基于试纸条核酸提取和重组聚合酶扩增技术的 HPV 16型DNA纸基电化学发光快速检测方法

目的 建立一种人乳头瘤病毒(HPV)高危16亚型快速、灵敏、特异的检测方法。方法 采用前期构建的试纸条法提取样本HCB-839 IC50PV DNA,并以其为模板，使用电化学发光试剂(酯化钌)标记上游引物，生物素标记下游引物，进行重组聚合酶恒温扩增，通过亲和素化的磁微球将生物素标记的扩增产物，在磁场的作用下富集，通过纸基电极-电化学发光检测技术，获Pullulan biosynthesis得有酯化钌标记的待测物的浓度信息。结果 酯化钌与上游引物以20∶1的摩尔比可以获得更高的标记效率和发光强度，该法最低检出限为50 copies/mL,比实时荧光PCR的灵敏度高16倍；批内检测相对标准偏差低于53-Methyladenine使用方法%,单个样本从核酸提取到获得扩增结果所需时间小于1 h,具有较好的特异性、灵敏度和重复性。结论 该法检测快速、灵敏、特异、操作简单，具有一定的临床应用价值。