Author: admin

【目的】自噬参与多种细胞生理过程，自噬相关蛋白ATG13是ATG1/13复合物的组成部分，在启动自噬中发挥着重要作用。本研究旨在分析ATG13在褐飞虱Nilaparvata lugens中发挥的功能，评估其作为害虫防治靶标的潜力。【SB431542说明书方法】基于褐飞虱转录组数据，利用RACE克隆褐飞虱NlATG13的cDNA全长序列；应用生物信息学技术分析NlATG13的核苷酸和氨基酸序列特征。利用RT-qPCR检测其在褐飞虱不同发育阶段(1-5龄若虫和雌雄成虫)和不同组织(5龄Spectrophotometry若虫头、胸、中肠和脂肪体以及刚羽化雌成虫的卵巢)中的表达模式。通过显微注射dsNlATG13至3龄若虫进行RNAi敲减NlATG13的表达，探究其对褐飞虱生存和中肠细胞自噬的影响；利用RT-qPCR检测RNAi 4 d时3龄若虫中糖原合成与代谢通路相关基因NlGSK3,NlGS和NlGP的表达量。【结果】克隆得到NlATG13的cDNA全长序列(GenBank登录号：MF805752),其开放阅读框长1 203 bp,编码一个含400个氨基酸的蛋白质(GenBank登录号：AWW05678.1)。系统发育分析表明，在纳入分析的物种中，NlATG13蛋白与半翅目温带臭虫Cimex lectularius和茶翅蝽Halyomorpha halys的ATG13蛋白进化关系较为接近。发育表达谱结果表明NlATG13在褐飞虱3和5龄若虫中的表达量显著高于在1-2龄若虫、雌成虫和雄成虫中的；组织表达谱结果表明NlATG13在5龄若虫头部和脂肪体中的相对表达量较高，在胸部的表达量最低。RNAi结果显示，与dsGFP对照组相比dsNlATG13处理组中褐飞虱中肠细胞Ferrostatin-1采购中存在明显的糖原颗粒积累，NlGS,NlGSK3和NlGP的表达量均无显著变化，组织ATP含量显著降低；褐飞虱的存活率显著降低，处理第10天时褐飞虱存活率下降到41.4%,而dsGFP对照组的存活率保持在85.6%的较高水平。【结论】RNA干扰NlATG13基因对褐飞虱的生存和中肠细胞自噬具有显著的抑制效果，NlATG13基因具有作为褐飞虱防治靶标的潜力。

<正>特应性皮炎（atopic dermatitis,AD)是一种慢性、复发性、炎症性皮肤疾病，全球约有2.3亿人受到AD困扰，其中包括Noninvasive biomarker20%的儿童和1%～3%的成人，其特征是瘙痒、炎症性皮损，以及皮肤屏障缺损~([1])。反复抓挠会引起瘙痒-抓挠循环，严重影响患者生活质量~([2])，所以，控制瘙痒是其治疗目标之一。AD的疾病机制与遗传、环境、皮肤屏障和免疫等因素等均有关。Th2型炎症是AD的基本特征，不同年龄阶段AD的炎症表现也不尽相同，儿童期主要表现为Th2型炎症，而成人期却表现为Th2/Th22型混合炎症，亚裔则以Th2/Th17混合型炎症为主。AD的治疗方式有：基础治疗，包括洗浴、食物干预、改善环境、脱离变应原等；外用药物治疗，如一线用药糖皮质激素、钙调神经磷酸酶抑制剂；抗葡萄球菌抗生素可以有效治疗继发性皮肤感染；由于口服抗组胺药不能减轻瘙痒，故不推荐使用；对于一线治疗不充分的中重度特应性皮DS-3201炎，紫外线光疗是一种安全有效的治疗方法；还可系统应用糖皮质激素、SCH727965分子量免疫抑制剂、Janus激酶抑制剂、生物制剂等方法治疗AD。

利用真核表达系统稳定表达HA重组蛋白并评价其免疫原性及攻毒保护效果，为重组流感亚单位疫苗的研制提供更多的理论基础。本研究以H1N1型流感Knee biomechanics病毒HA胞外区域序列为目的基因构建重组质粒KS001-HA并转染至CHO细胞得到表达重组蛋白rHA的单克隆细胞株，通过离子交换层析法纯化rHA。将rHA与佐剂联合免疫小鼠以评估免疫原性，并对免疫后的小鼠进行攻毒，监测小鼠存活率和体重变化，检测其肺组织病毒载量，并分析肺组织的病理变化。重组质粒KS001-HA在CHO细胞中稳定整合并分泌表达rHA蛋白，其相对分子质量约70 kD，经PNGaseF酶处理后，蛋白大小变为60kD。纯化后rHAAZD9291蛋白纯度>95%。加强免疫后小鼠血清抗体效价显著增强，佐剂配伍免疫效果优于rHA单独免疫，其中HA203佐剂配伍组15、30、60μg剂量组免疫效应显著高于阳性对照组H1N1疫苗原液组。攻毒后HA203佐剂配伍组无小鼠死亡，小鼠体重平均下降率低于10%，肺组织肺泡结构清晰，仅见肺泡壁轻度增厚，伴随少量的炎性细胞浸润，仅检测到少量呈灶性分布的棕黄色颗粒。本研究成功构建了重组质粒KS001-HA，于CHO细胞中表达，并筛选出稳定表寻找更多达目的蛋白的单克隆细胞株。rHA蛋白以单体形式存在且糖基化丰富。rHA蛋白独自作用小鼠产生的免疫原性较低且不能保护小鼠抵抗H1N1型流感病毒的攻击，rHA蛋白联合佐剂免疫小鼠后具有较好的免疫原性，以HA203佐剂效果最好。HA蛋白配伍HA203佐剂可以诱导小鼠产生特异性体液免疫保护小鼠抵御H1N1型流感病毒的攻击，减少炎性细胞浸润，有效抑制病毒的复制。

目的 观察2型糖尿病(diabetes mellitus type 2,T2DM)采取三加一联合强化胰岛素治疗的疗效和安全性。方法 选取2020年7月—2021年7月信阳市中心医院收治的60例T2DM患者，根据治疗药物不同，将实施早、晚餐门冬30胰岛素进行治疗的30例作为对照组，将采取三加一联合Roxadustat浓度强化甘精胰岛素治疗的30例作为观察组，均治疗2周。治疗结束后比较两组血糖、糖化血红白蛋白水平；对比两组血糖达标后2 d血糖波动指标；统计两组胰岛素用量、低血糖发生情况及血糖达标时间数值。结果 治疗后，观察组空腹血糖(FBFerrostatin-1作用G)、餐后2 h血糖、糖化血红蛋白分别为(5.06±1.12)mmol/L、(7.13±1.12)mmol/L及(6.55±0.94)%,均低于对照组(P<0.05);观察组血糖水平标准差(SDBG)、四分位血糖波动范围(IQR)和餐后血糖波动幅度(PPGE)分别为(2.38±0.76)mmol/L、(2.71±0.56)mmol/L及(3.56±0.94)mmol/L,均低于对照组，而变异系数(CV)数值高于对照组，差异有统计学意义(P<0.05);观察组胰岛素用量少于对Immune ataxias照组，血糖达标时间短于对照组，低血糖发生率(3.33%)优于对照组(20.00%),差异有统计学意义(P<0.05)。结论 三加一联合强化胰岛素治疗T2DM可在较短时间内控制血糖稳定，且所需胰岛素用量少，尚未增加用药风险，治疗效果确切。

目的 观察依洛尤单抗对冠心病合并高脂血症病人血脂和超敏C反应蛋白的影响。方法 选取2019年7月—2020年1月我院收治的212例冠心病合并高脂血症的病人为研究对象，按照给药方案不同分为对照组和观察组，对照组给予他汀类药物治疗，观察组在对照组基础上给予依洛尤PD-0332991细胞培养单抗皮下注射。给药3个月后比较两组治疗前后血脂和超敏C反应蛋白，并记录病人不良心血管事件发生情况。结果 治疗后，观察组总胆固醇、三酰甘油、低密度脂蛋白胆固醇、超敏C反应蛋白水平均低于治疗前，高Pathologic processes密度脂蛋白胆固醇高于治疗前，且观察组均优于对照组(P<0.05)。治疗后，观察组不良心血管事件发生率为4.72selleckchem Compound 3%,低于对照组的12.26%,差异有统计学意义(P=0.041)。结论 依洛尤单抗联合他汀类药物可降低冠心病病人血脂和超敏C反应蛋白水平，一定程度减少不良心血管事件的发生。

目的：探究奥沙利铂+氟尿嘧啶在原发性肝癌中的疗效及对甲胎蛋白(AFP)、糖类抗原-125(CA125)、糖类抗原-199(CA199)、可溶性脂肪酸合成酶(sFas)、可溶性脂肪酸合成酶配体(sFasL)及血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响。方法：将2019年6月-2021年10月萍乡赣西肿瘤医院收治的80例原发性肝癌患者随机分为对照组(n=40)和观察组(n=40)。对照组采用顺铂+氟尿嘧啶进行治疗，观察组则采用奥沙利铂+氟尿嘧啶治疗。比较两组的治疗效果、各类不良反应发生情况、治疗前后的疾病相关血液指标[血清肿瘤标志物(AFP、CA125、CA199)及其Bio-imaging application他相关指标(sFas、sFasL及VEGF)]。结果：观察组的疾病控制率显著高于对照组，各类不良反应发生率均低LY2157299抑制剂于对照组，差异均有统计学意义(P<0.05)。治疗前，两组血清AFP、CA125、CA199、sFas、sFasL及VEGF比较，差异均无统计学意义(P>0.05)。治疗第1、2次后，观察组血清AFP、CA125、CA199、sFas、sFasL及VEGF均低于对照组，差异均有统计学意义(P<0.05)。结论：奥沙利铂+氟尿selleck化学嘧啶在原发性肝癌中的疗效较好，安全性较高，可更为有效地控制疾病相关血液指标的表达。

目的 探讨老年男性稳定性冠心病患者高敏Metabolism抑制剂肌钙蛋白T(hsTnT)与N末端B型利尿钠肽前体（NT-proBNP）的相关性。方法 选择2018年3—8月在解放军总医院第二医学中心和国家老年疾病临床医学研究中心门诊查体并诊断为稳定性冠心病的老年男性患者755例进行回顾性分析。其中356例hsTnT<14 ng/L（低hsTnT水平组），399例hsTnT≥14 ng/L（高hsTnT水平组）。收集两组患者的一般临床资料，计算估算的肾小球滤过率（eGFR），并进行比较，同时分析hs-TnT与NT-proBNP的相关性。结果 与低hsTnT水平组患者比较，高hsTnT水平组患者eGFR水平较低，NT-proBNP水平较高，且差异均有统计学意义（P <0.selleck CX-546101）。Pearson相关分析结果显示，年龄、hs-TnT与NT-proBNP呈正相关（r=0.073,P=0.045;r=0.540,P <0.001），舒张压、eGFR与NT-proBNP呈负相关（r=-0.111,P=0.005;r=-0.241,P <0.001）。多元线性回归分析结果显示，在校正了多个传统心血管危险因素后，hs-TnT与NT-proBNP呈正相关（β=0.958,95%CI:0.821～1.095,P <0.001），且冠心病合并糖尿病组患者hs-TnT与NT-proBNP呈更显著的正相关（β=1.111,95%CBlood stream infectionI:0.958～1.264,P <0.001）。结论 老年男性稳定性冠心病患者心肌损伤标志物hs-TnT与心功能指标NT-proBNP呈独立正相关，且在冠心病合并糖尿病患者中的相关性更显著。

目的：研究miR-181a-5p对HOS骨肉瘤细胞增殖、周期和迁移的影响及其机制。方法 ：采用实时定量PCR检测hFOB1.19成骨细胞和HOS、U2OS、MG63骨肉瘤细胞系中miR-181a-5p及HOXB4的表达情况。利用Lipofectamine 2000将miR-181a-5p mimics和miR-181a-5p inhibitor分别转染至人骨肉Tamoxifen瘤HOS细胞中（分别为过表达组和抑制剂组），并设置miR阴性对照组；CCK-8法检测各组细胞的增殖能力变化，流式细胞术检测各组细胞的细胞周期变化，划痕愈合实验以及Transwell迁移实验检测各组细胞的迁移能力变化。Targetscan网站预测miR-181a-5p的靶向基因，并通过双荧光素酶报告基因系统及Western blot验证靶向关系。结果：与成骨细胞hFOB1.19相比，miR-181a-5p在骨肉瘤细胞HOS、U2OS和MG63中低表达（P<0.05），而HOXB4在骨肉瘤中高表达（P<0.05）。与阴性对照组相比，过表达miR-181a-5p抑Laboratory Automation Software制骨肉瘤HOS细胞的增殖和迁移能力，并且处于细胞周期S期的细胞减少（P<0.05）。敲低miR-181a-5p促进骨肉瘤HOS细胞的增殖和迁移能力，并且处于S期细胞增加（P<0.05）。生物信息学预测及双荧光素酶报告基因系统验证HOXB4为miR-181a-5p的下游靶基因（P<0.05）。Western blot显示，过表达miR-181a-5p的HOS细胞中，HOXB4蛋白表达低于阳性对照组（P<0.05），而敲低miR-181a-5p的HOS细胞中HOXB4蛋白表达高于对照组（P<0.05）。结论：miR-181a-5p在骨肉瘤细胞中低表达，过表达miR-181a-5p能够抑制骨肉瘤细胞HOS增殖、周期和迁移能力，该作ABT-199体外用可能通过靶向HOXB4发挥作用。

【目的】筛选高效氯氰菊酯胁迫下的柑橘木虱抗药性相NSC 125973说明书关基因及其网络，探讨柑橘木虱应对拟除虫菊酯类杀虫剂的抗性机制，为柑橘木虱的抗药性治理提供依据。【方法】采用Illumina NovaSeq 6000测序系统对高效氯氰菊酯和空白对照处理的柑橘木虱成虫进行转录组测序，采用生物信息学软件Hisat2、DEGseq2和clusterProfiler等对差异表达基因进行功能注释、分类以及参与的信号通路分析。【结果】所检测的柑橘木虱转录组数据中筛选到差异表达（DEGMedical hydrology）基因4596个，其中显著上调表达基因2900个，显著下调表达基因1696个。差异表达基因中有624个富集到KEGG的103条代谢通路，富集的通路主要涉及Hippo信号通路、核糖体、吞噬体、药物代谢、嘌呤代谢、硫胺素代谢和细胞凋亡等与昆虫抗药性相关的7条代谢通路。与昆虫抗药性相关的差异表达基因38个，涉及细胞色素氧化酶、谷胱甘肽转移酶、钠离子通道、三磷酸腺苷合酶、细胞GW4869体内色素b、酸性磷酸酯酶、钙粘蛋白、糖基转移酶、脱羧酶、ABC转运蛋白等多个代谢抗性和靶标抗性基因。【结论】挖掘获得大量的柑橘木虱响应拟除虫菊酯类杀虫剂的抗药性相关基因，显著富集的通路主要涉及Hippo信号通路、核糖体、吞噬体和硫胺素代谢等与昆虫抗药性紧密相关的4条代谢通路，为研究柑橘木虱的抗药机制以及进行抗药性治理提供了丰富的数据基础。

目的 研究非小细胞肺癌(Non small cell lung cancer, NSCLC)患者血清糖类抗原125(Carbohydrate antigen 125,CA125)、基质金属蛋白酶抑制剂-1(Tissue inhibitor of metalloproteinase-1,TIMP-1)、淀粉样蛋白A(serum amyloid, SAA)Lorlatinib IC50水平与临床病理特征和预后的关系。方法 回顾性分析本院2016年5月—2018年12月诊治的96例NSCLC患者(研究组)临床资料，另选取本院同期收治的肺部良性病变患者102例(A组)以及健康体检者98例(B组),均检测血清CA125、TIMP-1、SAA水平，并分析其与NSCLC患者临床病理MG132特征以及预后的关系。结果 研究组患者血清CA125、TIMP-1、SAA水平高于A组、B组(P<0.05);淋巴结转移患者血清TIMP-1、SAA水平高于无转移electrodialytic remediation患者，Ⅲ～Ⅳ期患者血清CA125、TIMP-1、SAA水平高于Ⅰ～Ⅱ期患者(P<0.05);死亡组患者血清CA125、TIMP-1、SAA水平高于生存组(P<0.05);CA125、TIMP-1、SAA水平的异常升高、淋巴结转移以及Ⅲ～Ⅳ期均是导致NSCLC患者预后差的独立危险因素(P<0.05)。结论 血清CA125、TIMP-1、SAA水平与NSCLC患者临床分期、淋巴结转移等临床病理特征密切相关，其表达水平增高是患者预后差的独立危险因素。