研究背景:冠状动脉粥样硬化性心脏病在世界范围内发病率处于领先地位,其中急性冠脉综合征(Acute coronary syndrome,ACS)发病率居高不下,是冠心病的重要组成部分。急性冠脉综合征是一种以心肌组织缺血引起冠状动脉斑块破裂、血栓形成为特点的常见的心脏急症。世界卫生组织统计数据显示,2019年全球约有890万人死于ACS,约占全球死亡人数的16%。ACS包括急性心肌梗死(Acute myocardial infarction,AMI)和不稳定性心绞痛(Unstable angina,UA)。心肌梗死后心肌细胞丢失,成纤维细胞增殖并转化为肌成纤维细胞,分泌大量胶原蛋白,导致过多的细胞外基质沉积于间质内,细胞外基质代谢异常,心肌收缩力下降、心室舒张功能不全,引起心肌纤维化及心室重塑。近年来,对急性冠脉综合征机制的研究已取得较大进展,但急性冠脉综合症与心肌纤维化的关系仍有待进一步研究。多种因素均可以对心肌造成损伤,引起不同类型的纤维化。心肌纤维化是多种心血管疾病发展到一定阶段时的共同病理过程,主要导致心室重构,是猝死的潜在危险因素。尽早预防、早期发现心肌纤维化进程可改善心血管疾病患者预后,研究心肌纤维化的机制对逆转纤维化进程具有重要意义。组织非特异性碱性磷酸酶(Tissue non-spectific alkaline phosphatase,TNAP)是体内普遍分布且具有广泛底物特异性的酶。TNAP可催化各种磷酸盐单酯的水解,形成无机磷酸盐和乙醇(或苯酚)。在体外,纯化的TNAP能够水解三磷酸腺苷(Adenosine triphosphate,ATP),二磷酸腺苷(Adenosine diphosphate,ADP),单磷酸腺苷(AdenosiMCC950配制ne monosphate,AMP)等。随着对TNAP认识的加深,越来越多与病理生理密切相关的底物可见于报道。最近研究表明,TNAP可能是心肌梗死患者全因死亡风险的潜在预测因子,机制可能与其具有调节钙磷代谢功能、并加重血管病变程度有关。但TNAP在冠状动脉粥样硬化性心脏病患者外周循环中表达情况、其与胶原蛋白的关系,以及其潜在机制仍有待进一步研究。研究目的:本研究体外实验利用Ang II诱导构建大鼠心肌纤维化模型,明确TNAP、I型胶原蛋白、III型胶原蛋白的表达水平变化情况。血清学实验检测急性心肌梗死组(AMI组)、对照组、不稳定性心绞痛组(UA组)患者外周循环中TNAP、PICP、PIIINP的表达水平,分析外周循环中三种蛋白的表达差异,探究TNAP是否有辅助预测心肌纤维化发生的潜质。研究方法:1.本部分实验体外研究部soft bioelectronics分使用Ang II对大鼠心肌细胞H9C2进行浓度梯度诱导,构建心肌纤维化模型,24h后提取细胞内总蛋白,Western blot法检测TNAP、I型胶原蛋白、III型胶原蛋白的表达情况。2.血清学研究部分随机选取2022年3月1日至2022年9月30日于吉林大学第二医院心血管内科住院的患者126例为研究对象。通过收集临床系统资料得到明确诊断的ACS组患者85例(AMI组患者44例、UA组患者41例),以及同期冠脉无明显病变的对照组患者41例。收集患者的一般基线资料,采集患者的静脉血5ml,离心获取血清后,采取酶联免疫吸附测定法检测血清中TNAP、PICP、PIIINP的表达水平并使用SPSS 26.0软件进行统计学分析。应用Spearman相关分析TNAP与PICP、PIIINP在血清中表达的相关性,使用ROC曲线评估TNAP对AMI的预测价值。研究结果:1.随着AngII浓度的递增,大鼠心肌细胞TNAP、I型胶原蛋白、III型胶原蛋白表达量升高。2.ACS组患者血清TNAP表达水平较对照组无明显差异(p>0.05);ACS组患者血清PICP表达水平较对照组显著升高(p<0.0001);ACS组患者血清PIIINP表达水平较对照组显著升高(p<0.0001)。3.AMI组患者血清中TNAP表达含量较UA组明显升高(p<0.0001);AMI组患者血清PICP、PIIINP表达水平较UA组无明显差异(p>0.05)。4.TNAPhttps://www.selleck.cn/products/ly2157299.html对AMI的预测水平:AUC为0.734(95%CI:0.646-0.821;p≤0.01),敏感度为54.9%,特异性为87.2%。5.ACS患者中TNAP与PICP、PIIINP存在一定正相关关系。结论:1.Ang II能够诱导H9C2大鼠心肌细胞分泌I型及III型胶原蛋白,且在一定范围内Ang II浓度与I型、III型胶原蛋白的表达正相关。2.AMI患者较UA患者血清TNAP表达水平升高,ACS患者血清PICP、PIIINP表达水平升高,且与TNAP具有一定正相关,血清TNAP有望成为区分AMI与UA的潜在生物学标志物。