目的 制备日本血吸虫谷胱甘肽S?转移酶相对分子质量（Mr） 26 000亚基（Sj26gst） mRNA并评价其免疫原性。方法 根据Sj26gst编码区序列（NC＿002544.1），用人类常用的密码子优化Sj26gst编码序列，两端加β球蛋白3′和5′非编码区（UTR），合成后连接至pcDNA3.1(+)，构建pcDNA3.1/Sj26gst质粒，以线性化的pcDNA3.1/Sj26gst质粒为模版，体外转录Sj26gst mRNA。用脂质体将Sj26gst mRNA转染至HeLa细胞中，转染后2、6、12、24、48 h取HeLa细胞，免疫荧光定量PCR (qRT?PCR)检测Sj26gst mRNA的相对水平，蛋白质免疫印Tezacaftor研究购买迹（Western blotting）检测Sj26GST蛋白的表达水平。雌性BALB/c小鼠随机均分为Sj26gst mRNA组、pcDNA3.1/Sj26gst组、pcDNA3.1组和PBS组（每组6只），分别于小鼠左后腿股四头肌肌内注射100μg的Sj26gst mRNA、pcDNA3.SB431542 MW1/Sj26gst质粒、pcDNA3.1质粒和PBS (100μl)，共免疫3次，每次间隔2周。分别采集免疫前（0），首次免疫后2、4、6、8周小鼠尾静脉血，制备血清，ELISA检测血清Sj26GST特异性IgG抗体水平。首次免疫后8周，无菌分离小鼠脾组织，制备脾淋巴细胞悬液，37℃培养48 h后，加入10μl细胞增殖试剂培养4 h后测定脾细胞刺激指数，ELISA法检测脾淋巴细胞上清中Th1型[肿瘤坏死因子α (TNF?α)、干扰素γ (INF?γ)],Th2型[白细胞介素4 (IL?4)、IL?10]和Th17型（IL?17）细胞因子的水平。组间比较采用单因素方差分析。结果 优化后的Sj26gst编码序列长858 bp,GC含量为63.2%，二级结构的自由能变为-485.6 kcal/mol。电泳结果显示，体外转录的Sj26gst mRNA条带呈单一且无弥散的条带。RT?PCR结果显示，Sj26gst mRNA转染后2 h,HeLa细胞Sj26gst mRNA相对水平为6.21±0.83,6 h达到峰值（14.26±1.23），随后下降；Western blotting结果显示，Sj26gst mRNA转染后6、12、24、48 h均检出Mr26 000的Sj26GST蛋白条带。ELISA检测结果显示，首次免疫后8周，Sj26gst mRNA组、pcDNA3.1/Sj26gst组、pcDNA3.1组和PBS组的A450分别为0.85±0.16、0.42±0.21、0.14±0.03和0.11±0.02,Sj26gst mRNA组与pcDNA3.1/Sj26gst组、pcDNA3.1/Sj26gst组与pcDNA3.1组之间差异均有统计学意义（t=16.46、12.35，均P <0.05）。首次免疫后8周，Sj26gst mRNA组、pcDNA3.1/Sj26gst组小鼠脾淋巴细胞增殖指数分别为11.25±1.22、6.37±2.45，高于pcDNA3.1组（2.56±0.38）和PBS组（1.27±0.45）(t=9.98、5.25，均P <0.05)。ELISA检测结果显示，Sj26gst mRNA组小鼠脾淋巴细胞上清中TNF?αFluimucil Antibiotic IT、INF?γ、IL?10和IL?17的表达水平分别为（756.23±134.35）、（598.46±50.47）、（713.42±118.25）、（301.45±48.23） pg/ml,pcDNA3.1/Sj26gst组分别为（587.26±32.48）、（401.45±46.25）、（386.27±23.75）、（175.24±41.23），均高于pcDNA3.1组的（19.34±2.01）、（35.14±5.25）、（32.11±15.20）、（19.75±7.21） pg/ml和PBS组的（18.75±1.98）、（34.12±4.78）、（29.36±8.72）、（15.34±2.51）pg/ml(t=54.59、19.57、52.36、26.47，均P <0.05)。结论 构建了稳定表达Sj26gst mRNA的质粒，Sj26gst mRNA可诱导产生高水平的特异性Sj26GST蛋白抗体并诱导Th1型细胞免疫应答。