目的:研究各浓度亚砷酸钠(Na As O_2)对人肝星状细胞(LX-2)活化、铁死亡相关蛋白表达的影响,以及探索SLC7A11、CDKN1A甲基化在Na As O_2诱导LX-2细胞活化中作用机制。方法:1)采用MTT比色法检测细胞相对存活率,确定Na As O_2染毒LX-2细胞的IC_(50),并根据具体情况确定Na As O_2染毒浓度,将其分为低、中、高剂量组;2)通过划痕观察细胞迁移和愈合情况;3)通过Illumina Infinium Methylation EPIC Bead Chips(850K甲基化芯片)对差异DNA甲基化位点进行筛查;4)实时荧光定量(q RT-PCR)检测溶质载体家族7成员11基因(solute carrier family 7,(cationic amino acid transporter,y+system)member 11,slc7a11)、细胞周期素依赖性激酶抑制因子1A(Cyclin-Dependent Kinase Inhibitor 1A,cdkn1a)、转化生长因子-β1(Transforming growth factor-β1,tgf-β1)Ⅲ型胶原蛋白(Anti-Collagen TypeⅢ,collagenⅢ)m RNA的转录水平;免疫印迹法(Western blot)检测SLC7A11、CDKN1A、SLC7A4、TGF-β1、collagenⅢ的蛋白表达水平;5)经甲基化抑制剂(5-Aza-cd R)干预细胞,并测定其半数致死剂量;6)通过质谱技术探讨SLC7A11、CDKN1A、SLC7A4基因启动子区甲基化水平在Na As O_2致肝星状细胞活化中的作用机制;7)免疫印迹法(Western blot)检测甲基化抑制剂(5-Aza-Cd R)+Na As O_2干预后SLC7A11、CDKN1A、SLC7A4、TGF-β1、collagenⅢ的蛋白表达水平。结果:1)Na As O_2染毒LX-2细胞,测得IC_(50)为27.24umol/L,确定浓度:对照组(0.00μmol/L)、低剂量组(5.00μmol/L)、中剂量组(10.00μmol/L)、高剂量组(15.00μmol/L);2)Na As O_2干预组细胞划痕愈合率明显低于对照组,且随着Na As O_2浓度的增高,划痕愈合率逐渐降低;3)利用基因芯片技术,筛查后存在差异甲基化位点共74267个。筛选出SLC7A11在启动子区cg22659014位点高甲基化;CDKN1A在启动子区cg17964532位点高甲基化,SLC7A4在启动子区cg24333469位点高甲基化;4)Na As O_2溶液染毒结束后,与对照组比较,Na As O_2低、中、高剂量组的SLC7A11 m RNA表达降低,Na As O_2低、高剂量组SLC7A4 m RNA表达升高(P<0.05),TGF-β1、collagenⅢm RNA表达均升高(P<0.05);与对照组比较,Na As O_2低、中、高剂量组细胞中SLC7A11蛋白表达水平降低,CDKN1A蛋白表达水平升高,Na As O_2中、高剂量组细胞中SLC7A4蛋白表达水平升高(P<0.05);与对照组比较,Na As O_2低、中、高剂量组细胞中TGF-β1蛋白表达水平升高,Na As O_2高剂量组细胞中collagenⅢ蛋白表达水平升高(P<0.05);5)各干预剂量组的5-Aza-Cd R对LX-2细胞的细胞生长具有一定抑制作用,且随着5-Aza-Cd R浓度的升高,细胞活性逐渐降低,OD值呈下降趋势,抑制Sexually explicit media变得明显;6)与对照组比较,Na As O_2组中SLC7A11 m RNA表达水平降低,SLC7A4 m RNA表达水平升高,TGF-β1、CollagenⅢm RNA表达水平均升高(P<0.05),Na As O_2+5-Aza-Cd R组中SLC7A4 m RNA表达水平升高(P<0.05);与Na As O_2组比较,Na As O_2+5-Aza-Cd R组中SLC7A11 m RNA表达水平升高(P<0.05),SLC7A4 m RNA表达水平降低,CDKN1A m RNA表达水平升高(P>0.05),TGF-β1、CollagenⅢm RNA表达水平降低(P<0.05);与低剂量组比较,低剂量+5-Aza-Cd R组中SLC7A11CB-839研究购买蛋白表达水平升高,CDKN1A、TGF-β1蛋Entinostat采购白表达水平降低(P<0.05);与中剂量组比较,中剂量+5-Aza-Cd R组中SLC7A11蛋白表达水平升高,CDKN1A、SLC7A4、TGF-β1蛋白表达水平降低(P<0.05);与高剂量组比较,高剂量+5-Aza-Cd R组中SLC7A11蛋白表达水平升高,CDKN1A、SLC7A4、TGF-β1、CollagenⅢ蛋白表达水平降低(P<0.05);7)质谱技术验证发现SLC7A4甲基化水平差异分析SLC7A4＿FA40＿Cp G＿2、SLC7A4＿FA28＿Cp G＿4、SLC7A4＿FA40＿Cp G＿3、SLC7A4＿FA40＿Cp G＿11、SLC7A4＿FA40＿Cp G＿12、SLC7A4＿FA43＿Cp G＿2、SLC7A4＿FA43＿Cp G＿3.4各片段Cp G位点平均甲基化程度有统计学意义(P<0.05)。结论:甲基化参与Na As O_2诱导LX-2细胞活化过程。5-Aza-Cd R可能降低Na As O_2诱导的LX-2细胞活化程度,由此推测甲基化水平降低可能会减缓由Na As O_2所诱导的肝纤维化过程,对肝脏产生一定的保护作用。