近年来,由豚鼠气单胞菌侵染水生动物的报道逐渐增多,给水产养殖带来了严重威胁。由于当今对该细菌引发疾病的治疗仍处于使用化学药物的阶段,而大量使用不同抗生素则导致病原菌严重耐药,进而造成食品安全问题。疫苗的使用则不仅能有效预防疾病,且可以缓解上述问题。如果佐剂与灭活疫苗联用,则能够事半功倍的发挥疫苗效力,更好的抵御病原菌的侵袭。鉴于尚未出现豚鼠气单胞菌佐剂灭活苗的报道,本研究将已鉴定的豚鼠气单胞菌AC-CY株制备成灭活疫苗,并选用氢氧化铝凝胶、葡聚糖、黄芪和蜂胶作为疫苗佐剂,分别与灭活疫苗配伍免疫鲫鱼,在根据全面考虑佐剂来源、使用成本、运用方式和途径、安全性等诸多情况下,筛选出更适宜于大量生产的豚鼠气单胞菌灭活疫苗佐剂。本研究探讨将四种不同免疫佐剂与灭活疫苗配伍,对鲫鱼血清生化指标、血清抗体效价、白细胞吞噬活性、组织免疫相关细胞因子表达量等免疫指标的影响。将各佐剂与灭活疫苗按照1:1的比例配伍制成佐剂灭活苗,同时设立一个空白对照组和一个无佐剂灭活苗实验组。在饲喂的第medication-related hospitalisation1d和第14d进行腹腔免疫注射,于首次免疫前0d,免疫后第7d、14d、21d、28d和35d随机挑选不同鲫鱼进行血液和组织器官的采集用于免疫相关指标检测。研究结果表明,各免疫组鲫鱼血清中ACP、AKP、C3、C4、CAT、Ig M、LZM、SOD表达量相较对照组均有显著(p<0.01)提升,黄芪多糖组、铝胶组、葡聚糖组和蜂胶组鲫鱼血清中各生化指标表达量显著(p<0.05)高于疫苗组;经白细胞吞噬实验进一步证实各免疫组均可增强白细胞吞噬活性;血清抗体效价AMG510配制中,各免疫组的血清抗体效价结果均高于对照组,佐剂组结果高于疫苗组;检测肝脏、脾脏、肾脏和肠道组织中的IL-10、IL-1β、IFN-γ及TNF-α基因的相对表达量,证实加入佐剂能促进体内炎症反应。免疫保护实验中,攻毒后7d对照组鲫鱼全部死亡,黄芪多糖组鲫鱼的存活率最高为84%,葡聚糖组、蜂胶组、铝胶组鲫鱼存活率分别为72%、80%、68%,疫苗组鲫鱼存活率最低为60%,各免疫组均能在一定程度上抵御豚鼠气单胞菌的感染,且佐剂组要更优于疫苗组;细菌载量检测中各免疫组均能有效抑制豚鼠气单胞菌在鲫鱼体内增值并可以降低系统性器官中的细菌载量。最终结果表明鲫鱼接种灭活疫苗能使鱼体产生免疫保护力,铝胶、葡聚糖、黄芪多糖、蜂胶作为佐剂均能提高鲫鱼的免疫能力和对豚鼠气单胞菌AC-CY株的抗感染能力,黄芪多糖Roxadustat抑制剂组与蜂胶组鲫鱼的整体免疫能力最强,其次为葡聚糖组,铝胶组在各项结果中略低于前者。综上,筛选出更适宜于大量生产的豚鼠气单胞菌灭活疫苗佐剂,可更有效的预防豚鼠气单胞菌感染,为豚鼠气单胞菌灭活疫苗佐剂的应用方面提供更加有力的数据支持及参考。