癌症已经成为人类病亡的主要原因之Generic medicine一。尽管在过去的十几年间,癌症的治疗取得了快速的进展,但对于肿瘤细胞的根除仍有很大难度。当前对于癌症的治疗大多以化疗为基石,但是化疗通常伴随着严重的副作用,因此有必要找到更安全、更有效的辅助治疗方法。目前,天然活性物质是很有前途的替代品,大量研究表明,许多植物活性多酚能够通过不同的途径发挥抗癌作用,这表明它们之间存在协同抗癌的可能性。原花青素是由不同数量的儿茶素和表儿茶素聚合而成的一大类多酚化合物,它具有抗炎、抗氧化、抗病毒、抗癌等生物功能。白藜芦醇是一种广泛存在于花生、葡萄、虎杖等植物中的非黄酮类多酚化合物,因其具有优秀的抗氧化、抗炎和抗肿瘤特性而著称。关于原花青素和白藜芦醇的研究表明,它们能够通过多种不同的途径发挥抗癌作用。因此,将原花青素和白藜芦醇联合用于癌症治疗可能会通过同时启动多种机制发挥协同抗癌作用。本研究探讨了花生红衣原花青素和白藜芦醇的体外协同抗癌作用,旨在为癌症的精准预防干预提供新思路,为癌症的有效治疗提供新见解。主要研究内容如下:1、PSPC联合RES体外协同抗癌效果研究用细胞毒性试验体外检测PSPC联合RES对CACO-2、HCT-8结直肠癌细胞和HEPG-2、HUH-7肝癌细胞的毒性作用,筛选出能够被PSPC和RES协同抑制的细胞;用细胞克隆形成试验研究被PSPC和RES协同杀伤后的癌细胞的克隆形成能力。结果表明:(1)PSPC和RES都能以浓度GSK1349572体外依赖的方式抑制HCT-8、CACO-2结直肠癌细胞和HEPG-2、HUH-7肝癌细胞的增殖,但它们只对CACO-2细胞发挥协同增殖抑制作用。(2)PSPC和RES都能够抑制CACO-2细胞的克隆形成,且与单独处理组相比,经过PSPC和RES联合处理的CACO-2细胞,其克隆形成能力显著降低。2、PSPC联合RES协同抑制CACO-2细胞生长增殖的机制研究用流式细胞仪检测了PSPC联合RES对CACO-2细胞凋亡和细胞周期的影响。结果表明:(1)PSPC和RES都能以浓度依赖的方式促进CACO-2细胞凋亡,且当样品浓度大于75μM时,PSPC和RES联合处理的促凋亡效果相比它们的单独处理组显著升高。(2)PSPC和RES分别使CACO-2细胞的细胞周期阻滞于G2/M期和GO/G1期,PSPC和RES联合作用时能使CACO-2细胞的细胞周期阻滞于GO/G1期,且这一效果强于RES单独处理组。3、PSPC联合RES协同诱导CACO-2细胞凋亡的机制研究用Western Blot试验检测PSPC联合RES对CACO-2细胞中JNJ-42756493分子量PI3K/AKT、MAPK/ERK、NF-κB信号通路的影响。结果表明:(1)PSPC联合RES能够协同抑制AKT(Thr308)、AKT(Ser473)和ERK蛋白的磷酸化,这表明它们能够同抑制CACO-2细胞中PI3K/AKT和MAPK/ERK信号通路的激活。(2)PSPC联合RES协同促进了CACO-2细胞中IKBα和NF-κB p65蛋白的磷酸化,这代表PSPC和RES能够协同激活CACO-2细胞中的NF-κB信号通路。