目的 探讨烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD)及其前体物质烟酰胺腺嘌呤单核苷酸(NAM)对人类精子活力、DNA和顶体酶活性的保护作用。方法 选取在我院生殖医学中心就诊的男性精液标本50例，检测其活力(PR级)、DNA碎片指数(DFI)和顶体酶活性。按照NAD/NAM的添加时机不同selleck将每份精液均分为冻前干预组和复苏后干预组。将冻前干预组的标本均分为三份：分别加入PBS、NAD和NAM后37℃孵育30 min,检测其精子活力、DFI和顶体酶活性三项指标后加入精子冷冻保护剂冷冻大于24 h后复苏，再次检测该三项指标。复苏后干预组Salivary microbiome的标本直接加入精子冷冻保护剂冷冻大于24 h后复苏，复苏后的标本均分为三份：分别加入PBS、NAD和NAM后37℃孵育30 min,检测其精子活力、DFI和顶体酶活性三项指标。另选取男性精液标本38例，每例均分为两份，一份冷冻24 h后复苏、另一份冷冻大于两年后复苏；复苏后的标本均分为三份：分别加入PBS、NAD和NAM后37℃孵育30 min,检测其三项指标。结果 精液在冷冻前加入NAD/NAM孵育后精子活力增强、顶体酶活性升高(P<0.05),DFI无明显变化(P>0.05);复苏后活力(前向运动精子百分率)明显PLX5622体外降低(30.5%±4.5%)vs(63.3%±6.8%),精子顶体酶活性显著降低(78.2±8.5μIU)vs(135.0±8.2μIU)(P<0.05),DFI显著升高(25.5%±7.5%)vs(10.2%±8.3%)(P<0.05),但冻前NAD/NAM孵育组的精子活力显著高于对照组(38.4%±8.4%)/(36.5%±7.4%)vs(30.5%±4.5%)(P<0.05),顶体酶活性显著高于对照组(90.4±6.5μIU)/(92.5±5.8μIU)vs(78.2±8.5μIU)(P<0.05),DFI显著低于对照组(16.5%±6.8%)/(18.8%±8.7%)vs(25.5%±7.5%)(P<0.05)。复苏后干预组的精液经NAD/NAM孵育后精子活力升高(40.2%±6.3%)/(42.2%±8.8%)vs(31.2%±7.5%);顶体酶活性升高(98.5±7.6μIU)/(93.8±8.2μIU)VS(80.3±5.8μIU)(P<0.05),DFI未见明显变化(P>0.05)。冷冻大于两年后复苏组的精子活力低于冷冻24 h复苏组(24.5%±4.7%)vs(33.5%±7.4%);顶体酶活性也出现类似的变化(62.4±8.3μIU)vs(83.5±8.3μIU)(P<0.05),经NAD/NAM孵育后的精子活力和顶体酶活性提高(P<0.05),这一作用在冷冻大于两年组更加明显。结论 在精液冷冻前加入NAD可对精子的活力、DNA和顶体酶活性起到很好的保护作用，且这一作用可以延续至精子复苏后，对于长时间冷冻保存的精子，NAD的保护作用更加显著。