目的:铂耐药是导致卵巢癌患者预后差的主要原因,一直以来缺乏有效的应对策略。针对耐药机制研发新的靶向药物,有望解决这一问题。凋亡躲避是铂耐药的主要机制。本研究以改善卵巢癌铂耐药为研究目标,通过凋亡调控蛋白BCL2家族寻找有效靶点,探究针对该耐药靶点的小分子抑制剂与卡铂(Carboplatin,CBP)联用对于铂敏感性的影响及其作用机理,基于纳米递送系统进一步提高小分子抑制剂的肿瘤靶向性,并对其疗效及安全性进行评价。方法:首先,利用TCGA数据库中卵巢浆液性癌的基因表达数据,分析BCL2家族在卵巢癌中的基因表达水平。结合本院收集的卵巢浆液性癌患者的肿瘤组织芯片及其临床预后信息,通过Kaplan-Miere方法分析蛋白表达水平与预后的关系,进而得到对耐药和预Nanomaterial-Biological interactions后影响最显著的抗凋亡蛋白。将上述抗凋亡蛋白作为改善耐药新靶点。进一步,在卵巢癌细胞系中,通过CCK8、流式细胞术、蛋白免疫印迹等方法筛选出抗卵巢癌作用最显著的小分子抑制剂,并通过体外体内实验明确其对CBP敏感性的作用。最后,基于小分子抑制剂的生物特性,制备多肽修饰的脂质纳米递送系统,实现药物的肿瘤靶向递送,通过体外体内实验评估疗效及安全性。结果:MCL1是BCL2家族中表达量最高同时又与卵巢癌患者铂耐药、预后差显著相关的抗凋亡蛋白。在MCL1表达水平较高的SKOV3卵巢癌细胞系中,通过siRNA瞬时敲降MCL1可增强细胞对CBP的敏感性。利用SKOV3和3AO细胞进行MCL1抑制剂的筛选发现,S63845是抗增殖、促凋亡效果最强的抑制剂。S63845与CBP联用可显著增强CBP的促凋亡作用,显示出理想的CBP增敏效果,且具有剂量依赖效应。基于FSH多肽修饰的脂质体构建的纳米递送S63845@Lipo-FSH可弥补药物水溶性低和稳定性差的缺陷,小鼠体内药物分布结果显示,上述纳米递送系统增强了S63845向肿瘤的靶向输送。体外及体内实验结果表明,相较于游离S63845,S63845@Lipo-FSH对CBP的增敏效果更强,小鼠血清生化检测表明纳米递送系统具有良好的安全性。结论:MCL1是改善卵巢癌铂耐药的有效靶点,其小分子抑制剂S63845经脂质纳米材料载带后可实现肿瘤靶向递送,显著增强CBP敏感性,有望实现临床转化。目的:探讨信号传导及转录激活蛋白https://www.selleck.cn/products/MK-1775.html3(STAT3)与肿瘤相关成纤维细胞(CAF)共同影响卵巢上皮性癌耐药的机制及对患者预后的影响。方法:首先,收集2009年9月至2017年10月在中国医学科学院肿瘤医院接受手术治疗且术中留取肿瘤组织标本的高级别卵巢浆液性癌患者共119例,其临床病理资料及随访资料完整,采用多因素Cox回归模型对预后影响因素进行分析。随后,制备本院患者的卵巢癌组织芯片,免疫组化Envision TM二步法检测组织芯片中STAT3、CAF活化的特异性标志物——成纤维细胞活化蛋白(FAP)、CAF分泌的Ⅰ型胶原蛋白(COL1A1)蛋白的表达水平,分析STAT3、FAP、COL1A1蛋白表达与卵巢癌耐药及患者预后的关系,并分析3种蛋白之间表达的相关性。结合国际公共数据库——高通量基因表达(GEO)数据库的GSE26712数据集收录的人卵巢癌组织的基因表达及预后信息,对本院卵巢癌患者的检测结果进行验证。结果:(1)多因素Cox回归模型分Talazoparib研究购买析显示,化疗耐药是影响卵巢癌患者总生存时间(OS)的独立危险因素(P<0.001)。(2)化疗耐药患者的癌组织中STAT3、FAP、COL1A1蛋白的表达水平均显著高于化疗敏感患者(P均<0.05)。本院的卵巢癌组织芯片中STAT3、FAP、COL1A1蛋白高表达患者的OS均显著短于低表达患者(P均<0.05);对GEO数据库中GSE26712数据集收录的卵巢癌资料的分析表明,高表达STAT3、FAP、COL1A1蛋白的卵巢癌患者OS也显著短于低表达患者(P均<0.05),其验证结果与本院卵巢癌患者的检测结果一致。(3)相关性分析表明,本院的卵巢癌组织芯片中,STAT3蛋白与FAP、COL1A1蛋白的表达均呈显著正相关(R=0.47,P<0.001;R=0.30,P=0.006);对GEO数据库中GSE26712数据集收录的卵巢癌资料的分析显示,STAT3基因与FAP、COL1A1基因的表达显著正相关(R=0.31,P<0.001;R=0.52,P<0.001)。结论:STAT3与CAF共同作用,促进卵巢癌的化疗耐药,进而导致卵巢癌患者的预后较差。