目的：考察百合乌药汤对非酒精性脂肪性肝病（NAFLD）的治疗作用，并探讨其作用机制。方法：将C57BL/6J小鼠随机分为6组，正常组、模型组、阳性药组（盐酸吡格列酮1.95g·kg~(-1)）、百合乌药汤低、中、高剂量组（1.3、2.5、5.1 g·kg~(-1))。采用60%高脂饮食（HFD）饲喂12周后，进行百合乌药汤给药治疗。每日给药2次，连续6周，每周监测体重。第5周进行葡萄糖耐量（GTT）与胰岛素耐受（ITT）试验；然后处死小鼠取肝脏和血清，同时称量肝脏、附睾脂肪和皮下脂肪（eWAT和iWAT）重量。检测血清总甘油三酯(TG)、和肝功能指标：丙氨酸氨基转移酶(ALT)和天冬氨酸氨基转移酶(AST)。分别用油O染色、苏木素-伊红（HE）染色、Masson染色和透射电子显微镜观察小鼠肝脏脂质沉积、病理形态学以及超微结构的变化。采用Probe based lateral flow biosensor蛋白免疫印迹法（Western blot）和实时荧光定量聚合酶链反应(Real-time PCR)检测胰岛素信号通路分子：胰岛素受体底物1/2→蛋白激酶B→叉头框蛋白O1（IRS1/2→Akt→FoxO1）；糖原合成酶：磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶(Pepck)和葡萄糖-6-磷酸酶（G6Pase）；脂质代谢相关基因：硬脂酰辅酶A去饱和酶-1（SCD-1）和肉碱棕榈酰转移酶（CPT-1）；纤维化相关分子：α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）、I型胶原蛋白（CollagenI）和纤维化传统信号通路：转化生长因子β_(1)→Smad蛋白2/3（TGF-β_(1)→p-Smad/Smad2/3）；炎症因子：白细胞介素（IL）-6、IL-8、IL-11和IL-1β；细胞自噬标志物：微管相关蛋白1A/1B-轻链3（LC3B Ⅱ/LC3B I）、螯合体（p62/SQSTM1）；及哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mTOR）在基因水平或蛋白水平的表达。结果：与模型组比较，百合乌药汤降低NAFLD小鼠体重和肝重（P<0.05， P<0.01），抑制肝脏脂质积累；减轻白色脂肪重量：降低eWAT和iWAT重量（P<0.05， P<0.01），降低血清TG含量（P<0.05， P<0.01）；改善肝功能：降低ALT、AST含量（P<0.05， P<0.01）；改善肝脏胰岛素抵抗：上调IRS2、p-Akt/Akt、p-FoxO1/FoxO1（P<0.05）的蛋白表达；改善糖脂代谢紊乱：降低空腹血糖和餐后血糖RepSox试剂（P<0.05， P<0.01），改善GTT与ITT（P<0.05， P<0.01），降低Pepck、G6Pase、SCD-1（P<0.01），升高CPT-1（P<0.01）的基因表达；减轻肝脏纤维化：下调α-SMA、CollagenⅠ、TGF-β_(1)（P<0.05， P<0.01），升高p-Smad/Smad2/3（P<0.05）的蛋白表达；抑制炎症相关因子：降低IL-6、IL-8、IL-11和IL-1β（P<0.01）的基因表达；增强自噬功能：上调LC3B Ⅱ/LC3B I（P<0NSC125066试剂.05），下调p62/SQSTM1、mTOR（P<0.05）的蛋白表达。结论：百合乌药汤通过改善胰岛素抵抗（IR）和糖脂代谢紊乱、抗炎、抗纤维化等多种途径改善NAFLD，其机制还涉及抑制mTOR介导的信号通路而增强肝脏自噬。