逞罗炭疽菌CsSCS7基因功能分析

HOG MAPK (High-Osmolarity Glycerol Mitogen-Activated Protein Kinase)信号途径在渗透压胁迫、病原菌生长发育、致病性和对杀菌剂的敏感性等方面都起重要作用。课题组前期通过暹罗炭疽菌(C.siamense) HOC MAPK途径关键成员CsPBS2为诱饵蛋INCB28060试剂白,用酵母双杂技术筛选获得互作蛋白CsSCS7。本研究分析该蛋白编码基因,其编码404个氨基酸,含有一个Cyt b5结构域,一个低复杂度区域,一个跨膜区域,一个羟化酶结构域。聚类分析显示其与酵母中脂肪酸羟化酶SCS7有50%的相似性。研究构建了基因敲除突变体ΔCsSCS7及其回补转化子ΔCsSCS7/CsSCS7。对突变体、野生型及回补转化子进行表型测定,研究发现,CsSCS7基因缺失突变体在PDA、CM、MM和V8四种培养基上菌落直径显著减少,仅为野生型的6.88%~18.15metabolomics and bioinformatics%;基因缺失突变体ΔCsSCS7分生孢子也较野生型小,分生孢子萌发时间也有所延后,孢子萌发率降低。致病性测定显示,ΔCsSCS7致病能力显著下降。本研究揭示了CsSCS7基因为炭疽菌菌丝生长,可能具有作为丝状真菌防控靶标的潜力。为探索CsSCS7作为防治靶标的可行性,笔者利用喷雾诱导基因沉默(spray induced gene silencing,SIGS)技术,合成靶向CsSCS7的dsRNA。研究发现,CsSCS7-dsRNA能够在一定时间范围内影响菌落生长及分生孢子的萌发,抑制CsSCS7的基因表达。本研究为进一步理解炭疽菌的生长发育、抗药性调控和selleck化学致病机理提供基础,为寻找或挖掘炭疽菌防治新靶标提供科学依据。