长链非编码RNA MALAT1对滑膜肉瘤细胞增殖及侵袭的影响及其机制

目的探讨长链非编码RNA MALAT1对滑膜肉瘤细胞增殖及侵袭的影响并探讨其机制CCRG 81045作用。方法体外培养人滑膜肉瘤细胞系SW982, 对其处理并分为对照组、MALAT1敲低组及MALAT1和微小RNA(miR)-22双敲低组。使用Lipofectamine 2000试剂盒将短发卡RNA(shRNA)转染进SW982进行相应分子的敲低, 并使用实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)法检MALAT1和miR-22的表达水平。使用细胞计数试剂盒(CCK-8)检测各处理条件对细胞增殖的影响。使用Transwell法检测在不同处理情况下细胞侵袭性的改变, 两组间均数比较采用t检验。结果本实验中所选用的3个shRNA(shMALAT1_#1、shMALAT1_#2、shMALAT1_#3)与对照组比较均能有效降低SW982中MALAT1的表达(对照组比shMALAT1_#1为1.000±0.015比0.253±0.009, t=8.360, P0.01;对照组比shMALAT1_#2为1.000±0.015比0.39±0.003, t=7.747, P0.01;对照组比shMALAT1_#3为1.000±0.015比0.227±0.004, t=9.735, P0.01)。MALAT1敲低组与对照组比较SW982细胞的增殖明显减慢(对照组比shMALAT1_#1为1.900±0.130比0.750±0.015, t=5.229, P0.01;对照组比shMALAT1_#2为1.900±0.130比0.910±0.002), t=4.718, P0.01;对照组比shMALAT1_#3为1.900±0.130比1.070±0.040, t=3.484, P0.01)。MALAT1敲低组细胞中miR-22的表达水平较对照组明显升高(对照组比shMALAT1_#1为1.000±0.070比2.800±0.048, t=-9.179, P0.01;对照组比shMALAT1_#2为1.000±0.070比2.300±0.050, t=-6.727, P0.01;对照组比shMALAT1_#3为1.000±0.070比2.600±0.040, t=-8.342, P0.01linear median jitter sum)。MALAT1和miR-22双敲低组与MALAGlutaminase抑制剂T1敲低组比较细胞增殖能力明显增加(1.70±0.05比0.78±0.02, t=5.947, P0.01)。Transwell结果显示与对照组比较, MALAT1敲低组SW982的细胞穿膜数量显著降低[对照组比MALAT1敲低组为(62.51±7.34)个/视野比(32.37±5.39)个/视野, t=8.981, P0.01];MALAT1和miR-22双敲低组与MALAT1敲低组比较细胞穿膜数量显著增多[双敲低组比MALAT1敲低组为(57.43±8.54)个/视野比(28.64±5.97)个/视野, t=9.454, P0.01]。结论 MALAT1通过负向调控miR-22可促进滑膜肉瘤细胞系SW982的细胞增殖和侵袭。