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魔芋粉中脂肪、蛋白质等限制魔芋葡甘聚糖的应用，因此对魔芋粉进行纯化处理得到纯度更高的魔芋葡甘聚糖应用于食品、药品等产业。本研究采用乙醇作为溶剂，对利用超声波辅助纯化魔芋粉的工艺进行优化。经过单因素试验分析料液比、乙醇浓度、超声时间、超声功率、超声温度5个相关因素的显著性，选择料液比、乙醇浓度和超声时间为较显著的因子进行分析。而后通过响应面拟合模型对各相关因素进行优化，最终确定在料液比1:102 (g/mL)、乙醇浓度73%、超声时间55 min、超声Hedgehog/Smoothened抑制剂功率175 W、超声温度50 ℃条件下，魔芋葡甘聚糖含量为88.1%，与预测值相近，纯化工艺切实可行。利用NSC 119875 NMR红外光谱仪和X射线衍射仪测定优化前后样品结构，未发现明显差异electron mediators。经该工艺纯化后的魔芋粉中魔芋葡甘聚糖含量明显高于未纯化魔芋粉，且结构受影响较小，本文旨在为魔芋葡甘聚糖的高效开发和利用提供理论依据。

用4μmol/L氯化镉处理大鼠肝脏细胞BRL-3A 12,24,36 h后，通过CCK-8法测定细胞活力，比色法检测细胞上清中乳酸脱氢酶(LDH)的含量，流式细胞术检测细胞中活性氧(ROS)的含量及线粒体膜电位水平，比色法检测细胞中氧化还原相关指标丙二醛(MDAM-2282A)、还原型谷胱甘肽(GSH)和氧化型谷胱甘肽selleck激酶抑制剂(GSSG)含量的变化，Western blot检测铁死亡相关蛋白的表达，荧光探针法检测细胞中porous media亚铁离子(Fe~(2+))的含量，电子显微镜观察细胞的超微结构。结果显示，镉(Cd)处理后，BRL-3A细胞活力下降，LDH水平显著升高；ROS、MDA、GSH、GSSG和Fe~(2+)含量极显著增加(P<0.01),FTH1、TfR1、HO-1蛋白表达水平极显著升高(P<0.01),GPX4蛋白表达水平极显著下降(P<0.01),SLC7A11蛋白水平变化不显著，细胞线粒体萎缩变小、嵴减少或消失。结果表明，Cd处理可致BRL-3A细胞发生脂质过氧化物和Fe~(2+)的蓄积，GPX4水平下降，从而介导细胞发生铁死亡。

目的 探索白藜芦醇（RES）调控核因子E2相关因子2(Nrf2)-谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)通路对H_2O_2诱导A549细胞铁死亡的影响。方法 将人肺泡上皮A549细胞随机分为对照组、selleckchemH_2O_2组、RES低浓度（RES-L,50μmol/L）组、RES中浓度（RES-M,100μmol/L）组、RES高浓度（RES-H,150μmol/L）组、ML385(Nrf2抑制剂，2μmol/L ML385)组、RES-H+ML385(150μmol/L RES+2μmol/L ML385)组。除对照组外，其余各组均经H_2O_2处理细胞后，再使用相应剂量的药物或抑制剂进行干预。干预结束后，MTT法测定各组细胞活力，试剂盒检测细胞内铁离子含量，酶联免疫吸附试验（ELISA）检测丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）、还原型谷胱甘肽（GSH）水平；透射电子显微镜观察线粒体结构；Western blot法检测Nrf2、GPX4、血红素加氧酶1(HO-1)蛋白表达水平。结果 与对照组相比，H_2O_2组线粒体形态较受损严重，细胞存活率、SOD、GSH含量以及Nrf2、GPX4、HO-1蛋白表达均降低，铁离子、MDA含量增加（P<Proteasome抑制剂0.05）；与H_2O_2组相比，随着Rbiomimetic roboticsES浓度的增加，A549细胞线粒体形态损伤得到改善，细胞存活率、SOD、GSH含量以及Nrf2、GPX4、HO-1蛋白表达逐渐增加，铁离子、MDA含量逐渐下降（P<0.05），但ML385组细胞线粒体损伤加重，细胞存活率、SOD、GSH含量以及Nrf2、GPX4、HO-1蛋白表达均降低，铁离子、MDA含量增加（P<0.05），且ML385处理可逆转RES对H_2O_2诱导A549细胞的保护作用。结论 RES可能通过激活Nrf2-GPX4信号通路降低H_2O_2诱导的A549细胞内氧化应激水平，抑制铁死亡。

目的：探讨阿司匹林联合低分子肝素在胎儿宫内生长受限临床治疗中的应用效果。方法：选取我院2020年4月～20PF-0732133222年7月收治的74例胎儿宫内生长受限孕产妇作为研究对象Genomic and biochemical potential，分为观察组(阿司匹林联合低分子肝素)和对照组(低分子肝素)各37例，对比两组的治疗效果。结果：比较胎儿脐动脉血流参数，观察组治疗后的动力参数(PI)值、阻力参数(RI)值、收缩期血液流速高值(S)与舒张晚期血液流速高值(D)的selleck比值(S/D)水平低于对照组(P<0.05)。比较胎儿发育情况，观察组治疗后的胎儿腹围、头围、双顶径、股骨长高于对照组(P<0.05)。比较分娩结局，观察组的不良分娩结局发生率(13.51%)低于对照组(35.14%)(P<0.05)。比较血清雌三醇(E3)、胎盘生长因子(PLGF)表达水平，观察组的E3表达水平、PLGF表达水平高于对照组(P<0.05)。结论：在胎儿宫内生长受限的临床治疗中，阿司匹林联合低分子肝素具有良好的应用疗效，保障胎儿健康发育，改善孕产妇的分娩结局。

目的:探索PBC合并肝外自身免疫性疾病的分布情况、临床特征、危险因素以及预后分析。方法:回顾性纳入2017年1月-2022年7月于新疆医科大学第一附属医院348例PBC患者,分为PBC组(n=192)和PBC合并组(n=156)。收集患者首诊的https://www.selleck.cn/products/PD-0325901.html一般资料、血常规、肝肾功、血脂、凝血功能等临床资料,随访并记录患者出现肝脏终末事件的时间。结果:共诊断出21种不同的肝外自身免疫性疾病。其中合并干燥综合征54例最常见;其次合并桥本甲状腺炎36例、系统性红斑狼疮35例、类风湿性关节炎14例、肺间质纤维化10例。两组出现瘙痒、口干、眼干、黄疸、肝功能异常、关节肿痛、皮肤瘀斑、发热的例数差别具有统计学差异(P均<0.05)。PBC合并组中AST、ALT、ALPEthnomedicinal uses、GGT、TBi L、TC、HDLC、LDL-C、Ig M、C3、C4均低于PBC组,NEU高于PBC组,差异具有统计学意义(P均<0.05)。PBC合并组中AMA、AMA-M2、抗gp210阳性率均低于PBC组,差异具有统计学意义(P均<0.05)。PBC合并组肝硬化、脾大、食管PR-171溶解度静脉曲张、胃底静脉曲张发生率均低于PBC组,差异具有统计学意义(P均<0.05)。多因素二元logistic回归分析显示LDL-C升高是影响PBC患者合并肝外自身免疫性疾病危险因素(P<0.05)。经Kaplan-Meier曲线分析两组无终点事件生存率差别不具有统计学差异(P均>0.05)。COX回归分析显示合并肝外自身免疫疾病及合并不同肝外自身免疫性疾病不影响PBC患者发生肝脏终末事件(P均>0.05)。结论:PBC患者合并SS最常见,其次为合并HT及SLE。PBC合并肝外自身免疫性疾病患者在临床表现、临床指标上均有不同,且肝损害轻。LDL-C升高是PBC患者合并肝外自身免疫性疾病的危险因素。合并肝外自身免疫性疾病时不影响PBC患者发生肝脏终末事件。

本课题通过采用大鼠原位自体肝移植(Autogenous orthotopic liver transplantation,AOLT)肝脏冷缺血再灌注(Ischemia-reperfusion,I/R)诱发肠损伤模型,明确大鼠AOLT肝脏冷I/R诱发肠损伤中是否有铁死亡发生以及观察铁死亡抑制剂Ferrostain-1对自体原位肝移植大鼠肠的保护作用,同时探讨铁死亡激活剂柳氮磺吡啶(SulfasalazGW4869说明书ine,SAS)在大鼠AOLT肝脏冷I/R诱发肠损伤铁死亡的作用与可能机制。第一部分铁死亡在大鼠自体肝移植围术期肠损伤中的作用研究目的:利用大鼠AOLT模型,观察脂质活性氧(Lipid reactive oxygen species,L-ROS)抑制剂Ferrostain-1作用于铁死亡信号通路,明确大鼠AOLT肝脏冷I/R诱发肠损伤中是否有铁死亡发生。方法:SPF级健康雄性成年SD大鼠18只,10～12周龄,体重300±20 g,采用随机数字表法分为3组(n=6):假手术组(Sham组)、模型组(I/R组)、铁死亡抑制剂Ferrostain-1组(I/R+Fer-1组)。Sham组大鼠在麻醉完善后沿腹中线开腹,剥离出肝周围血管及韧带后关闭腹腔;I/R组大鼠采用AOLT肝脏冷I/R模型,使用4℃0.9%注射用生理盐水从门静脉持续灌注,30±1 min后恢复大鼠肝脏血流灌注,温盐水冲洗后关闭腹腔;I/R+Fer-1组大鼠建模前1 h腹腔注射Fer-1 5 mg/kg,操作步骤同I/R组。于再灌注后24 h从大鼠肝下下腔静脉抽取血液;并切取部分大鼠回肠组织行相关指标检测;高倍显微镜下观察肠组织切片病理变化;采用ELISA法测定血清IL-6水平及肠损伤标记物二胺氧化酶(Diamine Oxidase,DAO)水平;用硫代巴比妥酸法测定大鼠肠组织丙二醛(Malondialdehyde,MDA)含量及血清MDA浓度;并应用相关试剂盒检测肠组织内Fe~(2+)AD biomarkers含量及超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase,SOD)、还原性谷胱甘肽(Glutathione,GSH)、谷胱甘肽过氧化物酶4(Glutathione peroxidase 4,GPX4)浓度;Western Blot法检测铁蛋白重链(Ferritin heavy chain,FTH1)和溶质载体家族7成员11(Solute carrier family 7 member 11,SLC7A11)蛋白表达水平。结果:与Sham组比较,I/R组和I/R+Fer-1组大鼠再灌注后24 h肠Chiu’s评分和W/D比率均增高(P<0.05);血清内IL-6、MDA水平显著升高(P<0.05);肠组织DAO、MDA、Fe~(2+)水平显著升高(P<0.05);肠组织SOD、GSH、GPX4水平降低(P<0.05);肠组织FTH1和SLC7A11蛋白表达均下调(P<0.05)。与I/R组比较,I/R+Fer-1组大鼠再灌注后24 h的肠Chiu’s评分及W/D比率均下降(P<0.05);血清内IL-6、MDA水平降低(P<0.05);肠组织DAO、MDA、Fe~(2+)水平显著下降(P<0.05);肠组织SOD、GSH、GPX4水平升高(P<0.05);肠组织FTH1和SLC7A11蛋白表达均上调(P<0.05)。结论:铁死亡参与了大鼠肝脏冷缺血再灌注诱发肠损伤的病理生理过程。第二部分柳氮磺吡啶对肝移植大鼠肠损伤铁死亡的影响及机制目的:探讨铁死亡激活剂柳氮磺吡啶(Sulfasalazine,SAS)在大鼠AOLT肝脏冷I/R诱发肠损伤铁死亡的作用与可能机制。方法:SPF级成年雄性SD大鼠60只,采用随机数字表法分为5组(n=12):假手术组(Sham组)、模型组(I/R组)、Ferrostain-1组(I/R+Fer-1组)、SAS组(I/R+SAS组)、SAS+Ferrostain-1组(I/R+SAS+Fer-1组)。并于I/R后6 h和24 h,分别随机选取大鼠6只。I/R组术前1 h腹腔注射等容量DMSO 1 ml,I/R+Fer-1组术前1 h腹腔注Ferrostain-1 5 mg/kg;I/R+SAS组术前连续7天腹腔注射SAS(2次/d,每次500 mg/kg);I/R+SAS+Fer-1组连续7天腹腔注射SAS(2次/d,每次500 mg/kg),并在术前1 h腹腔注射Ferrostain-1 5 mg/kg。于建模后6h和24h取下腔静脉血标本,采用ELISA法测定测定血清MDA、IL-6浓度;各组于建模后6h和24h取回肠组织,光镜下观察肠组织病理切片;用试剂盒测定肠SOD、MDA、GSH、GPX4、Fe~(2+)含量;采用Western Blot法测定GPX4、SLC7A11蛋白表达。结果:与Sham组比较,其余各组在大鼠建模后6 h和24 h Chiu’s评分和W/D比率升高(P<0.05);血清IL-6、MDA水平显著升高(P<0.05);肠组织DAO、MDA、Fe~(2+)水平显著升高(P<0.05);肠组织SOD、GSH、GPX4水平降低(P<0.05);肠组织FTH1和SLC7A11蛋白表达均下调(P<0.05)。与I/R组比较,I/R+SAS组在大鼠建模后6 h和24 h Chiu’s评分和W/D比率升高(P<0.05);血清IL-6、MDA水平升高(P<0.05);肠组织DAO、MDA、Fe~(2+)水平显著升高(P<0.05);肠组织SOD、GSH、GPX4水平降低(P<0.05);肠组织FTH1和SLC7A11蛋白表达均下调(P<0.05)。与SAS组比较,I/R+SAS+Fer-1组在大鼠建模后6 h和24 h Chiu’s评分和W/D比率降低(P<0.05);血清IL-6、MDA水平降低(P<0.05);肠组织DAO、MDA、Fe~(https://www.selleck.cn/products/SB-431542.html2+)水平显著降低(P<0.05);肠组织SOD、GSH、GPX4水平增加(P<0.05);肠组织GPX4和SLC7A11蛋白表达均上调(P<0.05)。另外,大鼠自体LT肝脏I/R过程中,再灌注6h和24h各项指标变化趋势基本相同,差异不明显。结论:SAS在大鼠AOLT肝脏冷I/R诱发肠损伤中可能通过抑制System Xcˉ/GSH/GPX4信号轴或再灌注后铁超载,造成L-ROS大量积累,激活细胞铁死亡,使肠损伤进一步加重。

【目的】脑胶质瘤异柠檬酸脱氢酶(Isocitrate dehydrogenase,IDH)基因分型及世界卫生组织(world health organization,WHO)分级、细胞核增殖相关抗原(Ki-67)表达状态与患者治疗方案的选择和预后密切相关,术前对其精准评价具有十分重要的临床意义。本研究探讨多体素(multivoxel,MV)氢质子磁共振波谱成像(~1H-magnetic resonance spectroscopy,~1H-MRBaf-A1价格S)在脑胶质瘤IDH基因分型及WHO分级、Ki-67表达的应用价值研究。【方法】回顾性分析2018年7月至2023年2月期间于我院神经外科经手术病理证实且符合入组条件的57例脑胶质瘤患者的临床及影像资料,其中低级别胶质瘤(low-grade glioma,LGG)组(Ⅱ级,n=17),高级别胶质瘤(high-grade glioma,HGG)组(Ⅲ级～Ⅳ级,n=40),IDH基因突变组(n=24)和IDH基因野生组(n=33)。所有患者均在术前行常规磁共振(magnetic resonance Imaging,MRI)平扫+增强及多体素~1H-MRS检查,且术后具有组织病理及IDH1基因、Ki-67等免疫组化检测结果。参照2016年WHO中枢神经系统肿瘤分类第4版修订版标准(分级和基因分型)将入选研究对象分为各两组,分别为“低级别胶质瘤组(Ⅱ级,n=17)和高级别胶质瘤组(Ⅲ级～Ⅳ级,n=40)”,“IDH基因突变组(n=24)和IDH基因野生组(n=33)”分析和比较不同级别、不同IDH基因分型脑胶质瘤组间患者的人口统计学特征(性别和年龄)、N-乙酰天门冬氨酸(N-Acetyl Aspartate,NAA)/肌酸(Creatine,Cr)、胆碱(Choline,Cho)/Cr、Cho/NAA、Ki-67指数表达的差异,利用Spearman相关性分析分别检验~1H-MRS鉴别不同级别、不同IDH基因分型脑胶质瘤有统计学意义的指标与Ki-67指数表达之间的相关性。【结果】1.低级别胶质瘤组平均年龄[Fer-1小鼠38.5±10.5岁]低于高级别胶质瘤组[53.9±15.0岁],差异具有统计学意义(P<0.01),两组间性别差异无统计学意义(P>0.05);IDH突变型胶质瘤组平均年龄[39.0±10.0岁]低于IDH野生型胶质瘤组[58.8±14.4岁],差异具有统计学意义(P<0.01),两组间性别差异无统计学意义(P>0.05)。2.高级别胶质瘤组Cho/Cr、Cho/NAA比值[3.17±0.41、4.74±0.63]均高于低级别胶质瘤组[2.15±0.52、2.37±0.59],差异具有统计学意义(P<0.01),高别胶质瘤组NAA/Cr比值[0.82±0.04]低于低级别胶质瘤组[0.91±0.02],差异具有统计学意义(P<0.01);IDH野生型胶质瘤组Cho/NAA比值[3.62±0.16]高于IDH突变型胶质瘤组,差异具有统计学意义(P<0.01),而IDH突变型胶质瘤组与IDH野生型胶质瘤组间NAA/Cr、Cho/Cr比值差异无统计学意义(P>0.05)。3.高级别胶质瘤组Ki-67高表达率[90%]高于低级别胶质瘤组[0%],差异具有统计学意义(P<0.01);IDH野生型胶质瘤组Ki-67高表达率[93%]高于IDH突变型胶质瘤组[21%],差异具有统计学意义(P<0.01)。4.~1H-MRS在区别低、高级别胶质瘤两组之间具有统计学意义的指标Cho/NAA、Cho/Cr、NAA/Cr与胶质瘤Ki-67指数之间均存在相关性(P<0.01),相关性系数r值分别为0.886、0.733、-0.399;~1H-toxicohypoxic encephalopathyMRS在区别IDH突变、野生型胶质瘤两组之间具有统计学意义的指标Cho/NAA与Ki-67之间存在相关性(P<0.01),相关系数为0.386。【结论】1.多体素~1H-MRS成像技术能够作为传统磁共振检查的有效补充,提高对脑胶质瘤IDH基因分型及分级诊断的能力。2.Cho/Cr、Cho/NAA及NAA/Cr在鉴别脑胶质瘤分级中具有较大临床价值。Cho/NAA在鉴别脑胶质瘤IDH基因分型方面可能具有一定的临床价值。3.在鉴别脑胶质瘤分级中,Cho/Cr、Cho/NAA比值与脑胶质瘤Ki-67指数表达呈正相关,NAA/Cr与Ki-67指数表达呈负相关。在鉴别脑胶质瘤IDH基因分型中,Cho/NAA比值与脑胶质瘤Ki-67指数表达呈正相关。

目的：探讨前列腺汽化电切术（transurethral electroevaporation of the prostate,TUVP）治疗前列腺增生（benign prostatic hyperplasia,BPH）合并慢性前列腺炎（chronic prostatitis,CP）患者的效果及其对炎症因子、尿动力学的影响。方法：选取2020年1月—2021年1月佳木斯市中心医院收治的90例BPH合并CP患者，按照随机数表法分为两组，每组各45例。对照组采用药物治疗，观察组在药物治疗的基础上行TUVP治疗。比较两组患者国际前列腺症状量表评分（international prostate symptom score,IPSS），慢性前列腺炎症状量表评分（national institutes of health chronic prostatitis symptom index,NIH-CPSI），炎症因子[白介素-1β (PLX3397抑制剂interleukin-1β,IL-1β)、IL-2和肿瘤坏死因子-α (tumor necrosis factor-α,TNF-α)]水平，尿动力学指标[最大尿流率（maximum urine flow rate,QMax）、最大逼尿肌压力（maximNSC125066纯度um detrusor pressure,Pdet.max）、残余尿量（post-void residual,PVR）]和并发症发生情况。结果：治疗后，两组患者IPSS、NIHTranslational Research-CPSI评分均下降，且观察组低于对照组，差异有统计学意义（t=26.409、23.970,P<0.05）；治疗后，两组患者血清IL-1β、IL-2和TNF-α水平下降，且观察组低于对照组，差异有统计学意义（t=14.240、17.078、17.694,P<0.05）；治疗后，两组患者QMax增加，Pdet.max、PVR减少，且观察组QMax高于对照组，Pdet.max、PVR低于对照组，差异有统计学意义（t=14.169、10.533、35.491,P<0.05）；观察组并发症发生率与对照组比较，差异无统计学意义（χ~2=2.589,P>0.108）。结论：TUVP治疗BPH合并CP患者效果确切，能缓解患者下尿路症状和前列腺炎症状，减轻其炎症反应，改善尿动力学。

自加速光束由于传播过程中呈现出横向自加速的特性,引起越来越多学者的关注。其中,艾里光束是一种经典的自加速光束,除了在广为人知的自加速光束领域,它也是突变光学AZD2281临床试验中与折叠型突变相对应的一种突变光束;与艾里光束类似的还有皮尔斯光束,突变类型为尖点突变。上述两种光束由于具有奇异的光学特性,如自加速、自我修复、无衍射VX-445生产商、传播形式不变等性质,在光学微加工、光学微操纵、光子弹等领域具有广泛的应用。艾里光束与皮尔斯光束是突变光学的基本突变型中阶数较低的两类突变光束,阶数较高的突变光束(燕尾、蝴蝶)却少有关注,本文基于突变理论中的蝴蝶型突变,产生了新型奇异蝴蝶光束,对蝴蝶光束的特性Stem cell toxicology及其焦散进行了理论计算、数值模拟和实验验证,深入分析了蝴蝶光束的光学特性及潜在的应用。本文主要研究内容如下:首先,推导了蝴蝶光束的光场解析式,其由势函数中的状态变量和控制变量确定。通过对蝴蝶光束进行降维操作得到二维蝴蝶光束的波前,研究了二维蝴蝶光束的波前分布,焦散分布,传播特性,传播焦散和频谱分布。由于蝴蝶光束的高维性,二维蝴蝶光束具有高度可调性,本文着重探究了其中两种蝴蝶光束的传播特性。不同蝴蝶光束的传播特性各有不同,其中一种蝴蝶光束具有传播形式不变性,另一种传播后逐渐转化为皮尔斯光束的形式。此外,研究发现蝴蝶光束的频谱振幅和相位分布都可以表示为常见的多项式,如二次方、三次方的振幅分布,六次方的相位分布,后续实验也验证了蝴蝶光束频谱的这一特性。其次,通过对蝴蝶光场降维得到一维蝴蝶光束,再对其作径向对称,得到环形蝴蝶光束。研究了环形蝴蝶光束的光场分布和传播特性,发现环形蝴蝶光束在传播初始时光强的最大值几乎不变,但是在传播到一定距离后光场强度会突然提高几乎两个数量级,这种特性表明环形蝴蝶光束具有突然自聚焦的特性,是一类新型的自聚焦光束。最后,对环形蝴蝶光束进行调控以改变其焦距和自聚焦性能。由于蝴蝶光束的高维性,可以通过改变蝴蝶衍射突变积分式中的常数项控制变量来对环形蝴蝶光束进行调控,经过模拟和实验验证发现,改变常数项控制变量的值可以改变环形蝴蝶光束的焦距;另外,植入涡旋也可以对环形蝴蝶光束进行调控,在适当位置加入涡旋可以提高环形蝴蝶光束的自聚焦性能。

目的:检测AMPKα、Sirt1、MCP-1在幼兔激素性股骨头缺血坏死模型股骨头组织中的表达,体外培养人破骨细胞在不同浓度糖皮质激素作用下检测AMPKα、Sirt1的表达及细胞凋亡情况,探讨AMPK-Sirt1信号通路与幼兔激素性股骨头坏死发病的相关性。方法:1.选取8周龄新西兰白兔60只,体重1.7～2.3kg。随机表法分为2组:激素注射组(50只),醋酸泼尼松龙7.5mg/kg双侧臀肌交替注射,每周2次,共8周;对medium-chain dehydrogenase照组(10只),以相同方法注射等量生理盐水。末次注射完成后第7天,处死全部实验动物并立即取股骨头。根据股骨头大体形态学和组织病理学切片判断是否发生骨坏死,将激素注射组分成发病组和未发病组。RT-PCR检测AMPKα1、Sirt1、MCP-1基因在各组股骨头中的表达水平,ELISA定量检测AMPKα、Sirt1蛋白在各组股骨头中的表达量,比较不同组间表达差异。2.体外培养人破骨细胞传至第四代,分为空白对照组和激素干预组(3组)。激素干预组(3组):分别加入不同浓度的醋酸泼尼松龙,使其在培养基中的终浓度为10~(-8)mol/L、10~(-7)mol/L、10~(-6)mol/L。每组培养基中DMSO浓度不高于0.1%,作用72小时。应用RT-PCR、Western-blotting检测AMPKα、Sirt1在各组中的表达水平。流式细胞术检测同时期各组破骨细胞总凋亡率,TRAP染色观察破骨细胞。结果:1.造模结束时,激素注射组存活30只,8只判定股骨头坏死阳性(7只单侧发病、1只双侧发病),造模成功率26.67%(8/30);对照组无死亡。组织病理学切片:未发病组和发病组骨小梁稀疏、变细,骨髓腔腔体增大,内部脂肪细胞增大、增多。发病组骨小梁断裂,骺板细胞排列不规则,软骨细胞柱倾斜;骨陷窝内骨细胞核固缩、变形、边聚,空骨陷窝增多。RT-PCR结果示:AMPKα1在对照组、未发病组及发病组的相对表达量为1.00±0.05、1.42±0.02、2.20±0.03,三组间差异均有统计学意义;Sirt1在对照组、未发病组及发病组的相对表达量为1.00±0.04、1.46±0.06、2.05±0.06,三组间差异均有统计学意义;MCP-1在对照组、未发病组及发病组的相对表达量为1.01±0.10、3.67±0.11、3.94±0.13,未发病组、发病组与对照组比较差异有统计学意义,未发病组与发病组比较差异无统计学意义(P>0.05)。ELISA结果示:AMPKα在对照组、未发病组及发病组的表达量(Units/m L)为115.4±2.23、242.5±18.06、505.6±9.20,三组间差异均有统计学意义。Sirt1在对照组、未发病组及发病组的表达量(ng/m L)为5.27±0.26、6.78±0.29、9.27±0.75,三组间差异均有统计学意义。2.体外培养人破骨细胞72h后,流式细胞术检测空白对照组、激素干预组(10~(-8)mol/L、10~(-7)mol/L、10~(-6)mol/L)细胞总凋亡率(%)为:4.94±0.54、61.56±1.54、67.54±1.56、75.92±1.11,激素干预组与空白对照组比较差异均有统计学意义。RT-PCR结果示:AMPKα1在selleck激酶抑制剂空白对照组、激素干预组(10~(-8)mol/L、10~(-7)mol/L、10~(-6)mol/L)相对表达量为1.00±0.03、0.70±0.06、0.54±0.03、0.19±0.02,激素干预组与对照组比较差异均有统计学意义,激素干预组内相对表达量随醋酸泼尼松龙浓度升高而降低;Sirt1在空白对照组、激素干预组(10~(-8)mol/L、10~(-7)mol/L、10~(-6)mol/L)相对表达量为1.01±0.05、1.02±0.06、0.30±0.06、0.08±0.04,激素干预组(10~(-7)mol/L、10~(-6)mol/L)与对照组比较差异有统计学意义,激素干预组(10~(-8)mol/L)Belnacasan IC50与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05),在激素干预组内相对表达量随醋酸泼尼松龙浓度升高而降低。Western-blotting结果示:AMPKα在空白对照组、激素干预组(10~(-8)mol/L、10~(-7)mol/L、10~(-6)mol/L)相对表达量为1.00±0.02、0.93±0.02、0.84±0.02、0.55±0.02,激素干预组(10~(-7)mol/L、10~(-6)mol/L)与对照组比较差异有统计学意义,激素干预组(10~(-8)mol/L)与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05),在激素干预组内相对表达量随醋酸泼尼松龙浓度升高而降低;Sirt1在空白对照组、激素干预组(10~(-8)mol/L、10~(-7)mol/L、10~(-6)mol/L)相对表达量为1.00±0.02、1.07±0.03、0.65±0.06、0.34±0.02,激素干预组(10~(-7)mol/L、10~(-6)mol/L)与对照组比较差异有统计学意义,激素干预组(10~(-8)mol/L)与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05),在激素干预组内相对表达量随醋酸泼尼松龙浓度升高而降低。结论:糖皮质激素通过下调AMPK-Sirt1信号通路的表达促进体外培养人破骨细胞凋亡;在幼兔激素性股骨头坏死模型中,AMPK-Sirt1信号通路表达上调,且骨坏死发生时其表达水平进一步升高,可能促使幼兔激素性股骨头坏死加重。