目的:枸杞中富含多种具有抗氧化作用的生物活性物质,然而新鲜枸杞果皮细嫩、含水量高,采摘、运输过程中易发生机械损伤而导致糖化霉变。当前主要通过硬度、失重率、可溶性固形物等理化指标来评价鲜枸杞的采后品质,难以综合评价果实抗氧化活性变化。本研究基于替代测试技术,建立PC12细胞氧化应激损伤模型评价贮藏期间鲜枸杞提取物(Lycium barbarum extracts,LBE)的抗氧化活性。方法:首先,基于全因子试验设计建立了LBE中水溶性营养物质超声辅助前处理方法,确定了枸杞提取物的最佳提取条件。进一步,建立LBE-多菌灵-PC12细胞氧化应激损伤模型:枸杞提取物(1.5 mg/ml)预处理PC12细胞2 h,加入多菌灵(15.9μmol/L)诱导24 h,通过CCK-8法考察制备的枸杞提取物对PC12细胞氧化应激损伤的保护作用。再进一步,开展鲜枸杞贮藏试验,于0℃条件下贮藏0、4、8、12、16、21天。将不同贮藏时间的枸杞提取物作用于细胞模型,通过检测细胞活性评价枸杞的抗氧化活性,并使用DPPH法验证细胞模型抗氧化活性效果。最后,开展了基于转录组学、分子生物学、代谢组学的枸杞提取物抗氧化机制解析。结果:根据铁还原抗氧化能力和DPPH自由基清除能力测定结果,确定超声时间为影响提取效率的显著性影响因子,对该因子进行进一步的单因子优化,确定枸杞中营养物质的最佳提取条件为EPZ-6438体内15 min、30℃、100 W;对不同贮藏时间的枸杞进行体外抗氧化活性评价,结果显示0-12天的鲜枸杞提取物均对PC12氧化应激损伤细胞具有保护作用,12-21天组细胞Healthcare acquired infection活性无明显变化;给药组第0天对PC12损伤细胞的恢复效果最好,与染毒组相比,细胞增殖活性可达到180%。DPPH法验证结果表明,贮藏期间鲜枸杞提取物DPPH自由基清除率随时间延长而显著下降,与细胞模型的评价结果基本一致。转录组学和分子生物学结果表明,加入枸杞干预后,细胞内线粒体膜电位和氧化NSC 127716配制磷酸化得到有效缓解。结论:本研究建立的LBE-多菌灵-PC12细胞氧化应激损伤模型可有效评价鲜枸杞在贮藏期间抗氧化活性的变化,确定了鲜枸杞的最佳贮藏包装条件。本研究结果将为鲜枸杞的贮藏保鲜提供参考,并为枸杞中生物活性物质抗氧化机制的解释提供理论依据。