞,故常规放化疗具有一定的局限性。因此,寻找控制癌症发展、转移及恶化的新思路至关重要。早期CRC(Ⅰ和Ⅱ期)可通过手术治疗,5年内的相对生存率约为90%。因此,CRC的早期筛查与诊断对患者至关重要。一些炎症标志物,如粪便钙卫蛋白可作为诊断早期CRC潜在的生物标Medicaid expansion志物;上皮钙粘蛋白在粪便中的水平比在血清中更加敏感。然而,这些已知的标志物在灵敏度与特异性方面参差不齐,因此,CRC早期筛查仍需新的生物标志物。本研究通过生信分析筛选出金属转运蛋PD0325901白SLC39A8(Solute carrier family 39 member 8,SLC39A8)靶点,可能是一种新的生物标志物。SLC39A8是由SLC39A8基因编码的一种膜转运蛋白,可促进二价金属(如锌、铁)吸收,在结肠的正常组织与肿瘤组织中差异表达,且与CRC侵袭性相关。但是,SLC39A8在CRC发生和发展中的具体分子机制尚不清楚。生物信息学与网络药理学分析表明,香豆雌酚是能与SLC39A8结合的中药成分。香豆雌酚常见于葛根、苜蓿等中药,既往研究表明香豆雌酚可在抑制癌细胞增殖方面发挥作用。本研究通过香豆雌酚对结直肠癌细胞内SLC39A8基因表达的影响,观察香豆雌酚能否通过影响该基因的表达来达到抑制肿瘤增殖的目的,为临床用药以及新药研发提供理论依据。目的:基于生物信息学和网络药理学联合实验分析香豆雌酚干预结直肠癌的分子机制和关键作用靶点。方法:1.生物信息学和网络药理学筛选CRC预后靶点和中药成分及富集通路。从公共数据库选取结直肠癌数据集。采用单因素COX分析、临床相关性分析,筛选出在结直肠癌早期和晚期表达存在显著差异(P<0.05)的基因。将三组数据得到的基因(P<0.05)取交集,得到交集。对上述交集基因进行泛癌的差异分析、配对差异分析和生存分析,筛选出关键靶点。对其进行单基因临床相关性分析和独立预后分析。联合网络药理学预测与潜在靶点结合的中药有效成分。将筛选到的中药成分与潜在靶点进行分子对接,通过对核心靶点进行GO和KEGG富集分析,找出该基因所富集的通路,并以此为依据对药物分子发挥作用的机制进行合理推测。2.选择CRC细胞进行实验验证。体外培养人结直肠癌细胞COLO 205和HCT 116。采用不同剂量(0μM、25μM、50μM、75μM、100μM)香豆雌酚分别处理细胞24 h、48 h、72 h、96 h,通过CCK8实验检测香豆雌酚对COLO 205和HCT 116细胞增殖的影响;选择合适的药物浓度及处理时间,并设置对照组处理COLO 205和HCT 116细胞,确定香豆雌酚的给药浓度及作用时间。采用q RT-PCR和Western blot检测SLC39A8及铁死亡下游信号通路分子NCOA4、VDAC2、NOX2在m RNA和蛋白水平的表达变化。采用亚铁离子检测试剂盒观察香豆雌酚对细胞内亚铁离子含量的影响。利用流式细胞术检测香豆雌酚对上述细胞凋亡的影响情况。结果:1.生物信息学和网络药理学筛选结果。下载了3个结直肠癌数据集,共计1343例样品,其中正常样品60例,肿瘤样品1283例。根据对3个数据集进行单因素COX分析、临床相关性分析筛选,3个数据集共得到的4个交集基因,分别为GDI1、GPX3、NOS2和SLC39A8。通过泛癌的差异分析、配对差异分析和生存分析,最终筛选出关键基因SLC39A8。单基因临床相关性分析显示SLC39A8基因表达与淋巴结转移相关。单因素独立预后分析结果显示SLC39A8可以作为独立的预后因子。通过网络药理学筛选出与SLC39A8蛋白结合的中药成分香豆雌酚。分子对接结果显示,中药成分香豆雌酚与蛋白受体SLC39A8在理论上可以结合。GO富集结果显示SLC39A8可能参与铁离子跨质膜输入等生物学过程,其细胞学定位可能在溶酶体膜、质膜等,参与铁离子跨膜转运蛋白活性等分子功能。KEGG富集分析结果显示SLC39A8可能通过铁死亡通路发挥作用。2.CRC细胞实验验证结果。与对照组(0μM)相比,25μM、5CL139000μM、75μM、100μM浓度的香豆雌酚均可抑制COLO 205和HCT 116细胞的增殖,随着香豆雌酚浓度的提高及处理时间的增加,COLO 205和HCT116细胞的抑制率逐渐增加,且香豆雌酚对结直肠癌细胞的增殖的抑制呈现剂量依赖性及时间依赖性。结果显示浓度为100μM且作用时间为96 h,药物对细胞的抑制率最高。q RT-PCR和Western blot实验结果分别显示香豆雌酚显著激活了2种结直肠癌细胞系中SLC39A8及铁死亡通路相关基因NCOA4、VDAC2、NOX2的m RNA和蛋白表达。亚铁离子试剂盒实验结果显示香豆雌酚显著激活了2种结直肠癌细胞系内亚铁离子含量。流式细胞术实验结果显示香豆雌酚显著激活了2种结直肠癌细胞系的凋亡。结论:SLC39A8是结直肠癌预后关键基因,这种作用可能是通过调控SLC39A8、NCOA4、VDAC2和NOX2的铁死亡通路来实现的。香豆雌酚具有治疗结直肠癌的作用。
茶树新梢响应茶蚜取食的代谢物变化研究
茶蚜是春季茶树(Camellia sinensis (L.) O. Kuntze)的主要害虫,严重影响AMG510茶叶的产量和品质。次生代谢物质在植物防御蚜虫危害过程中具有重要作用,研究茶蚜为害下茶树新梢次生代谢物的变化有利于筛选和培育抗蚜茶树品种。本研究以茶蚜为害和未为害的茶树品种‘鄂茶一号’新梢为材料,开展了代谢组学分析和主要代谢物定量分析,检测了苯丙氨酸解氨酶(PAL)、多酚氧化酶(PPO)活性和脯氨酸(Pro)含量Biocomputational method。结果显示,‘鄂茶一号’茶蚜危害率高达35.4%,对茶蚜中等抗性。茶蚜为害后,新梢中PAL活性轻微上升,PPO活性显著提高,可溶性糖、黄酮和Pro含量显著上升,而茶多酚含量显著下降。茶蚜为害诱导了8个代谢物质显著差异变化,包括3个初生代谢物和5个次生代谢物。3个初生代谢物全部上调表达,可能为次生代谢物合成提供前体,也可能改变茶蚜生存所需的营养物质。5个次生代谢物包括1个茉莉酸类物质JA-Ile和4个类黄酮物质,JA-Ile作为防御信号物质显著上调表达,激活茶树下游防御体系,类黄酮作为防御物质直接参与茶蚜防御。研究结果表明PS-341价格JA-Ile、类黄酮和Pro可能是茶树防御茶蚜的主要物质。
转录因子NF-κB对鲤疱疹病毒Ⅱ型基因启动子的表达调控研究
为深入探究NF-κB信号通路对CyHV-2感染过程的影响,在CyHV-2感染的GiCF细implant-related infections胞中加入NF-κB激动剂,通过RT-qPCR和Western Blot分析在感染24、72、96 h后CyHV-2编码基因在转录和翻译水平的表达情况。结果显示,在加入NF-κB激动剂后的72、96 PD-0332991h,CyHV-2编码基因转录和翻译水平均明显高于对照组,提示NF-κB促进CyHV-2编码基因的Empagliflozin molecular weight转录及翻译。为进一步阐明NF-κB如何影响CyHV-2的转录和翻译,利用生物信息学软件预测CyHV-2部分编码基因的启动子序列中和NF-κB的结合位点,采用双荧光素酶报告基因实验分析NF-κB对启动子活性的影响。结果表明,NF-κB过表达提高了病毒基因启动子活性,提示NF-κB可以通过促进CyHV-2基因的启动子活性来增强病毒复制水平。研究结果有助深入探究CyHV-2基因的表达翻译机制,也为开发基于NF-κB信号通路靶点的新的抗病毒抑制剂提供理论支撑。