研究背景:曲霉属丝状真菌是引起人类浅表和侵袭性感染以及过敏反应的重要病原体,特别是由曲霉菌属引起的侵袭性真菌病,尽管已经取得了一些进展,但对于真菌感染的诊断仍然很困难。目前抗真菌药物的耐药率不断增加,因此迫切需要找到快速准确的诊断方法以及预防措施。目前免疫蛋白质组学技术的应用为曲霉疾病的诊断、治疗和疫苗研发提供了新的靶点,是未来研究的主要方向。目的:(1)探讨2020年11月至2021年3月肺部感染患者曲霉菌属感染的情况,比较不同检测方法对曲霉菌属检测的灵敏度和特异性。(2)本研究对Cal A和更多Cal B的免疫反应性及免疫原性进行评估,以评价其作为病原菌感染诊断标志和疫苗候选抗原的可行性。材料及方法:(1)收集2020年11月至2021年3月的肺泡灌洗液,通过分子诊断学技术,从162个肺泡灌洗液中鉴定出12个曲霉菌属感染,结合真菌培养和MALDI-TOF MS全自动生物质谱鉴定系统、显微镜检查、GM及BDG试验分析其诊断方法的灵敏度和特异性。(2)采用大肠埃希菌表达系统表达重组Cal A和Cal B蛋白后,将NPF-03084014 molecular weighti-NTA琼脂糖亲和柱纯化后的蛋白对小鼠进行免疫。通过酶联免疫吸附法(ELISA)分别检测25例烟曲霉感染的患者和一组免疫小鼠血清中Cal A和Cal B特异性的Ig G抗体其Ig G亚型的水平、Cal A和Cal B免疫后小鼠脾细胞的抗原特异性免疫应答及FACS技术检测小鼠外周血/脾脏淋巴细胞亚群和Th1/Th2型细胞因子模式来探究Cal A和Cal B的抗原反应性和免疫原性。biomass pellets结果:(1)曲霉菌属感染的患者主要为男性,年龄>65岁居多。(2)对比之下,培养方法的灵敏度和特异性较高,抗原方法特异性较低,镜检方法灵敏度最低。(3)分子诊断学方法具有较高的灵敏度。(4)烟曲霉感染的患者体内有特异性Cal A和Cal B抗体,在经Cal A和Cal B免疫的小鼠中,Ig G1是主要的Ig G亚型。(5)Cal A和Cal B免疫的小鼠体内Th1、Th2和Th17型的细胞因子均有分泌。结论:体外实验及动物实验结果表明:Cal A和Cal B其具有良好的抗原反应性及免疫原性,可诱导Th1、Th2、Th17型细胞因子应答和高水平Ig G1抗体的产生,表明Cal A和Cal B具有成为烟曲霉诊断标志物和候选疫苗的潜力。