目的：观察黄蜀葵花总黄酮（total flavone of Abelmoschus manihot,TFA）对肠道成纤维细胞合成Ⅰ型胶原蛋白（Collagen Ⅰ）的影响，探讨TFA治疗克罗恩病肠道纤维化的机制。方法：从SD大鼠中分离原代肠道成纤维细胞（intestinal fibroblasts,IFs），使用免疫荧光法鉴定细胞特征。利用胰岛素样生长因子-1(insulin-like growth factor-1,IGF-1)构建IFs细胞模型，随机分为对照组、模型组和TFA低、中、高剂量（5、10、50μg/mL）组。CCK-8法检测TFA及雷帕霉素（rapamycin,RAPA）对IFs细selleckchem胞最佳干预条件。通过免疫荧光法检测LC3Ⅱ、Beclin-1、ATG16L1及p62等自噬有关蛋白表达，使用mRFP-GFP-LC3实验检测自噬流水平。采用Western blot和qRT-PCR法测定Collagen Ⅰ水平。用AMPK抑制剂化合物C(Compound C,CC)、mTOR抑制剂RAPA联合TFA处理IGF-1刺激的IFs细胞，将细胞随机分为对照组、模型组、TFA(10μg/mL)组、TFA+CC组、TFA+RAPA组。采用免疫荧光及mRFP-GFP-LC3实验检测自噬水平。运用Western blot和qRT-PCR法评估Collagen Ⅰ水平。采用Western blot法检测p-AMPK、p-MTOR、p-p70S6K和p-4EBP1蛋白表达。结果：免疫荧光结果显示，原代细胞具有Vimentin(+),α-SMA（-）的特征，证明其为肠道成纤维细胞。CCK-8结果提示，TFA最佳干预浓度为5、10、50μg/mL，时间为48 h;RAPA最佳干预浓度为5 nmol/mL，时间为48 h。与对照组相比，模型组的Collagen Ⅰ蛋白及mRNA水平上升（P <0.01），自噬有关蛋白LC3Ⅱ、Beclin-1、ATG16L1等表达减弱，p62表达上升，自噬流减少，p-AMPK/AMPK比值降低，p-mTOR/mTOR、p-p70S6K/p70S6K和p-4EBP1/4EBP1比值升高（P <0.01）。与模型组相比，TFA各剂量组Collagen Ⅰ水平降低（selleckchem VP-16P <0.01），自噬水平上升，其中高剂量组最明显；TFA(10μg/mL)组p-AMPK/AMPK比值上调，p-mTOR/mTOR、p-p70S6K/p70S6K和p-4EBP1/4EBP1比值下调（P <0.01）。与TFA组相比，TFA+CC组中CollagenⅠ水平升高（P <0.01），自噬水平下降，p-AMPK/AMPK比值下降，p-mTOR/mTOR、p-p70S6K/p70S6K和p-4EBP1/4EBMedical billingP1比值上升（P <0.01）;TFA+RAPA组中CollagenⅠ水平降低（P <0.01），自噬水平上升，p-AMPK/AMPK比值增加，p-mTOR/mTOR、p-p70S6K/p70S6K和p-4EBP1/4EBP1比值降低（P <0.01）。结论：TFA可以通过激活AMPK/mTOR通路调节细胞自噬以抑制Ⅰ型胶原蛋白生成，改善肠道纤维化。