黑水虻作为一种全球广泛分布的昆虫，因生长环境决定了其丰富的抗菌肽来源，目前针对黑水虻抗菌肽的研究已逐渐从抗菌转向了抗癌。本文研究黑水虻抗菌肽HI-3对HCT-8细胞凋亡影响，探索其可能的抑癌机制，旨在为后续黑水虻抗菌肽抗肿瘤应用的研究提供作用靶点。采用流式细胞仪检测抗菌肽HI-3对HCT-8细胞凋亡率、线粒体膜电位、钙离子及活性氧(Reactive oxygen species, ROS)水PHHs primary human hepatocytes平变化的影响；酶标仪检测抗菌肽HI-3对半胱天冬酶(CaspaAG-221se)-3和Caspase-9活力的影响；并通过荧光定量PCR技术和蛋白芯片技术检测细胞凋亡相关基因和蛋白表达情况。结果表明，抗菌肽HI-3可以诱导HCT-8细胞凋亡，且随处理浓度增加，凋亡率亦增加，当浓度达到400μg/mL时，HCT-8细胞凋亡率与阴性对照组及其他处理组相比均有显著性差异(P<0.05);HI-3处理后HCT-8细胞内线粒体膜电位、钙离子浓度及ROS水平均随处理浓度增加而升高，当浓度达到400μg/mL时达到最高，各处理浓度下3组数值与阴NSC 127716 IC50性对照组相比均存在显著差异(P<0.05);随着HI-3处理浓度增加HCT-8细胞内Caspase-3、Caspase-9活力均呈现先增强后减弱的变化趋势，200μg/mL抗菌肽HI-3对HCT-8细胞内Caspase-3、Caspase-9的活力影响均较强，与其他处理组和对照组相比差异显著(P<0.01)。200μg/mL抗菌肽HI-3可以上调凋亡因子Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9和Fas的基因表达；下调凋亡因子P53、P21、XIAP、Bcl-2、Bax和FasL的基因表达。而蛋白芯片结果显示：Caspase-3、P21的蛋白表达上调，P53、XIAP、Bcl-2、Bax、Fas、FasL的蛋白表达下调。因此，黑水虻抗菌肽HI-3可以诱导HCT-8细胞发生凋亡，其凋亡可能通过线粒体途径和钙离子信号途径进行，与线粒体膜电位降低、钙离子内流、ROS产生和Caspase-3、Caspase-9活力的增强及凋亡相关因子XIAP、Caspase-3、Caspase-9的表达相关。