目的:基于特应性皮炎为炎症性瘙痒性疾病且肥大细胞参与瘙痒的发生,采用多种动物、细胞模型评价当归苦参丸的抗炎止痒、改善湿热型特应性皮炎慢性瘙痒的药效作用及调控肥大细胞脱颗粒的作用机制,为临床用药提供科学依据,指导临床用药。方法:1.采用二甲苯致昆明种小鼠急性炎症模型,计算耳肿胀度及耳肿胀抑制率,初步评价当归苦参丸的抗炎作用;分别采用右旋糖酐-40、4-AP致小鼠急性瘙痒模型,观察小鼠搔抓次数并检测4-AP小鼠血清中LTB4、组胺(HistaminDecitabine抑制剂e)水平,初步评价当归苦参丸的止痒作用;采用C48/80致小鼠皮肤瘙痒模型,观察小鼠搔抓情况,分别采用TB染色和IHC染色观察肥大细胞形态变Histology Equipment化和TPS表达情况,ELISA检测皮肤匀浆中Histamine表达水平,评价当归苦参丸对肥大细胞脱颗粒诱发的小鼠瘙痒的干预作用。2.采用湿热证叠加MC903建立湿热证特应性皮炎慢性瘙痒模型,观察小鼠搔抓情况,测量耳片重量并计算耳肿胀度,计算脏器指数,HE染色、TB染色法分别观察耳部病理变化及肥大细胞浸润情况,IHC染色检测耳部皮损中TSLP、IL-4、IL-13、IL-31、IL-25、IL-33 表达情况,ELISA法检测小鼠血清 IgE、TSLP、IL-4、IL-13 和耳部皮损处 TSLP、IL-4、IL-13、IL-31、IL-25、IL-33、Histamine、LTB4、PGD2、IFN-γ表达水平,评价当归苦参丸的抗慢性瘙痒的作用。3.采用C48/80刺激RBL-2H3细胞建立肥大细胞脱颗粒模型,比色法检测上清液中β-Hex、ELISA法测定其Histamine和 TPS含量,评价当归苦参丸含药血清对RBL-2H3脱颗粒的干预作用。4.采用IgE诱导RBL-2H3细胞建立脱颗粒模型,比色法检测上清中β-HZ-VAD-FMK研究购买ex的释放情况,ELISA 试剂盒检测上清中 IL-4、IL-13、Histamine、TPS、MIP-1α、TNF-α、TSLP、IL-31 的表达情况,qPCR法检测各组细胞中 IL-4、IL-13、Histamine、TPS、MIP-1α、TNF-α、TSLP、IL-31 mRNA 表达情况,Western blotting 法检测各组细胞中JAK-STAT 通路相关蛋白(p-JAK1/JAK1、p-JAK2/JAK2、p-STAT3/STAT3、p-STAT5/STAT5、p-STAT6/STAT6)表达的情况。结果:1.当归苦参丸对急性炎症、瘙痒模型小鼠的影响(1)抑制急性炎症模型小鼠耳肿胀度;(2)降低Dextran-40致急性瘙痒小鼠搔抓次数;(3)改善4-AP致急性瘙痒小鼠搔抓次数和降低血清中Histamine、LTB4表达;(4)降低C48/80致皮肤瘙痒模型小鼠搔抓次数,减少皮损处肥大细胞数目,抑制 Histamine、TPS 表达;2.当归苦参丸对湿热型AD瘙痒小鼠的影响(1)改善小鼠毛发发黄和便溏情况;(2)抑制小鼠体重和体温下降;(3)抑制小鼠耳肿胀度和右耳质量增加;(4)降低小鼠搔抓次数,改善瘙痒情况;(5)改善耳片AD样皮损病理和抑制肥大细胞浸润;(6)抑制血清中 IgE、TSLP、IL-4、IL-13 和耳片中 TSLP、IL-4、IL-13、IL-31、IL-25、IL-33、Histamine、LTB4、PGD2、IFN-γ 表达水平。3.当归苦参丸含药血清对C48/80刺激RBL-2H3脱颗粒的影响(1)对RBL-2H3细胞活力无显著影响的药物浓度为Keto-10%、DGKSW-20%、DGKSW-15%、DGKSW-10%;(2)抑制 C48/80 刺激 RBL-2H3 脱颗粒 β-Hex、Histamine、TPS、LTB4 的释放。4.当归苦参丸含药血清对IgE诱导RBL-2H3细胞活化的影响(1)抑制RBL-2H3细胞脱颗粒释放β-Hex;(2)降低上清中 IL-4、IL-13、Histamine、TPS、MIP-1α、TNF-α、TSLP、IL-31;(3)抑制活化细胞中 IL-4、IL-13、Histamine、TPS、MIP-1α、TNF-α、TSLP、IL-31 mRNA 表达(4)抑制 JAK-STAT通路中 p-JAK1/JAK1、p-JAK2/JAK2、p-STAT5/STAT5、p-STAT6/STAT6蛋白表达。结论:当归苦参丸抑制具有促炎和致痒的2型细胞因子的释放,抑制肥大细胞浸润、脱颗粒释放瘙痒介质,改善AD小鼠瘙痒。初步认为当归苦参丸可能通过JAK-STAT调控IgE介导的RBL-2H3脱颗粒改善AD瘙痒。