GLS1基因调节胃癌细胞迁移、侵袭和EMT的研究

www.selleck.cn/products/Nolvadex目的 研究谷氨酰胺酶1(glutaminase1,GLS1)对胃癌细胞增殖、凋亡、迁移、侵袭和上皮间充质转化(EMT)的影响。方法 体外培养人胃黏膜上皮细胞GES1和胃癌细胞N87、MKN28、BGC826和BGC803。设计合成靶向GLS1的siRNA片段(si-GLS1-1#和si-GLS1-2#),分别转染N87和BGC823细胞,以无意义siRNAGenetic studies为对照(si-con)。采用qRT-PCR检测细胞中GLS1 mRNA表达,CCK8和克隆形成实验检测细胞增殖能力,流式细胞术检测细胞凋亡情况,Transwell小室实验检测细胞迁移和侵袭能力,Western blot检测细胞中GLS1蛋白LEE011配制和上皮间充质转化(epithelial mesenchymal transition, EMT)相关蛋白表达。异种移植瘤实验评估干扰GLS1对胃癌细胞体内生长的影响。结果 胃癌细胞中GLS1 mRNA和蛋白均呈高表达(P<0.05)。与si-con组比较,si-GLS1-1#和si-GLS1-2#组细胞中GLS1 mRNA和蛋白表达均明显降低(P<0.05)。细胞功能实验结果显示,与si-con组比较,si-GLS1-1#和si-GLS1-2#组细胞的增殖活力、克隆形成能力及迁移、侵袭能力均被抑制(P<0.05),而细胞凋亡率升高(P<0.05),细胞中N-cadherin和Vimentin蛋白表达明显降低(P<0.05),E-cadherin蛋白表达明显升高(P<0.05)。异种移植瘤实验结果显示,与si-con组比较,si-GLS1-1#和si-GLS1-2#组移植瘤体积和重量均明显减小(P<0.05),移植瘤中N-cadherin和Vimentin蛋白表达明显降低(P<0.05),E-cadherin蛋白表达明显升高(P<0.05)。结论 干扰GLS1能够抑制胃癌细胞的增殖、迁移和侵袭能力及EMT,促进细胞凋亡,抑制胃癌细胞的体内生长。