黏附性G蛋白偶联受体F1在胰腺导管腺癌中的表达及其促进癌症进展的机制研究

目的·分析黏附性G蛋白偶联受体F1 (adhesion G protein-coupled receptor F1, ADGRF1)在胰腺导管腺癌（pancreatic ductal adenocarcinoma,PDAC）发生及发展过程中的表达变化，探究ADGRF1对PDAC细胞增殖的影响以及促进PDAC进展的潜在分子机制。方法·基于癌症基因组图谱（The Cancer Genome Atlas,TCGA）数据库和基因表达综合（Gene Expression Omnibus,GJQ1化学结构EO）数据库分析ADGRF1在正常胰腺组织及PDAC组织中的mRNA水平表达。利用实时荧光定量PCR (quantitative real-time PCR,qPCR)和蛋白质印迹法（Western blotting）检测ADGRF1在正常胰腺导管上皮细胞hTERT-HPNE及多种PDAC细胞中的表达情况。利用免疫组织化学染色（immunohistochemistry staining,IHC）检测PDAC患者的癌组织及癌旁组织中ADGRF1的表达差异。转染小干扰RNA (small interfering RNA,siRNA)敲低ADGRF1后，通过CCK8和平板克隆形成实验检测PDAC细胞AsPC-1、SW1990增殖能力的变化。构建稳定过表达ADGRF1的Patu8988细胞，通过CCK8实验检测过表达ADGRF1引起的PDAC细胞增殖变化。利用RNA测序（RNA-sequence,RNA-seq）、基因集富集分析（gene set enrichment analysis,GSEA）和免疫浸润分析预测与ADGRF1促进PDAC癌症进展相关的信号通路。结果·TCGA数据库和GEO数据库的分析结果LY294002体内实验剂量显示ADGRF1 mRNA在biodiversity changePDAC组织中的表达高于正常胰腺组织（均P=0.000）。qPCR和Western blotting结果显示，与hTERT-HPNE细胞相比，多种PDAC细胞中ADGRF1的mRNA和蛋白水平均有所上调（均P<0.05）。IHC结果显示ADGRF1在PDAC患者癌组织中的表达也高于癌旁组织。此外，下调ADGRF1能够抑制PDAC细胞AsPC-1、SW1990的增殖能力；而过表达ADGRF1则促进Patu8988细胞的增殖能力（均P<0.05）。RNAseq、GSEA富集分析和免疫浸润的结果显示，ADGRF1的表达与干扰素α (interferon-α,IFN-α)、肿瘤坏死因子α (tumor necrosis factor-α,TNF-α)和核因子κB (nuclear factorκB,NF-κB)等信号通路有关。结论·ADGRF1在PDAC细胞和组织中高表达，促进PDAC细胞的增殖，其机制可能与多个免疫相关信号通路有关。