利用CRISPR-Cas9基因编辑技术敲除人Huh7肝癌细胞的血管紧张素转化酶2(ACE2)基因，构建ACE2基因敲除细胞株，为研究ACE2在肝细胞癌的作用提供细胞模型。首先，对ACE2结构域进行鉴定，利用在线网站设计两条破坏所有结构域、靶向作Captisol用于ACE2外显子的sgRNA。其次，构建重组载体并转染肝癌细胞Huh7，嘌呤霉素筛选出单克隆细biopsy naïve胞株。最后，免疫印迹鉴定敲除效果。结构域鉴定结果显示，在340-520号氨基酸位置存在Zn结合位点Lapatinib IC50和激活位点，根据sgRNA靶点设计原则，采用片段敲除的方式，针对ACE2的第九、第十外显子设计两对sgRNA，并成功构建PX459-ACE2-sgRNA重组质粒。嘌呤霉素成功筛选出单克隆细胞株，并测序证实了发生片段敲除，ACE2蛋白在敲除细胞株中不表达；成功构建ACE2敲除的Huh7细胞株，为日后研究ACE2在肝细胞癌的发生机制奠定基础。