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拟南芥SPA(Suppressor of phy A-105)是光形态建成的重要负向调控因子,参与光形态建成、开花时间、避荫性和气孔开张等的调控。本研究通过玉orthopedic medicine米的四个SPA基因的克隆和转基因分析来探究它们在玉米光形态建成,以及株高和开花期调控的功能。本研selleck究以玉米自交系B73为材料克隆了四个SPA基因,分别命名为Zm SPA1、Zm SPA2、Zm SPA3和Zm SPA4。生物信息学分析了其蛋白结构域;利用实时定量PCR方法分析Zm SPA1、Zm SPA2、Zm SPA3和Zm SPA4在玉米不同组织中的转录丰度,及其对不同光质、转换光和长短日照处理的响应;并对Zm SPAs蛋白进行了亚细胞定位分析。构建Zm SPA2、Zm SPA3和Zm SPA4植物表达载体,获得拟南芥转基因株系,并在不同光照、光周期及遮荫条件下进行表型鉴定。结果表明,玉米与禾本科植物的SPAs氨基酸序列一致性较高,并且与高粱、南荻和拟南芥的SPAs蛋白具有相同的功能结构域。Zm SPA1在根与叶片中的表达量无显著性差异,而Zm SPA2、Zm SPA3和Zm SPA4主要在叶片中表达。Zm SPAs能强烈响应远红光、红Nirogacestat作用光、蓝光和白光处理,在黑暗到蓝光转换时转录丰度峰值最高,并且Zm SPA3和Zm SPA4的转录丰度高于Zm SPA1和Zm SPA2。在长日照和短日照处理下,Zm SPA3和Zm SPA4表达模式相似,而Zm SPA1和Zm SPA2明显不同,暗示4个Zm SPAs在玉米生长和发育中,存在功能冗余和差异。亚细胞定位显示,Zm SPA1和Zm SPA2定位于细胞核,而Zm SPA3和Zm SPA4定位于细胞核及可能定位于质膜上。在拟南芥中异源表达Zm SPA2仅在红光条件下可以互补拟南芥spa1234突变体表型,而Zm SPA3和Zm SPA4转基因能在黑暗、红光和蓝光条件下均可互补拟南芥spa1234突变体表型;Zm SPA2、Zm SPA3和Zm SPA4基因对spa1234突变体的叶柄长、叶长、叶宽、叶面积、叶绿素含量和成株株高均有显著调节。Zm SPA3和Zm SPA4均可在长日照和短日照条件下,导致株高显著增加,并且它们促进遮荫条件下的下胚轴伸长。总之,本研究对4个Zm SPAs基因进行了响应光质处理的表达模式分析,并对Zm SPA2、Zm SPA3和Zm SPA4基因进行互补拟南芥spa1234突变体表型分析和功能验证,为其在玉米生长和发育的功能研究奠定了研究基础。

目的:对比分析姑息一线应用贝伐珠单抗联合化疗治疗KRAS突变型晚期左、右半结肠癌的临床疗效。方法:回顾性分析我院于2016年09月至2020年09月收治的83例一线应用贝伐珠单抗联合化疗治疗KRAS突变型晚期左、右半结肠癌患者，比较KRAS突变型左、右半结肠癌患者的临床特征、客观缓解率(ORR确认细节)、疾病控制率(DCR)、无进展生存时间(PFS)、18个月生存率、总生存时间(OS)。结果:KRAS突变型晚期右半结肠癌(RSCC)患者合并不完全肠梗阻及体重减轻>5 kg所占比例更高(P=0.369、P=0.009),KRAS突变型晚期左半结肠癌(LSCRC)患者更易合并中重度以上的贫血(P=medical subspecialties0.154)。KRAS突变型LSCRC患者发生腹腔种植转移及远处器官转移的患者比例高于RSCC患者(P>0.05)。KRAS突变型LSCRC患者与RSCC患者ORR分别为29.3%和28.6%(P=0.944),DCR分别为87.8%和90.5%(P=0.696)。18个月生存率LSCRC组为80.05%,RSCC组为76.2%,差异无统计学意义(P=0.635)。KRAS突变型LSCRC患者中位PFS差于RSCC患者(8个Gefitinib纯度月vs 9.8个月，P=0.004),KRAS突变型LSCRC患者中位OS优于KRAS突变型RSCC患者中位OS(22.8个月vs 21个月，P=0.001)。结论:姑息一线应用贝伐珠单抗联合化疗治疗KRAS基因突变型mCRC患者，左、右半结肠癌的远期疗效存在差异。

目的 探讨水合氯醛与乙酰氨基酚联合灌肠对急诊小儿高热惊厥反复发作的效果。方法 对2020年1月—2022年1月经杭州市第一人民医院急诊科收治的112例反复发作高热惊厥患儿实施研究，按随机数字表法分为对照组(56例)与观察组(56例)。对照组给予乙酰氨基酚灌肠治疗，于对照组基础上，观察组联合乙酰氨基酚联合灌肠，比较两组退热及抗惊厥效果、免疫功能、神经元因子水平、脑电图异常情况、不良反应及复发率。结果 观察组退热时间、惊厥消失时间分别为(35.24±8.12)min、(3.31±0.82)min,均短于对照组的(50.18±10.15)min、(5.27±1.05)min,差异有统计学意义(P<0.05);观察组治疗1周后CD4~+T细胞高于对照组，CD8~+T细胞低于对照组，差异有统计学意义(P<0.05);观察组治疗1周后脑源性神经营养因子(BDNF)、Integrase抑制剂神经特异性烯醇化酶(NSE)水平分别为(363.05±56.34)ng/L、(8.15±1.74)μg/L,均低于对照组的(4GDC-0973作用25.71±67.02)ng/L、(9.86±2.03)μEvidence-based medicineg/L,差异有统计学意义(P<0.05);观察组治疗1周后脑电图正常、轻度异常、中度异常及重度异常发生率与对照组比较，差异均有统计学意义(均P<0.05);两组不良反应发生率比较，差异无统计学意义(P>0.05);观察组复发率为1.79%,低于对照组的14.29%,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 反复发作高热惊厥患儿应用水合氯醛与乙酰氨基酚联合灌肠治疗，可获良好退热及抗惊厥效果，免疫功能增强，神经元因子水平及脑电图异常情况有所改善，且不良反应较少，复发率低，具有较高安全性。

目的 使用脆弱老年人调查量表（valnerable elders suruey-B,VES-13）、老年问卷8项（Geriatric-8,G8）筛查老年恶性血液病脆弱患者，评估问卷可行性及准确性。方法 在九江市第一人民医院对56例首诊的老年恶性血液病患者进行综合老年评估（comprehensive geriatric assessment,CGA），并以维度量表中异常≥2个定义为脆弱。同时请患者完成VES-13和G8问卷。筛查分析量表对预测脆弱的准确性、重测信度及一致性。接受者操作特性（receiver operating characteristic,ROC曲线）、整体鉴别指数（iWnt-C59作用ntegrated discrimination improvement,NRISB203580作用）和净重新分类指数（netreclssification improvement,IDI）则用于比较不同筛查工具的预测价值。结果 34例（60.7%）经CGA明确为脆弱。使用VES-13预测脆弱的ROC曲线下面积（AUC）为0.763(95%CI:0.726～0.798,P<0.001)，灵敏度为71.5%，特异度为76.9%。使用G8预测脆弱的AUC为0.727(95%CI:0.683～0.765,P<0.001)，灵敏度为77.2%，特异度为69.1%。R OC曲线、NR I和IDI分析中，VES-13、G8筛查价值均优于年龄。结论 在筛查老年恶性血液病脆弱患者中，使用Vbreast microbiomeES-13、G8均显示出良好的敏感性、特异性。与完整的CGA相比，使用2种工具筛查有助于节省时间和资源。

目的 探讨沙库巴曲缬沙坦对持续性房颤合并射血分数降低的心力衰竭（HFr EF）患者心功能、冠状动脉血流储备及氧BIBW2992小鼠自由基水平的影响。方法 选取我科2021年6月至2022年10月期间109例持续性房颤合并HFr EF患者Dorsomorphin临床试验作为研究对象，随机数字表法分为对照组（n=54）及观察组（n=55），对照组采取心力衰竭标准化治疗，观察组联合沙库巴曲缬沙坦治疗，对比两组患者心功能、冠状动脉血流储备指标、氧自由基水平及不良反应情况。结果 试验过程中对照组脱落1例，观察组脱落2例，两组最终各入组53例。治疗后，观察组左心射血分数较对照组高，左心舒张末内径、血清氨基末端脑钠肽前体较对照组水平低（P<0.05）；冠状动脉血流储备指标均高于对照组（P<0.05）；超氧化物歧化酶水平高于对照组（P<0.0systems biology5），丙二醛水平、不良反应发生率组间差异无统计学意义（P>0.05）。结论 在持续性房颤合并HFr EF治疗中应用沙库巴曲缬沙坦能有效提升患者心功能，提高冠状动脉血流储备水平，一定程度上调节氧自由基代谢，且不增加不良反应发生风险，效果确切，值得临床应用及进一步研究。

目的 以替加氟和焦脱镁叶绿酸A为原料合成缀合物，并将其制备成胶束，实现光动力治疗和化疗的协同抗肿瘤作用。方法 以丁二酸酐连接替加氟衍生物与焦脱镁叶绿酸A,通过核磁Multi-functional biomaterials共振氢谱、质谱进行结构表征；通过溶剂挥发法制备载药胶束，以载药量、形貌、粒径、NN2211体外ζ电位、体外抗肿瘤活性等对载药胶束进行制剂学评价。结果 替加氟-焦脱镁叶绿酸A复合物的结构得以确证；通过马尔文激光粒度仪和透射电镜验证所制备载药胶束粒径为143.9 nm,粒度均一；载药胶束可持续释药72 h以上，且激光照射可加速药物释放；Mirdametinib核磁载药胶束经激光照射可增强体外抗肿瘤效果，IC_(50)值为14.81μg·mL~(-1),其细胞毒性相较于单独给药替加氟增加至1.43倍。结论 替加氟-焦脱镁叶绿酸A前药负载的胶束可实现替加氟的缓释作用，并可通过光动力治疗联合化疗有效提高替加氟体外抗肿瘤效果。

目的：探究人参不定根总皂苷(ginseng adventitious roselleck合成ots total saponins，GARS)的最佳提取工艺及抗氧化和抗疲劳作Biorefinery approach用。方法：利用乙醇回流法提取GARS，通过正交试验考察乙醇浓度、料液比、提取温度、提取时间对GARS含量的影响；以1，1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPHAlisertib MW)、2，2-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐(ABTS~(+))、3-氧代-2-苯基-4，4，5，5-四甲基咪唑啉-1-氧(PTIO)、羟(·OH)、超氧阴离子(O~(2-))自由基清除能力及还原力作为测定抗氧化活性指标；通过测定小鼠力竭游泳和爬杆时间，测定肌/肝糖原、乳酸(LD)、尿素氮(BUN)含量及乳酸脱氢酶(LDH)活性来判定GARS抗疲劳能力。结果：通过正交试验得到最佳提取工艺条件为乙醇浓度70%、料液比1:30 g/mL、提取温度70℃、提取时间40 min，得到GARS含量为107.85 mg/g；GARS对DPPH、ABTS~(+)、PTIO、·OH、O~(2-)自由基都有一定程度清除作用，且具有还原性，其清除能力和还原性与浓度呈正比；GARS能够显著延长小鼠力竭游泳和爬杆时间(P<0.05)，显著增加肌/肝糖原含量(P<0.05)，降低LD、BUN含量，提高LDH活性，并与其浓度呈正比。结论：GARS提取的最优条件为乙醇浓度70%、料液比1:30 g/mL、提取温度70℃、提取时间40 min，可为GARS产业化生产提供依据，且GARS具有一定的抗氧化和抗疲劳作用，可为明确人参不定根营养成分和活性物质提供理论支持，为开发人参不定根药食同源的相关产品提供技术参考。

目的：探讨脓毒症患者血小板参数和降钙素原(PCT)水平相关性及其对预后的评估价值。方法：收集192例感染患者的临床资料，分为脓毒症组84例和普通感染组Genetic selection108例，比较2组患者血小板参数[血小板计数(PLT)、血小板压积、血小板平均体积(MPV)、血小板分布宽度(PDW)和大型血小板比率(P-LCR)和PCT水平]的差异，并绘制受试者工作特征(ROC)曲线，www.selleck.cn/products/liraglutide分析PCT水平和血小板参数对脓毒症预后的预测价值。结果：与普通感染组比较，脓毒症组MPV、PDW、P-LCR和PCT明显升高，当PCT≥5.0 ng/mL时，脓毒症患者PLT低于普通感染组，MPV、PDW和P-LCR高于普通感染组；PCT<0.5 ng/mL时，脓毒症患者MPV和PDW高于普通感染组；PCT≥0.5～<5.0 ng/mL时，脓毒症组MPV、PDW和PLR高于普通感染组。脓毒症组中PLT和血小板压积与PCT呈负相关(r值分别为-0.337、-0.218),MPV、PDW和P-LCR与PCT呈正相关(r值分别为0.223、0.303、0.391);血小板参数对脓毒症患者28 d预后预测分析中，ROC曲线下面积(AUC)从高到低依次为P-LCR、PDW、MPV(0.87、0.81、0.79),PCT的点击此处AUC为0.97。结论：脓毒症患者血小板参数和PCT水平与普通感染患者之间存在明显差异，PCT水平对脓毒症患者28 d预后的预测价值较高。

目的:探索PM_(2.5)暴露对心脏纤维化影响及铁自噬依赖性铁死亡的调控机制。方法:1.构建动物模型:随机将42只6周龄健康雄性C57BL/6J小鼠分为:洁净空气组(FA)、未过滤空气组(UA)和浓缩PM_(2.5)组(CA),洁净空气+铁抑制剂组(FAM)、洁净空气+二甲基亚砜组(FAD)、浓缩PM_(2.5)+铁抑制剂组(CAM)和浓缩PM_(2.5)+二甲基亚砜组(CAD),共7组,每组6只,持续暴露16周,每周7天,每天6小时(h)。在小鼠染毒期间,每周利用空气动力学粒径谱仪检测暴露仓内粒径分布,每天使用气溶胶探测器监测暴露仓内PM_(2.5)浓度,同时记录染毒仓内温湿度。2.PM_(2.5)采集与制备:暴露同期,使用高流量PM_(2.5)采样系统对颗粒物进行采集,采样器流速为1.05 m~3/min,每天采样12 h。通过超声和冷冻干燥法提取后制备成浓度为20 mg/m L的PM_(2.5)原液。3.构建细胞模型和重组细胞株:在37℃、5%CO_2条件下,采用含10%小牛血清的DMEM(Dulbecco’s modified eagle media)培养基培养小鼠心肌细胞系HL-1细胞。取对数生长期Ceralasertib采购的细胞,PM_(2.5)(0、50、100和200μg/m L)处理24 h。采用si RNA转染HL-1细胞,构建NCOA4和YY1低表达细胞株。4.心脏超声检测小鼠心脏功能,HE和Masson染色检测小鼠心脏组织病理结构和胶原纤维沉积水平。5.Western blot检测小鼠心脏组织中纤维化标志物:α-SMA、Collagen I;小鼠心脏组织和HL-1细胞中促纤维化蛋白TGF-β;小鼠心脏组织和HL-1细胞中铁死亡标志物:TFRC、SLC40A1、SLC7A11/Xct和GPX4;小鼠心脏组织和HL-1细胞中铁自噬标志物:NCOA4和FHC,以及YY1的表达水平。6.BD Accuri?C6流式细胞仪(Becton,USA)检测小鼠心脏组织和HL-1细胞活性氧水平。将小鼠心脏组织制备成10%的匀浆,TBA法检测MDA水平。7.将小鼠心脏组织研磨、离心后取上清,比色法检测小鼠心脏组织中二价铁的含量。8.免疫荧光检测小鼠心脏组织中4-HNE的水平。免疫金标技术检测NCOA4和FHC在自噬溶酶体中的共定位情况。9.免疫共沉淀(Co-Immunoprecipitation,Co-IP)实验检测HL-1细胞YY1和NCOA4的直接结合作用。结果:1.FA、UA、CA组平均暴露浓度分别为0、12.03和89.82μg/m~3。暴露期间,FA组未检测到颗粒物质,UA组暴露仓内粒径小于2.5μm颗粒物的检出率为94.78%,CA组暴露仓内粒径小于2.5μm颗粒物的检出率为99.82%。2.超声心动图结果显示,与FA组相比,UA组和CA组小鼠的每搏输出量(SV)、射血分数(EF)和短轴缩短分数(FS)明显降低(P<0.05),表明PM_(2.5)暴露后心功能明显降低。HE染色结果显示,CA组小鼠心脏出现明显病理改变:心肌纤维排列紊乱,有炎性细胞浸润。Masson染色结果显示,UA组和CA组小鼠心脏中胶原大量沉积。3.与FA组相比,UA和CA组小鼠心脏组织中α-SMA和Collagen I的水平明显增加(P<0.05);PM_(2.5)(50 ug/m L,100 ug/m L,200 ug/m L)梯度处理HL-1细胞24 h,TGF-β的水平随PM_(2.5)呈剂量依赖性增加(P<0.05)。4.体内外结果显示,PM_(2.5)处理后小鼠心脏组织和HL-1细胞铁死亡标志物TFRC水平显著增加,SLC7A11、SLC40A1和GPX4水平显著降低(P<0.05)。与FA组相比,UA组和CA组小鼠心脏组织中MDA、ROS和Fe~(2+)水平显著增加(P<0.05)。CA组小鼠心脏组织的4-HNE的水平明显高于FA组和UA组(P<0.05)。5.超声心动图结果显示,与CAD组相比,CAM组小鼠心脏的每搏输出量(SV)、射血分数(EF)和短轴缩短分数(FS)分别相对增加了1.27倍、1.24倍和1.12倍(P<0.05)。铁抑制剂(Fer-1)明显缓解PM_(2.5)暴露导致的心脏功能下降。HE染色结果显示,与CAD组小鼠相比,CAM组小鼠心脏组织的病理改变明显减轻。Masson染色显示,CAM组小鼠心脏胶原沉积明显减少。6.与CAD组相比,CAM组小鼠心脏的MDA和ROS水平分别降低55.7%和10.5%(P<0.05),铁抑制剂(Fer-1)处理减轻了PM_(2.5)诱导的Fe~(2+)的升高。免疫荧光结果显示,与CAD组相比,CAM组小鼠心脏中4-HNE水平降低54.7%(P<0.05)。Western Blot结果显示,与CAD组相比,CAM组小鼠心脏中TFRC水平降低26.8%(P<0.05);SLC7A11、SLC40A1和GPX4的水平分别升高2.2倍、2.04倍和2.15倍(P<0.05)。此外,与CAD组小鼠相比,CAM组小鼠心脏中Collagen I、α-SMA和TGF-β水平显著降低(P<0.05)。7.体内外结果显示,PM_(2.5)处理后小鼠心脏组织和HL-1细胞铁自噬标志物NCOA4水平呈剂量依赖性显著增加,而FHC水平呈剂Cell Cycle抑制剂量依赖性显著降低(P<0.05)。此外,免疫电镜结果显示,FA组小鼠心脏中FHC和NCOA4蛋白定位于胞质中。在CA组小鼠心脏组织的自噬小体中可以观察到FHC和NCOA4蛋白。PM_(2.5)处理后,si NCOA4组中TFRC水平较NC组下降56.68%(P<0.05);SLC7Medullary thymic epithelial cellsA11、SLC40A1和GPX4水平分别相对增加2.01倍、1.99倍和2.49倍(P<0.05)。8.与FA组小鼠相比,CA组小鼠心脏YY1水平明显升高(P<0.05)。在体外实验中,PM_(2.5)导致HL-1细胞中YY1水平以剂量依赖性的方式升高(P<0.05)。9.免疫共沉淀实验显示,YY1与NCOA4具有直接的相互作用。Western Blot结果显示,PM_(2.5)处理后,si YY1组NCOA4水平较NC组下降35.5%(P<0.05);si YY1组FHC水平比NC组增加了1.3倍(P<0.05)。结论:1.PM_(2.5)暴露诱导心脏纤维化。2.PM_(2.5)导致的心脏纤维化与铁死亡有关。3.PM_(2.5)可能通过激活YY1促进心肌细胞自噬依赖性铁死亡导致心脏纤维化。

为创制棉花耐旱种质资源，解决棉花耐旱资源贫乏以及提高水资源利用率，研究依据CRISPR/Cas9编辑原理，对课题组前期利用RT-PCR技MS-275体内术筛选耐旱相关基因GhNAC3(Gh＿D02G0790)的第一外显子区域设计2个20 bp的编辑靶点，并在陆地棉基因组数据库中比对分析靶点序列，排除非特异性编辑，将2个靶点核苷酸片段分别与gRNA-AtU6载体连接，通过2次PCR扩增，得到含特异性连接接头的AtU6-GhNAC3表达盒，再将表达盒连接到CRISPR/Cas9(pRGEB32-7)载体上，获得CRISPR-GhNAC3重组表达载体，利用农杆菌介导法转化陆地棉受体YZ-1,再生培养得到T_0代转基因幼苗，通过PCR检测Cas9蛋白基因获得阳性株系。对T_0代植株的靶点区域序列进行PCR扩增和测序分析，鉴定GhNAC3编辑类型。结果发现，CRISPR9-GhNAC3表达载体成功转化YZ-1Fer-1分子量,并获得40株转基因再生植株，经Cas9蛋白基因鉴定得到30株阳性株系，从阳性植株选择10株进行编辑类型测序分析，发现7plant synthetic biology株在靶点区域发生编辑，编辑类型主要为碱基片段缺失，缺失片段大小为3～28 bp, T_1代种植于大田，获得了同时出现黄化和矮化的突变体3株。