研究目的:糖尿病肾病(diabetic nephropathy, DN)是糖尿病最重要的并发症之一,其生理病理机制十分复杂,早期病变体现为肾小球肥大,细胞渗出增多,细胞外的基质累积,进而引发肾脏炎症和间质纤维化反应,产生大量的炎症因子,促进细胞凋亡,进而加重肾组织损伤。中草药和运动疗法配合传统方法治疗糖尿病肾病是目前学者们探讨研究的方向之一。研究发现具有抗毒素功能的多酚类植物白藜芦醇,具有抗脂质过氧化损伤、调节血脂代谢、抗炎症反应和抑制细胞凋亡等多种作用。此外,研究证实运动在辅助治疗2型糖尿病方面有良好的作用,具有抗氧化应激、脂代谢调控和炎症控制,促进糖尿病肾功能的恢复。但白藜芦醇和有氧运动对肾脏损伤产生的保护作用是否与减少炎症损伤和抑制细胞凋亡有联系,目前immunoturbidimetry assay尚未有深入研究。本研究旨在通过对糖尿病大鼠实施8周的白藜芦醇和有氧运动干预,探讨白藜芦醇和有氧运动对糖尿病大鼠肾脏炎症反应和细胞凋亡的影响,为糖尿病肾病的综合疗法提供更多依据。研究方法:选取SD大鼠,进行高糖高脂饲料喂养5周,并结合腹腔注射链脲佐菌素(STZ),成功建立糖尿病大鼠模型。将大鼠随机分为模型组、运动组、药物组和运动药物组,设立正常组,每组各12只。运动组大鼠完成连续8周跑台运动,跑速为20 m/min,每天的运动时间60 min,每周共计跑台运动6天;药物组和运动药物组大鼠采用白藜芦醇药液(45 mg/kg)灌胃,其它组同时注射等容的双蒸水,每天给药1次,连续8周。8周结束,测血糖、血尿素氮(BUN)、24 h尿白蛋白定量、血肌酐(Scr)等指标;HE染色显示肾组织的形态结构改变;TUNEL染色观察肾脏的细胞凋亡数量;ELISA检测与炎症反应有关因子白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)的表达水平;免疫组织化学法检测与肾组织凋亡相关的Bcl-2、Bax、Caspase-3的表达水平;Western blot法检测肾脏信号通路蛋白NF-κBP65蛋白的表达水平。研究结果:1.Scr、BUN、血糖及24 h尿蛋白:与正常组比较,模型组的Scr、BUN、血糖和24 h尿蛋白水平均明显升高(P<0.05);分别施与有氧运动与白藜芦醇干预后,运动组、药物组和运动药物组的Scr、BUN、血糖和24 h尿蛋白水平均较模型组显著下降(P<0.05),且运动药物组的下降更显著,与运动组、药物组相比差异有显著性(P<0.05)。2.HE染色:与正常组比较,模型组的肾脏病理损伤加重(P<0.05);与模型组比较,运动组、药物组和运动药物组的肾脏病理损伤减轻(P<0.05),且运动药物组的变化明显优于运动组、药物组(P<0.05)。3. TUNEL染色:染色显示肾脏凋亡细胞核呈棕褐GW4869色,肾脏凋亡指数分析显示,与正常组比较,模型组肾脏凋亡细胞数量明显增多(P<0.05);与模型组比较,运动组、药物组和运动药物组的凋亡细胞数量明显减少(P<0.05),且运动药物组的减少更明显,与运动组和药物组比较,差异有显著性(P<0.05)。4.炎症相关因子:ELISA检测结果显示,模型组炎症相关因子TNF-α、IL-6及IL-1β水平均较正常组明显上调(P<0.05);分别施与有氧运动与白藜芦醇干预,运动组、药物组和运动药物组TNF-α、IL-6及IL-1β水平均显著下调(P<0.05)且运动药物组的变化明显优于运动组、药物组(P<0.05)。5.凋亡相关因子:免疫组织化学法检测结果显示,5组大鼠肾组织中Bax、Bcl-2、Caspase-3的阳性表达颜色呈现为棕黄色,分布在肾细胞的细胞浆。比较5组累积光密度,与正常组比较,模型组肾组织Bax、Caspase-3明显上调,Bcl-2明显下调(P<0.05)。有氧运动与白藜芦醇干预后,与模型组比较,运动组、药物组和运动药物组肾组织Bax、Caspase-3明显下调,Bcl-2明显上调(P<0.05),且运动药物组的变化更显著,与运动组和药物组比较,差异有显著性(P<0.05)。6.信号通路蛋白:Western blot法检测结果表明,模型组肾组织NF-κBP65蛋白相对表达量较正常组明显增加(P<0.05),说明NF-κB通路被激活,引发炎症反应和凋亡损伤。分别施与有氧运动与白藜芦醇干预,运动组、药物组和运动药物组的NF-κBP65蛋白相对表达量明显降低(P<0.05),且运动药物组的降低更明显,与运动组和药物组比较,差异有显著性(P<0.05)。研究结论:1.白藜芦醇与有氧运动干预均可以减轻糖尿病大鼠肾脏的病理损伤,促进肾功能恢复,减少细胞凋亡,对肾脏发挥保护作用,且运动与白藜芦醇共同干预的治疗方式,效果明显好于单纯给药和单纯运动。2.白藜芦醇、有氧运动单独或联合治疗可通过下调凋亡相关因子Bax、Caspase-3的表达,上调Bcl-2的表达,减轻细胞凋亡,从而减轻肾脏损伤,更好对肾脏起到保护作用。3.白藜芦醇、有氧运动单独或联合治疗对肾脏的保护作用机制可能与其抑制NF-κB信号通路的活化,一方面降低炎症因子TNF-α、IL-6及IL-1β的表达,下调炎症反应水平,另一方面,抑制肾组织细胞GSK1120212的凋亡,减轻肾组织的损伤,从而对糖尿病肾损伤发挥强大的保护作用。