目的：采用网络药理学的方法，对金丝桃苷抗肝癌的作用机制进行探讨。方法：使用过中药系统药理学数据库与分析平台（TCMSP）、药物基因相互作用数据库（DGIdb）、毒性与基因比较数据库（CTD）及SwissTargetPrediction数据库预测金丝桃苷的作用靶点。利用基因数据库（GeneCards）、在线人类孟德尔遗传病数据库（OMIM）等5个数据库，获得肝癌疾病相关靶点。二者取交集，即金丝桃苷抗肝癌作用靶点。采用在线注释及可视化整合分析工具（DAVID v2021q4）进行基因本体（GO）功能注释和京都基因与基因组百科全书（KEGG）通路富集分析。Cytoscape 3.6.1软件构建作用靶点蛋白质-蛋白质相互作用（PPI）网络，筛选出核心作用靶点，并对金丝桃苷与核心作用靶点亲和力进行分子对接验证。细胞活力实验观察金丝桃苷抗肝癌的作用；划痕实验观察金丝桃苷对肝癌细胞迁移的作用；实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）、蛋白免疫印迹法（Western blot）检测金丝桃苷对关键靶基因胱天蛋白酶-3(Caspase-3)、丝裂原活化蛋白激酶3(MAPK3)mRNA及蛋白表达的影响。结果：共获得金丝桃苷抗肝癌的相关基因45个，并筛选出核心靶基因6个。KEGG途径分析富集的信号通路包括凋亡信号通路、肿瘤坏死因子（TNF）信号通路及癌症信号通路等。分子对接显示核心靶基因CaPLX-4720体内实验剂量spase-3、TNF、雌激素受体1(ESR1)、MAPK3、过氧化氢酶（CAT）及环加氧酶2(PTGS2)与金丝桃苷亲和力较好，尤其与Caspase-3与MAPK3具有强烈的结合活性。另外细胞实验显示，与空白组比较金丝桃苷能减低肝癌细胞活力（P<0.05），抑制肝癌细胞迁移，同时升高Caspase-3mRNA表达（P<0.05），降低MAPK3OXPHOS抑制剂 mRNA表达（P<0.05）。结论：quality control of Chinese medicine金丝桃苷抗肝癌作用通过影响Caspase-3、TNF、ESR1、MAPK3、CAT、PTGS2等核心靶点，共同干预凋亡信号通路、TNF信号通路及癌症信号通路等，以达到抗肝癌的作用。