GNG4对卵巢癌顺铂耐药A2780/DDP细胞DNA损伤修复及化疗敏感性的影响

目的探讨GNG4与卵巢癌顺铂耐药A2780/DDP细胞DNA损伤修复及化疗敏感性的关系Chinese steamed bread。方法将A2780/DDP细胞分为500 ng/ml顺铂作用组(cDDP组)、短发夹RNA(shRNA)-GNG4沉默GNG4表达组(shRNA组)、500 ng/ml顺铂和shRNA-GNG4干预组(shRNA+cDDP组)、未经顺铂和shRNA-GNG4干预组(空白对照组)。采用蛋白质印迹法检测各组细胞GNG4和γH2AX蛋白的表达, 单细胞凝胶电泳法检测各组细胞DNA损伤情况, 免疫荧光法检测γH2AX基因在损伤位点的焦点形成情况, 平板克隆形成实验检测细胞克隆形成能力。结果与其他3组相比, shRNA+cDDP组GNG4蛋白表达水平最低, γH2AX蛋白表达水平最高, 差异均有统计学意义(均P0.01)。单细胞凝胶电泳法检测显示, 空白对照组、cDDP组、shRNA组、shRNA+cDDP组细胞彗星尾DNA百分含量分别为(7.7±2.5)%、(12.3±3.6)%、(20.1±2.1)%、(38.6±2.8)%, Olive尾距分别为5.12±1.89、8.23±2.97、14.99±3.65、22.43±3.17, shRNA+cDDP组细胞彗星尾DNA含量和Olive尾距均高于其他3组, 差异均有统计学意义(均P0.05)。免疫荧光法检测显示, 空白对照组、cDDP组、shRNA组、shRNA+cDDP组每个细胞中γH2AX的焦点数分别为(4.2±0.7)个、(5更多.1±0.5)个、(26.8±3.3)个、(71.3±6.2)个, shRNA+cDDP组均高于其他3组, 差异均有统计学意义(均P0点击此处.05)。空白对照组、cDDP组、shRNA组、shRNA+cDDP组克隆形成率分别为(78.27±5.01)%、(45.67±3.29)%、(26.20±5.76)%、(1.56±0.21)%, shRNA+cDDP组均低于其他3组, 差异均有统计学意义(均P0.001)。结论下调GNG4的表达可增加卵巢癌A2780/DDP细胞对顺铂的敏感性, 其可能是通过抑制顺铂诱导的DNA损伤修复功能实现的。