紧密连接蛋白OCLN影响马疱疹病毒1型复制的作用研究

为探索紧密连接蛋白OCLN对马疱疹病毒1型(EHV-1)复制的影响,本研究使用CRISPR/Cas9基因编辑技术与慢病毒介导构建OCLN基因稳定敲除和过表达的BHK-21细胞株,采用Western blot检测OCLN敲除和过表达后的蛋白表达情况;使用qPCR、Reed-Muench、WesPanobinostat溶解度tern blot法等检测EHV-1 DNA水平、蛋白表达量、病毒滴度及致细胞病变(CPE)情况等。结果发现,成功构建出OCLN基因敲除的BHK-biomarkers of aging21细胞株,可显著降低EHV-1 DNA水平、蛋白水平和病毒滴度,阻止EHV-1吸附和内化过程,减弱细胞变圆、脱落等CPE发生;OCLN蛋白过表达后显著增加EHV-1 DNA水平、蛋白水平和病毒滴度,加快EHV-1感染造成的CPE。综上所述,结果表明OCLN是EHV-1感染宿主Fer-1采购的关键因子之一,在EHV-1感染靶细胞过程中起着重要作用,为建立抗EHV-1的药物作用靶标筛选提供重要的理论基础。