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目的 探讨隔药饼灸对环磷酰胺诱导免疫抑制兔共刺激分子细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4(CTLA-4)、4-1BB、CD28的p38 MAPK抑制剂影响。方法 选择大耳白兔32只，随机分为空白组、模型组、艾条灸组和隔药饼灸组，protamine nanomedicine每组8只。模型组、艾条灸组和隔药饼灸组予环磷酰胺诱导免疫抑制模型。模型制备成功次日，艾条灸组和隔药饼灸组分别予艾条灸和隔药饼灸，隔日1次，共10次。空白组和模型组不予艾灸。艾条灸组和隔药饼灸组末次干预次日，空白组和模型组同时间，采集腹腔静脉血，离心留取血清，采用ELISA法检测血清CTLA-4、4-1BB、CD28；腹腔静脉取血后，摘取脾脏和肝脏，免疫组化法检测脾脏和肝脏组织CTLA-4、4-1BB蛋白表达。结果 模型组血清CTLA-4、CD28水平均高于空白组，血清4-1BB水平低于空白组（P均<0.05）；与模型组比较，艾条灸组和隔药饼灸组血清CTLA-4、CD28水平均降低，血清4-1BB水平均升高（P均<0.05）；与艾条灸组比较，隔药饼灸组血清CTLA-4、CD28水平均降低，血清4-1BB水平升高（P均<0.05）。模型组脾脏和肝脏组织CTLA-4阳性表达均高于空白组，4-1BB阳性表达均低于空白组（P均<0.05）。与模型组比较，艾条灸组脾脏和肝脏组织CTLA-4阳性表达均降低（P均<0.05），肝脏组织4-1BB阳性表达升高（P<0.05），而脾脏组织4-1BB阳性表达升高不明显（P>0.05）；隔药饼灸组脾脏和肝脏组织CTLA-4阳性表达均降低（P均<0.05）,4-1BB阳性表达均升购买KPT-330高（P均<0.05）。艾条灸组与隔药饼灸组脾脏和肝脏组织CTLA-4、4-1BB阳性表达比较差异均无统计学意义（P均>0.05）。结论 隔药饼灸能够通过调节共刺激分子CTLA-4、4-1BB、CD28而改善环磷酰胺诱导免疫抑制兔的免疫功能，其效果优于艾条灸。

鲢(Hypophthalmichthys molitrix)属于辐鳍亚纲(Actinopterygii)、鲤形目(Cypriniformes)、鲤科(Cyprinidae)、鲢亚科(Hypophthalmichthyinae)、鲢属(Hypophthalmichthys),是我国重要的四大家鱼之一,具有生长速度快、经济价值高、净化水体等特点。为分析基因组中微卫星的分布特征及规律,开发多态性的分子标记,本研究基于鲢基因组筛选并开发出了21对具有多态性的微卫星标记,并使用多态性较高的微卫星和线粒体COI分别分析了湖北石首(SS)、监利(JL)、窑湾(YW)、浠水(XS)、红安(HA)、随州(SZ)、孝昌(X C)、黄陂(HP)8个养殖群体的遗传多样性和遗传结构,以期为鲢的种质资源保护提供理论依据。主要研究结果如下:(1)使用MISA软件在842.01 Mb的鲢基因组中共筛选出368,572个微卫星重复序列,微卫星序列全长为6,492,076 bp,占全基因组总长的0.77%,平均长度为84.66 bp,频率为437.73 loci/Mb,密度为7,713.16 bp/Mb。其中二碱基重复数量最多(204,873个),占微卫星总数的55.59%,其次是四核苷酸占19%(70,012个)、五核苷酸占12.19%(44,921个)、三核苷酸占10.32BOD biosensor%(38,048个)、六核苷酸占2.91%(10,718个)。鲢全基因组中前十的优势微卫星类型分别为AC、AT、AG、AAT、AAAT、AGAT、AAAAT、AAC、AAAAAT和ATC重复。染色体上的SSR数量与长度呈正相关。8个鲢样本中共筛选出21个能够稳定扩增且具有多态性的SSR标记,21个微卫星标记共检测到94个等位基因,等位基因(Na)范围为2～7(平均值4.476),有效等位基因(Ne)为1.AY-22989小鼠052～4.765(平均值2.757),观测杂合度(Ho)为0.017～0.875(平均值0.517),期望杂合度(He)为0.049～0.800(平均值0.553),多态信息含量(PIC)为0.048～0.768(平均值0.512)。(2)利用多态性较高的11对微卫星标记在湖北省的8个养殖群体中进行遗传多样性和遗传结构分析,发现8个群体的遗传多样性较丰富,8个群体中的等位基因数为4～8,平均为6.125,观测杂合度范围为0.580～0.712,平均值为0.632,期望杂合度为0.567～0.722,平均为0.658,多态性信息含量为0.516～0.689,平均为0.618,监利群体的遗传多样性最高,窑湾群体相对较低。群体间的遗传分化处于中等水平(Fst=0.10147)。AMOVA分析结果表明,89.43%的遗传变异来于群体内,群体间的遗传变异为10.57%。基于遗传距离及聚类分析均将8个群体划分为两个显著分化的谱系。(3)运用线粒体COI基因对湖北省8个鲢养殖群体进行了遗传多样性和遗传结构分析,8个群体中共检测出18种单倍型,76个变异位点,其中单位点突变为21个,简约信息位点55个。8个群体的平均T、C、A和G碱基的含量分别为:30.03%、26.62%、26.08%及17.32%。单倍型多样性和核苷酸多样性分别为0.604和0.00325,监利群体的遗传多样性最高(Hd:0.883,π:0.00699),窑湾群体遗传多样性最低(Hd:0.186,π:0.00085),群体间的遗传分化处于中等偏下的水平(Fst:0.05924),群体间和群体内的遗传距离较小,分别为0.00353和0.00329,分子方差分析(AMOVA)表明遗传变异主要发生于群体内(93.42%),群selleck HPLC体间的变异较少(6.58%)。UPGMA聚类树结果显示,监利群体最先聚为一支,随后黄陂、随州、浠水、红安、孝昌、窑湾和石首群体两两聚为一支,未形成较为显著的地理群体。基于18个单倍型构建的NJ系统发育树各节点分支的支持率较低(<50%),与单倍型网络图结果一致,均未形成明显的系统地理群体。

高性能聚对亚苯基苯并二噁唑(p-phenylenebenzobisoxazole,PBO)纤维具有优异的机械性能(刚度、强度和韧性)、高热稳定性和轻质性,广泛应用于汽车和航空航天更多复合材料、防弹衣和体育用品等。羟基修饰的PBO(hydroxy-p-phenylenebenzobisoxazole,HPBO)纤维表现出更好的光稳定性和界面剪切Z-VAD-FMK小鼠强度。HPBO纤维的单体2-羟基对苯二甲酸(2-hydroxyterephthalic acid,2-HTA)通常采用化学方法合成,包括2-溴对苯二甲酸催化水解,即在100℃、碱性环境下,铜粉催化2-溴对苯二甲酸生成2-HTA;Koble-Schmitt反应,温度为230-240℃,在K_2CO_3/CO_2和甲酸钾溶剂存在下,3-羟基苯甲酸(3-hydroxybenzoic acid,3-HBA)羧化为2-HTA。化学合成法存在空间选择性差,能耗高等问题。本论文开发了2-HTA的生物合成方法,构建了一条2-HTA的非天然生物合成途径,实现以葡萄糖为原料,利用微生物自身的莽草酸途径合成分支酸,随后分支酸经3-羟基苯甲酸合酶和羟基苯甲酸羧化酶催化最终生成2-HTA。主要工作如下:1.途径中关键催化元件的挖掘。酶促Kolbe-Schmitt反应可将酚类化合物与碳酸氢盐/CO_2反应,生成羟基苯甲酸。课题基于酶促Kolbe-Schmitt反应,筛选羟基苯甲酸羧化酶,以3-羟基苯甲酸(3-hydroxybenzoic acid,3-HBA)为底物,在芳香酸羧基的对位进行羧化反应,合成2-HTA。选择不同微生物来源的羟基苯甲酸羧化酶:包括来自米曲霉Aspergillus oryzae的2,3-二羟基苯甲酸脱羧酶2,3-Dihydroxybenzoic acid decarboxylase(2,3-DHBD＿Ao),来自尖镰孢Fusarium oxysporum的2,3-DHBD(2,3-DHBD＿Fo)和来自串珠毛孢子菌Trichosporon moniliiforme的水杨酸脱羧酶(SAD＿Tm)作为候选酶,在重组大肠杆菌中表达。采用全细胞催化方法,以3-HBA为底物,进行催化活性的测试。其中来自米曲霉的2,3-DHBD＿Ao显示出最高活性,2-HTA的产量达到108.97±2.21μg/L/mg_(蛋白)。2.进行酶工程改造,提高酶活。模拟2,3-DHBD＿Ao晶体(7WKM)和小分子2-HTA的结合,采用Discovery Studio预测酶的活性中心和结合口袋,对活性中心F193位和结合口袋T62进行突变研究。发现F193残基的苯环为催化所必须,当193位突变为脂肪族氨基酸193I、193L,酶活完全丧失,193Y虽然含有苯环,但是活性仅为野生型的43%。T62位的突变为62G、62A、62V,酶活分别提高了3.3、8.2、3.7倍。说明减小结合口袋的空间位阻是提高酶活的有效策略。分析结合口袋的疏水性,发现疏水性与酶活呈正相关,表明酶催化活性受疏水性和空间位阻双重影响。结合理性设计的F27G突变,采用双位点突变F27G/T62A,使2-HTA的产量增加24.7倍,达到2.69±0.029 mg/L/mg_(蛋白)。3.优化酶促Kolbe-Schmitt反应工艺,从头合成2-HTA。首先,采用碳酸氢盐作为C1源,发现0.5 M KHCO_3对大肠杆菌和酵母菌株的生长均有抑制作用。而KHCO3浓度低于0.5 M时,羧化效率大幅度下降。改用CO_2作为C1源,进行胞内2-HTA的生产。在酿酒酵母BY4741中构建2-HTA从头合成途径,表达外源3-羟基苯甲酸合酶Hyg5,2,3-二羟基苯甲酸脱羧酶2,3-DHBD＿Ao。工程菌株在CO_2环境下,在SC营养缺陷型培养基中发酵培养,48 h时发酵液中2-HTA滴度为5.50±0.71μg/L。4.采用提高生物量、增强中间体胞内积累、提高羧化酶活性等策略,提高2-HTA产量。敲除分支酸下游芳香氨基酸(苯丙氨酸、酪氨酸、色氨酸)的合成基因aro7和trp3,可以使得分支酸在胞内积累。因此采用酿酒酵母菌株S228C(△ura3、△aro7和△trp3)作为底盘菌株,表达3-羟基苯甲酸合酶和羧化酶突变体2,3-DHBD＿Ao~(T62A)在CO_2环境中培养36小时合成45.40±0.28μg/L 2-HTA。本论文开发了2Biomass conversion-HTA非天然生物合成新途径,为2-HTA工业生产奠定基础,证明了羟基苯甲酸羧化酶在固定CO_2生产对苯二甲酸及其衍生物方面的巨大潜力。

以天然产物为先导的结构优化是绿色新农药创制的主要途径和Wnt-C59供应商重点。γ-丁内酯是一种含氧五元杂环化合物,广泛存在于活性天然产物和药物分子中,具有丰富多样的生物活性,是药物研发的优势结构。Nicotlactone A是从烟草中分离得到的降木脂素类化合物,具有较高的抗烟草花叶病毒活性。本论文以nicotlactone A为研究对象,首先对其高效合成进行了研究,然后以nicotlactone A及其中间体为先导,通过结构简化、骨架跃迁、开环和活性拼接等策略设计合成了四个系列(I–IV)167个含γ-丁内酯结构衍生物,并采用~1H NMR、~(13)C NMR和HRMS对目标化合物进行了结构表征。生物活性测定表明,α-羟基-γ-丁内酯类衍生物II和α-亚甲基-γ-丁内酯结构苄基醚类衍生物III具有优异的抗病毒活性,同时利用透射电镜、等温热滴定和分子对接等手段研究了高活性化合物的抗植物病毒作用机理;此外,含α-亚甲基-γ-丁内酯结构水杨醛类衍生物IV表现出显著的抑菌活性,进一步对高活性化合物进行了初步的抑菌作用机制研究。主要研究结果如下:(1)以丙烯酸甲酯为原料,通过Morita-Baylis-Hillman、乙酰化、硼酸酯化、In(OTf)_3催化关环、Mukaiyama水合等5步反应获得了天然产物(±)-nicotlactone A的推测结构。同时,基于开发的合成策略,设计合成了30个nicotlactone A的类似物(含I-a系列和I-b系列)。生物活性研究表明,8位去甲基化产物I-b1在500μg/m L浓度下对烟草花叶病毒(TMV)的钝化活性(72.8%)、治疗活性(40.2%)及保护活性(60.3%),与(±)-nicotlactone A活性相当。同时,构效关系研究表明,苯环上给电子基团(烷氧基)有利于此类化合物的抗TMV活性,且γ-丁内酯环上8位甲基对此类化合物抗TMV活性影响较小,这为后续以化合物I-b1(L_2)为先导化合物的进一步结构优化提供了参考;(2)以抗病毒活性化合物I-b1(L_2)为先导,应用骨架跃迁策略,设计合成21个α-羟基-γ-丁内酯类II系列化合物,并测定了它们对TMV的钝化活性、保护活性和治疗活性。结果表明,II-b15表现出较好的抗TMV钝化活性(EC_(50)=226.2μg/m L),与先导化合物I-b1(EC_(50)=228.8μg/m L)相当;化合物II-b12表现出最好的保护活性(EC_(50)=382.3μg/m L),与先导化合物I-b1(EC_(50)=384.6μg/m L)相当;(3)以具有一定抗病毒和抗真菌活性、且易合成的中间体L_3为先导化合物,通过开环arsenic remediation策略,设计合成61个α-亚甲基-γ-丁内酯苄基醚类衍生物III-a–c,并对其抗病毒和抑菌活性进行了评价。生物活性测定表明,许多目标化合物对TMV具有良好的抗病毒活性,其中化合物III-b1表现出最好的抗TMV活性,在500μg/m L浓度下,其钝化活性、保护活性和治疗活性分别为88.9%、65.8%和52.8%,明显优于商业抗病毒剂病毒唑和宁南霉素。初步的抗病毒作用机制研究表明,化合物III-b1可以破坏病毒颗粒的完整性,与TMV外壳蛋白表现出较强的结合能力(K_BAY 73-4506溶解度d=3.06μM),由此推测TMV外壳蛋白可能为活性化合物III-b1的潜在作用靶标。此外,抑菌活性测定表明,化合物III-c16表现出较好且相对广谱的抑菌活性,其在50μg/m L浓度下对苹果树腐烂病菌抑制率达到100%,对小麦赤霉病菌抑制率达到89.5%;(4)基于水杨醛结构III-c系列化合物良好的抗病毒、抑菌活性,为了系统探讨其构效关系,进一步设计合成了55个含α-亚甲基-γ-丁内酯结构的水杨醛类衍生物IV-a–c,并对其抗病毒、抑菌活性进行了评价。生物测定研究表明,部分化合物表现出一定的抗病毒活性,而抑菌活性突出。目标化合物对苹果树腐烂病菌、水稻纹枯病菌和辣椒疫霉病菌等植物病原真菌和卵菌具有广谱的体外抑菌活性。其中,化合物IV-c3对水稻纹枯病菌表现出优异的抑菌活性,其EC_(50)值为0.65μg/m L,优于阳性对照吡唑醚菌酯(EC_(50)=1.44μg/m L),且与多菌灵(EC_(50)=0.33μg/m L)相当。此外,化合物IV-c3在100μg/m L浓度下对水稻纹枯病具有良好的体内保护活性(84.1%),优于吡唑醚菌酯(78.4%)。盆栽实验表明,化合物IV-c3在200μg/m L浓度下对水稻纹枯病有74.8%的保护作用,与井冈霉素(78.2%)相当。抑菌作用机理研究表明,化合物IV-c3可以改变菌丝体形态、增加细胞膜通透性、降低呼吸代谢,并能有效抑制水稻纹枯病菌核的萌发和形成,从而有效控制病害。综上所述,本研究开发了降木脂素类化合物nicotlactone A的简洁全合成路线,并对其抗烟草花叶病毒构效关系进行了研究,同时,基于nicotlactone A先导骨架,我们发掘了多个具有较高抗植物病毒活性和抑菌活性的γ-丁内酯类先导化合物/候选化合物,这对新型杀菌剂/抗病毒剂的创制和植物病害的有效防治具有重要意义。

目的:利用in-cell Western(ICW)技术研究基于转基因细胞的人胰岛素生物学活性测定方法。方法:以CHO-INSR B1284为靶细胞，用不同浓度的人胰岛素刺激靶细胞，采用ICW技术检测人胰岛素受体酪氨酸磷酸化水平，进行人胰岛素的体外生物学活性测定；根据《中华人民共和国药典》202ZD1839 IC500年版通则9401“生物制品生物活性/效价测定方法”对该方法进行专属性、相对准确度、中间精密度、线性与范围等方法学验证；以重组人胰岛素国家标准品为参比品，采用本方法测定人胰岛素原料药及其他人胰岛素类似物的生物学活性相对效价。结果:不同浓度的人胰岛素作用于CHO-INSR B1284细胞后具有较好的剂量依赖性；5个效价浓度的待测品经8次测定，相对效价的几何均值分别为：(63.76±4.38)%,(78.01±5.97)%,(99.52±4.62)%,(122AMP-mediated protein kinase.84±7.4)%,(151.71±8.81)%,相对偏倚均在±5%范围内，对应的几何变异系数(GCV,%)均<11%,GCV的置信上限均<20%;采用该方法能有效检测人胰岛素及其胰岛素类似物的效价。结论:利用ICW技术的人胰岛素体外生物学活性测定法专属性强、准确度高、精密度好，可JNJ-42756493体外作为人胰岛素生物学活性的常规检测方法。

针对开发高性能水系铜电池电极材料的迫切需求，通过简易的共沉淀法制备钒基普鲁士蓝类似物铁氰化钒（VHCF）用作水系铜电池正极，考察反应温度及转速对VHCF样品表面形貌及微观结构的影响，探究不同VHCF样品在电化学性能上的差异，并分析VHCF样品的铜离子储存机理。研究结果表明：通过适当提升反应温度及搅拌器的转速，可以制备出[Fe(CN)_6]~(4-)含量多，粒径小且结构稳定的立方相VHCF；丰富的[Fe(CN)_6]~(4-)可Proteases抑制剂以为Cu~(2+)离子提供更多的化学活位点，较小的粒径有利于提高Cu~(2+)离子的扩散速率，与普鲁士蓝骨架结合更稳定的结晶水则能改善电池循环稳定性FUT-175溶解度；电化学反应过程中，Cu~(2+)离子会取代VHCF骨架中的V~(5+)离子形成不可逆新相。VHCF正极在0.1 A/g电流密度下的首次放电比容量高达146.5 m A·h/g，循环500次后，保留了56.1 m A·h/g的可逆容量；在1.0 A/g的大电流密度下的放电比容量仍有60.1 m A·h/g。因此，钒基普鲁士蓝类network medicine似物VHCF在水系铜电池中的应用，为设计及发展水系铜电池高性能电极材料提供了新的可能性。

卵子质膜JUNO蛋白与精子IZUMO1蛋白是哺乳动物精卵融合的必需蛋白。Juno~(-/-)雌性小鼠由于其卵子不能与精子完成精卵融合而导致不育。对人JUNO蛋白的研究发现Trp62突变影响其与IZUMO1蛋白的结合从而影响人的精卵融合。然而,家畜JUNO蛋白的相关研究相对较少。PCI-32765半抑制浓度本文首先通过构建牛JUNO蛋白与IZUMO1蛋白的体细胞表达体系,研究二者结合在牛上的保守性;并通过该体系研究精子获能、顶体反应对JUNO与IZUMO1蛋白结合的影响;最后通过JUNO蛋白Trp62与Leu81的单突变,明确影响JUNO与IZUMO1结合的关键氨基酸位点。本研究推进了牛受精机制的研究进展,为完善牛体外胚胎生产技术体系奠定理论基础。结果如下:首先,通过慢病毒体系构建稳定表达牛JUNO蛋白(HEK293T-JUNO-EGFP)和IZUMO1蛋白(K562-IZUMO1-i RFP)的稳转体细胞系,并通过这两组细胞系进行试验,排除精卵融合中其他受精蛋白的参与,对牛JUNO与IZUMO1蛋白结合的保守性进行验证。1)通过膜Western-blot检测确定JUNO和IZUMO1分别在HEK293T和K562细胞膜上的稳定表达。2)通过牛精子与JUNO蛋白稳转株进行共培养试验,发现牛JUNO稳转株与牛精子的结合能力(100±11.93%)显著高于对照组(38.36±10.19%)(P<0.05)。并且随着添加JUNO抗体浓度的增加,JUNO稳转株与精子的粘附能力显著下降(P<0.05),即JUNO蛋白稳转株中膜表达的牛JUNO蛋白能够与牛精子结合。3)通过流式细胞仪分析检测发现,表达JUNO蛋白的稳转株与IZUMO1蛋白稳转株之间的结合能力(31.13±0.32%)显著高于对照组(EGFP)与IZUMO1稳转株的结合能力(16.76±0.74%)(P<0.05),进一步验证了牛JUNO-IZUMO1蛋白相互作用的特异性和保守性。其次,本试验研究了牛精子获能和顶体反应对JUNO与IZUMO1结合能力的影响。1)通过金霉素染色探究牛精子最佳获能时间,发现获能90min组与120min组(95.49±2.54%、96.71±1.72%)结果显著高于60min(86.85±7.02%)(P<0.05);2)通过溶血卵磷脂胆碱诱导精子顶体反应,并通过花生凝集素染色对精子顶体反应进行筛选,结果显示发生顶体反应的精子比率15min处理组(82.09±12.22%)显著高于5min组(51.40±12.41%)(P<0.05)。3)最终以获能90min、顶体反应15min为精子最佳反应时间,进行精子与牛JUNO蛋白稳转株进行共培养。结果显示,随着精子获能与顶体反应的完成,其与JUNO蛋白结合能力显著上升(27.48±11.30%、63.53±13.43%、100±4.41%)(P<0.05)。4)为探明精子获能和顶体反应对IZUMO1与JUNO结合能力影响的原因,我们研究了获能和顶体反应精子IZUMO1的定位变化selleck Ceralasertib。通过精子IZUMO1蛋白免疫荧光结果显示,IZUMO1蛋白自获能开始由质膜中释放出来,并于顶体反应开始后向赤道带进发,最终重新定位到赤道带上完成精子顶体反应。遂推测IZUMO1的释放与重新定位是精子上IZUMO1与JUNO蛋白结合的前提。最后,通过分别单突变牛JUNO蛋白Trp62与Leu81,明确了影响JUNO与IZUMO1结合的关键氨基酸位点。1)将表达牛JUNO蛋白W62A及L81A单突变的细胞与IZUMO1稳转株进行共培养,并通过流式细胞仪鉴别JUtype 2 pathologyNO蛋白Trp62与Leu81位点突变后对JUNO-IZUMO1结合的影响。W62A及L81A单突变与IZUMO1稳转株结合能力(95.65±7.87%、64.83±2.29%)显著低于牛野生型JUNO蛋白(131.71±20.30%)。2)对分别表达牛JUNO蛋白突变体的两种细胞与精子共培养,发现较正常牛JUNO蛋白(100±20.14%)相比,JUNO W62A及JUNO L81A单突变与牛精子粘附能力(48.30±8.08%、52.44±1.96%)显著下降(P<0.05)。综上所述,我们得出:1)牛JUNO蛋白是精子受精蛋白IZUMO1的受体,二者结合不需要其他受精蛋白的参与。2)牛精子受精蛋白IZUMO1通过获能及顶体反应重新分布到赤道带上,才能与卵子表面的JUNO蛋白结合。3)JUNO蛋白Trp62与Leu81位点是牛JUNO与IZUMO1蛋白结合的关键氨基酸位点。

从上海采集到表现卷叶和黄化症状的西瓜病叶，为明确其病原类型，本研究提取病叶RNA并进行小RNA高通量测序，经序列拼接比对和斑点酶联免疫吸附试验（dot-enzyme linked immunosorbent assay, Dot-ELISA），证实病样感染新德里番茄曲叶病毒（tomato leaf curl New Delhi virus, ToLCNselleck激酶抑制剂DV）。进一步通过滚环复制（rolling circle replication, RCR）富集DNA，利用背靠背引物进行聚合酶链反应（polymerase chain reactmice infectionion, PCR）扩增，获得2个ToLCNDV西瓜分离物的DNA-A和DNA-B全长序列，暂命名为ToLCNDV SH-WM1和ToLCNDV SH-WM2。使用MEGA 11.0、SDT v1.2等软件进行系统进化分析，结果表明，ToLCNDV SH-WM1与ToLCNDV SH-WM2及已报道的ToLCNDV其他中国分离物的亲缘关系较近，其全核苷酸序列相似度为98.99%～99.70%。全基因组多态性分析及群体变异分析显示，ToLCNDV中国分离物的单核苷酸变异率小于3%，其中，同义突变位点46个，非同义突变位点MK-1775 NMR29个，不存在插入或缺失突变，各个编码蛋白中AC4蛋白氨基酸序列最为保守。本研究揭示ToLCNDV中国分离物具有较低的种内遗传变异。

目的:观察电针对卵巢储备功能减退(DOR)大鼠卵巢功能的保护作用及对谷胱甘肽(GSH)相关调控酶γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶(γ-GCS)、谷胱甘肽还原酶(GR)蛋白及基因表达的影响，进一步探讨电针提高DOR模型大鼠抗氧化应激能力的可能机制。方法:雌性SD大鼠随机分为空白组、模型组、电针组，每组10只。采用雷公藤多苷片混悬液(50 mg·kg~(-1)·d~(-1))连续灌胃14 d复制DOR模型。电针组每日灌胃1 h后隔日交替电针双侧“肾俞”和“中脘”“关元”,每次10 min,连续14 d。干预期间每日记录各组大鼠的动情周期，计算动情周期紊乱率。干预结束后，采用HE染色法观察大鼠卵巢病理形态学变化；ELISA法检测大鼠血清卵泡刺激素(FSH)、抗苗勒管激素(AMH)、雌二醇(E_2)、8-羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)、硝基酪氨酸(NTY)的含量Bafilomycin A1；比色法检测肝脏组织谷胱甘肽(GSH)及氧化型谷胱甘肽(GSSG)含量，并计算两者比值；免疫组织化学法及荧光定量PCR法分别检测卵巢组织γ-GCS、GR蛋白及基因表达水平。结果:与空白组比较，模型组大鼠的动情周期紊乱率升高(P<0.01);卵巢组织卵泡颗粒细胞层次紊乱，闭锁卵泡增多，黄体固缩；血清FSH、8-OHdG、NTY含量升高(P<0.01),AMH、E_2含量降低(P<0.05,P<0.01);肝脏组织GSH、GSSG含量降低(P<0.05,P<0.01),GSH/GSSG降低(P<0.01);卵巢组织γ-GCS、GR蛋白及基因表达降低(P<0.01)。与模型组比较，电针组动情周期紊乱率下降(P<0.01);卵巢卵泡颗粒细胞层排列整齐，闭锁卵泡减少，黄体发育良好；血清FSH、8-OHdG、NTY含量降低(P<0.01,P<0.05),AMH、E_2含量升高(P<0.05,P<0.01);肝脏组织GSH、GSSG含量升高(P<0.05,P<0.01),GSH/GSSG升高(P<0.05);卵巢γ-GCS、GR蛋白表达升高(P<0.01),γ-GCS mRNA表达升高(P<0.05)。结论:电针可调节DOR大鼠的动情周期，改善epigenetic therapy性激素水平，减轻机体氧化损伤程度，增加卵巢组织γ-GCS、GR蛋白及基因表达，提高肝脏GSH水平，提示电针可能通过调节卵巢Dorsomorphin浓度GSH相关调控酶蛋白及mRNA表达，提高机体抗氧化应激能力，改善卵巢功能。

背景近年来,肥胖已成为全球重大公共卫生问题之一。肥胖患者生理学的变化可导致药物的分布、结合及消除发生改变,常规体重剂量给药易发生药物蓄积。在全麻术后易发生肌松残余,进而导致上呼吸道梗阻、缺氧和术后肺部并发症,影响患者围术期康复。因此,为了确保肥胖病人的舒适与安全,必须在手术结束时迅速可靠地逆转神经肌肉阻断作用。目的研究在肥胖患者减重手术中,舒更葡糖钠注射液分别按总体重(Total bodyweight,TBW)和去脂肪体重(Lean bodyweiGDC-0973生产商ght,LBW)给药时,其快速拮抗罗库溴铵诱导的神经肌肉阻滞(Neuromuscular block,NMB)对肥胖患者作用的有效性和安全性。方法选取济南市中心医院2022年4月至2023年1月择期全麻腹腔镜减重手术患者82例,按随机数字表法随机分为实验组与对照组,实验组患者按去脂肪体重给予舒更葡糖钠注射液2mg/kg,对照组患者按实际体重给予舒更葡糖钠注射液2mg/kg;用TOF-Watch SX肌松监测仪监测肌松,直至患者离开手术室。比较两组患者用药后TOFr恢复0.9的时间;拔管时间;PACU停留时间;手术时间;住院时间;记录罗库溴铵用量,舒更葡糖纳用量及给药时的温度,给药前1分钟,后1分钟,5分钟,15分钟Prosthetic joint infection,30分钟生命体征及不良反应(包括窦性心动过缓及其他心律失常,过敏反应,苏醒期疼痛、头晕、发热、恶心呕吐、呼吸抑制、躁动,术后肺部并发症等)的发生率。结果1、两组患者的一般资料(年龄、身高、性别、腹围、总体重、体重指数、去脂体重)分析,差异无统计学意义(P>0.05)。2、两组患者的罗库溴铵使用剂量、给药温度、手术时间、拔管时间、住院时间,差异无统计学意义(P>0.05)。3、两组患者舒更葡糖钠使用剂量比较,对照组用量明显高于实验组,差异有明显统计学意义(P<0.01)。4、两组患者在基线T1,给药前1分钟以及给药后1分钟、5分钟、15分钟、30分钟生命体征数值相比,差异无统计学意义(P>0.05)。5、两组患者应用舒更葡糖钠后恢复TOFr>0.9时间对比,对照组患者明显少此网站于试验组,差异有显著统计学意义(P<0.01)。结论1、LBW和TBW剂量的舒更葡糖钠,都可以有效逆转罗库溴铵诱导的中度NMB,但LBW剂量的舒更葡糖钠用量明显减少。2、使用LBW剂量显著延长了逆转时间。