灵芝外泌体样纳米囊泡对A549细胞增殖、侵袭及迁移的作用研究

目的 探讨灵芝外泌体样纳米囊泡(Ganoderma lucidum exosome-like nanovesicles,GLEVs)对非小细胞肺癌A549细胞增殖、侵袭及迁移的影响,阐明其抑制非小细胞肺癌A549细胞功能的作用。方法 采用试剂盒法与差速离心法,分离并纯化新鲜灵芝上清液中GLEVs;分别利用0、50、100及150μg/ml GLEVs处理非小细胞癌A549细胞24、48h,Dio染料吞噬实验检测A549细胞对GLEVs的摄取情况;经MTT法测定A549细胞增殖能力;Transwell实验测定A549细胞侵袭能力;Transwell实验测定A54Autoimmune recurrence9细胞迁移能力。结果 Dio染色法分别培养24h和48h后与空白组比较,50、100和150μg/ml GLEVs组被A549细胞摄取量均相应增多(P<0.05),且在150μg/ml质量浓度下培养48h后,绿色荧光信号在A549细胞膜周围均匀分布,呈浓度依赖性。MTT法实验进行24h后与空白组(1.92±0.19个)比较,50μg/ml GLEVs组增殖数量(2.77±0.27个)增加比较明显(P<0.001);100μg/ml GLEVs组增殖数量(1.59±0.07个)减少(P<0.05);培养48h后与空白组(1.23±0.09个)比较,150μg/ml GLEVs组增殖数量(1.05±0.10)减少比较明显(P<0.001)。通过Transwell实验评估细胞侵袭能力,培养24h后与空白对照组(144.75±20.25个)相比,50和100μg/ml GLEVs组细胞侵袭数量分别为(40.25±13.25个,P<0.05;67.50±34.50个,P<0.05))和细胞侵袭率降低(27.8%±11.5%,46.6%±28.5%)。用Transwell法与空白对照组相比,培养48h后,当GLEVs质量浓度为50、100及150μg/ml时,穿过小室的细胞数分别为(22.33±2.67个,P<0.05;13.33±2.33个,P<0.05;4.67±1.67个,P<0.01),明显低于空白对照组(37.33±4.67个)Etoposide供应商。结果表明,GLEVs浓度为50和100μg/ml时,可以抑制A549的迁移能力,浓度为150μg此网站/ml,可以显著抑制A549的迁移能力。