碱基切除修复(base excision repair,BER)是DNA修复途径的一种,可以保护生物体的基因组免受内在因素和环境的损害,在维持基因组完整性中发挥关键作用。DNA糖基化酶可以将N-糖苷键从受损碱基和DNA骨架之间切断,从而激活BER修复途径。当D此网站NA糖基化酶的活性异常时,就可能导致多种人类疾病甚至癌症,因此,对DNA糖基化酶的活性进行检测,有助于深入了解受损DNA的修复过程,进行临床诊断和药物研发。量子点(quantum dots,QDs)的激发光谱较宽、发射光谱较窄、荧光寿命比较长、量子产率高,具有优良的光稳定性和独特的光电性质,经常作为荧光共振能量转移(fluorescence resonance energy transfer,FRET)的供体。因此基于单量子点的FRET纳米传感器具有信噪比高、灵敏度高、样品消耗低、检测时间快的显著优势,广泛应用于生化分析检测领域。本论文中,我们基于以量子点为供体的FRET原理,结合等温核酸扩增技术和单分子检测技术,构建了两种用于检测DNA糖基化酶活性的纳米传感器,逐渐简化了实验流程,大大提高了检测效率。具体内容如下:1、人单链选择性单功能尿嘧啶DNA糖基化酶1(human single-stranded selective monofunctional uracil DNA glycosylase 1,h SMUG1)是尿嘧啶DNA糖基化酶(uracil DNA glycosylase,UDG)超家族中一个重要的亚家族成员,可以切除尿嘧啶和嘧natural biointerface啶的氧化衍生物以维护基因组的完整性和稳定性。我们熟知的多种人类疾病都与h SMUG1活性的异常密切相关,然而,由于对h SMUG1催化机理的认识还不够深入,目前用于h SMUGselleckchem1活性检测的方法比较少。本论文中,我们首次使用5-羟甲基尿嘧啶(5-hydroxymethyluracil,5hm U)作为h SMUG1的新型特异性催化位点,构建了一种可编程链置换驱动组装的单量子点纳米传感器,可以在单细胞水平准确检测h SMUG1活性。当h SMUG1存在时,它能够催化切除5hm U,进而激活后续的指数式链置换级联反应,从而产生大量引物探针;随后,引物探针与生物素标记的捕获探针以及Cy5标记的报告探针结合,形成三明治杂交结构(即引物探针/生物素标记的捕获探针/Cy5标记的报告探针)的双链DNA(double-stranded D…