镉诱导大鼠肝细胞BRL-3A铁死亡及其作用机制

用4μmol/L氯化镉处理大鼠肝脏细胞BRL-3A 12,24,36 h后,通过CCK-8法测定细胞活力,比色法检测细胞上清中乳酸脱氢酶(LDH)的含量,流式细胞术检测细胞中活性氧(ROS)的含量及线粒体膜电位水平,比色法检测细胞中氧化还原相关指标丙二醛(MDAM-2282A)、还原型谷胱甘肽(GSH)和氧化型谷胱甘肽selleck激酶抑制剂(GSSG)含量的变化,Western blot检测铁死亡相关蛋白的表达,荧光探针法检测细胞中porous media亚铁离子(Fe~(2+))的含量,电子显微镜观察细胞的超微结构。结果显示,镉(Cd)处理后,BRL-3A细胞活力下降,LDH水平显著升高;ROS、MDA、GSH、GSSG和Fe~(2+)含量极显著增加(P<0.01),FTH1、TfR1、HO-1蛋白表达水平极显著升高(P<0.01),GPX4蛋白表达水平极显著下降(P<0.01),SLC7A11蛋白水平变化不显著,细胞线粒体萎缩变小、嵴减少或消失。结果表明,Cd处理可致BRL-3A细胞发生脂质过氧化物和Fe~(2+)的蓄积,GPX4水平下降,从而介导细胞发生铁死亡。