本研究旨在表达非洲猪瘟病毒(ASFV)衣壳蛋白pE120R,并Shell biochemistry制备单克隆抗体，为其功能研究提供材料。以pCAGGS-FMS-275lag-pE120R为模板扩增pE120R基因片段，构建原核表达质粒pGEX-6p1-pE1ABT-199 NMR20R。将其转化BL21(DE3)感受态细胞后经IPTG诱导表达为可溶性pE120R蛋白，采用GST Beads纯化pE120R蛋白，免疫BALB/c小鼠，然后取其脾细胞与SP2/0细胞进行细胞融合，采用间接ELISA方法筛选获得了1株能够稳定分泌pE120R单克隆抗体的杂交瘤细胞株。结果表明，成功构建了原核表达质粒pGEX-6p1-pE120R,并获得较高纯度的pE120R蛋白。Western blot和间接免疫荧光(IFA)试验结果显示，pE120R单抗能特异性识别HEK293T细胞转染质粒表达的Flag-pE120R蛋白和肺泡巨噬细胞(PAMs)感染ASFV后表达的pE120R蛋白。该单抗的结合位点在30～60aa区域，并且该单抗亚类鉴定重链为IgG2a。本研究成功表达并纯化了可溶性的pE120R蛋白；制备了抗pE120R的单抗隆抗体，该抗体具有良好的特异性，为深入探讨ASFV pE120R蛋白的生物学功能奠定了基础。