目的:在4-硝基喹啉-1-氧化物(4-nitroquinolin-1-oxide,4NQO)水喂养的小鼠舌黏膜上模拟人咀嚼槟榔的行为,以此改良方法建立小鼠舌鳞状细胞癌(oral tongue squamous cell carcinoma,OTSCC)动物模型,观察是否得到一个诱癌率高且能模拟人类疾病发展过程的舌癌动物模型。通过转录组测序技术对其差异表达基因进行注释和分析,探寻舌癌的潜在治疗靶点。方法:(1)选取60只雌性C57BL/6J小鼠建立舌癌动物模型,小鼠随机分为一组纯水喂养组(编号为N)6只;四组单纯4NQO水喂养对照组(编号为C)每组6只;四组实验组G1(4NQO水喂养联合槟榔碱机械涂擦)每组6只;一组实验组G2(单纯槟榔碱机械涂擦)6只。其中为观察小鼠舌癌变过程中各个时期的病理变化将C、G1组分别于12、16、20、24周末随机处死各一组,肉眼及组织病理学观察病变情况,并进行统计学分析。期间观察正常组N组及单纯槟榔碱机械FG-4592小鼠涂擦组G2组舌黏膜的变化情况,发现异常增生物时立即处死,无异常增生时最终处死时间为24周末。(2)20周末时,4NQO水喂养联合槟榔碱机械涂擦组G1组成功建立舌癌动物模型,与对照组C组对比发生了显著差异,使用RNA-seq技术测序20周末时C与正常组N、G1组与正常组N组的基因表达情况,取两组间共同的差异基因作为目标差异基因集,并应用生物信息学方法分析了这些差异基因和通路在舌癌发生过程中的关联性。因C、G1两组为不同的诱癌途径,对这两组进行RNA-seq技术,分析槟榔碱促癌途径及关键基因的表达。结果:(1)在20周时,C组6只小鼠仅出现1只癌变,诱癌率为17%;G1组6只小鼠全部癌变,致癌率100%。G2组为单纯槟榔碱机械涂擦组,在整个实验过程中舌黏膜未观察到出现异常增生现象,直至24周末实验结束时处死,病理学检查仅出现1例轻度异常增生。(2)选取20周末的C、G1组分别与N组进行测序,两组共存在310个差异表达基因,为目标基因集,目标基因集富集到舌癌进展相关代谢通路与IL-17信号传导通路及C型凝集素受体信号通路密切相关。G1组与C组两组间测序,GFPT1基因呈下调趋势,通过GO、KEGside effects of medical treatmentG富集分析槟榔碱促进癌症发生过程与UDP-N-乙酰葡糖胺代谢过程和黏蛋白型O-聚糖途径有关。结论:(1)4NQO联合槟榔碱机械涂擦组在20周末时成功建立舌癌动物模型,较常规4NQO水喂养建立舌癌模型时间提前了4周,且肿瘤发生率达到了100%,通过此改良方法成功建立了一个高效的舌癌动物模型。(2)在舌癌的进展过程中,与IL-17信号通路中IL17F、IL17A免疫基因相关,同时发现C型凝集素受体信号通路在舌癌进展过程中高富集,表明舌癌进展可能与肿瘤免疫反应密切相关,为下一步舌癌机理研究提供研究基础。(3)本研究发现在槟榔碱促进癌症发生的过程中,与糖基化相关代谢通路有关,通过下调GFPT1基因控制UDP-N-乙酰葡糖代谢过程,从JNJ-42756493分子量而抑制癌细胞的凋亡,它们在肿瘤的增殖、凋亡、侵袭与转移中都具有重要影响,可能是槟榔碱促进癌症发生的原因。